專利名稱：用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑、其制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及耐熱凍干保護(hù)劑，具體為一種用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑、其制備方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
凍干保護(hù)劑可影響生物制品的質(zhì)量、效價(jià)和穩(wěn)定性，改變生物制品的生產(chǎn)工藝， 并增大產(chǎn)品批次間的穩(wěn)定性。耐熱凍干保護(hù)劑有免疫活性但無(wú)藥理活性，可在凍干和保存時(shí)維持疫苗的穩(wěn)定性。耐熱凍干保護(hù)劑及其制備方法是疫苗生產(chǎn)中的一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)。對(duì)于耐熱保護(hù)劑在組織液保護(hù)中的應(yīng)用，耐熱保護(hù)劑中原輔材料的選擇、配制、滅菌、保存和使用，對(duì)于耐熱凍干保護(hù)劑的保護(hù)質(zhì)量起著至關(guān)重要的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種配制方法簡(jiǎn)單、成本低、具有良好保護(hù)性能的用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑。本發(fā)明的具體技術(shù)方案為用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑，由以下成分組成 每IOOOml體積中含蔗糖48 52g、胰蛋白胨48 52g、海藻糖4 6g、最小必需培養(yǎng)基 Medium 199 9 llg、酶解干酪素NZ-Amine AS 36 39g、明膠7 9g，其余為純化水。用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑，優(yōu)選由以下成分組成每IOOOml體積中含蔗糖 50g、胰蛋白胨50g、海藻糖5g、最小必需培養(yǎng)基Medium 199 10g、酶解干酪素NZ-Amine AS 37.5g、明膠8g，其余為純化水。本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供上述耐熱保護(hù)劑的制備方法，其技術(shù)方案為制備用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑的方法，包括以下步驟
(1)用80 90°C純化水將明膠溶解后再依次加蔗糖、胰蛋白胨、海藻糖、最小必需培養(yǎng)基Medium 199、酶解干酪素NZ-Amine AS等成分；
(2)高壓滅菌；
(3)2- 8°C 保存 90 天。所述高壓滅菌為在15磅壓力下滅菌15分鐘。本發(fā)明用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑在保護(hù)組織液中的應(yīng)用，耐熱保護(hù)劑與組織液按照1:1的體積比配制。本發(fā)明的有益效果為適用于雞傳染性法氏囊活疫苗、鴨瘟組織毒活疫苗、雞傳染性喉氣管炎活疫苗；可常溫保存；對(duì)組織液有良好的保護(hù)性能；配制方法簡(jiǎn)單、成本低。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:
用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑，由以下成分組成每IOOOml體積中含蔗糖50g、胰蛋白胨50g、海藻糖5g、最小必需培養(yǎng)基Medium 199 10g、酶解干酪素NZ-Amine AS 37. 5g、明膠8g，其余為純化水。制備用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑的方法，包括以下步驟
(1)用80 90°C純化水將225明膠(購(gòu)自北京拜爾迪生物公司)溶解后再依次加蔗糖、 胰蛋白胨、海藻糖、最小必需培養(yǎng)基Medium 199(購(gòu)自北京清大天一生物技術(shù)有限公司)、酶解干酪素NZ-Amine AS (購(gòu)自北京拜爾迪生物公司)等成分；
(2)15磅壓力下高壓滅菌15分鐘；
(3)2— 8°C保存 90 天。用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑在保護(hù)組織液中的應(yīng)用，耐熱保護(hù)劑與組織液按照 1:1的體積比配制。實(shí)施例2:
用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑，由以下成分組成每IOOOml體積中含蔗糖52g、胰蛋白胨48g、海藻糖4g、最小必需培養(yǎng)基Medium 199 llg、酶解干酪素NZ-Amine AS 39g、明膠7g，其余為純化水。制備用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑的方法，同實(shí)施例1。用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑在保護(hù)組織液中的應(yīng)用，同實(shí)施例1。實(shí)施例3:
用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑，由以下成分組成每IOOOml體積中含蔗糖48g、胰蛋白胨52g、海藻糖6g、最小必需培養(yǎng)基Medium 199 9g、酶解干酪素NZ-Amine AS 36g、明膠 9g，其余為純化水。制備用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑的方法，同實(shí)施例1。用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑在保護(hù)組織液中的應(yīng)用，同實(shí)施例1。試驗(yàn)例保護(hù)效力試驗(yàn)。1、試驗(yàn)材料毒株雞傳染性法氏囊活疫苗(B87株)，購(gòu)自中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所；
2、試驗(yàn)疫苗按照本發(fā)明方法配制耐熱凍干保護(hù)劑，與組織液按照1:1的體積比配制， 凍干處理后，得疫苗；
3、試驗(yàn)疫苗的保存及效價(jià)測(cè)定分別置于2 8°C和室溫保存，按2010年版《中國(guó)獸藥典》方法測(cè)定不同時(shí)間病毒含量，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)下表(單位為EID5tl/羽份)
權(quán)利要求
1.用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑，其特征是，由以下成分組成每IOOOml體積中含蔗糖48 52g、胰蛋白胨48 52g、海藻糖4 6g、最小必需培養(yǎng)基Medium 199 9 llg、 酶解干酪素NZ-Amine AS 36 39g、明膠7 9g，其余為純化水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑，其特征是，由以下成分組成 每IOOOml體積中含蔗糖50g、胰蛋白胨50g、海藻糖5g、最小必需培養(yǎng)基Medium 199 10g、 酶解干酪素NZ-Amine AS 37. 5g、明膠8g，其余為純化水。
3.制備權(quán)利要求1一2任何一項(xiàng)所述用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑的方法，其特征是， 包括以下步驟(1)用80 90°C純化水將明膠溶解后再依次加蔗糖、胰蛋白胨、海藻糖、最小必需培養(yǎng)基Medium 199、酶解干酪素NZ-Amine AS等成分；(2)高壓滅菌；(3)2— 8°C保存 90 天。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是所述高壓滅菌為在15磅壓力下滅菌15分鐘。
5.權(quán)利要求1用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑在保護(hù)組織液中的應(yīng)用，其特征是，耐熱保護(hù)劑與組織液按照1:1的體積比配制。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑、其制備方法及其應(yīng)用。其目的在于提供一種配制方法簡(jiǎn)單、成本低、具有良好保護(hù)性能的用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑。本發(fā)明的具體技術(shù)方案為用于組織液凍干的耐熱保護(hù)劑，由以下成分組成每1000ml體積中含蔗糖48～52g、胰蛋白胨48～52g、海藻糖4～6g、Medium199 9～11g、NZ-AmineAS36～39g、明膠7～9g，其余為純化水。本發(fā)明的有益效果為對(duì)組織液有良好的保護(hù)性能；配制方法簡(jiǎn)單、成本低。
文檔編號(hào)A61K39/245GK102430126SQ20111045550
公開(kāi)日2012年5月2日 申請(qǐng)日期2011年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月31日
發(fā)明者李本科, 李炳更, 楊靈芝, 賈紅梅, 陳申秒 申請(qǐng)人:山東濱州博萊威生物技術(shù)有限公司