專利名稱：At1受體拮抗劑/利尿劑/葉酸聯(lián)用的藥物組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及血管緊張素II受體(AT1受體)拮抗劑/利尿劑/葉酸聯(lián)合應(yīng)用的藥物組合物及其用途，屬于藥學(xué)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
作為危害人類健康的常見病之一，原發(fā)性高血壓是引起嚴(yán)重的心腦血管疾病如心肌梗塞、腦卒中，以及腎臟疾病等的主要原因。治療高血壓的主要目的是最大限度地降低心血管病的死亡和病殘的總危險，藥物降低血壓可以有效地降低心血管并發(fā)癥的發(fā)病率和死亡率，防止腦卒中、冠心病、心力衰竭和腎臟疾病的發(fā)生和發(fā)展。WHO和我國高血壓防治指南推薦的一線抗高血壓藥物分別是利尿劑、β-腎上腺素受體拮抗劑、鈣通道阻滯劑、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑、AT1受體拮抗劑，或者由上述藥物組成的固定劑量的復(fù)方降壓制劑。多數(shù)高血壓患者需要兩種或兩種以上的抗高血壓藥物來達(dá)到控制血壓目標(biāo)，兩種藥物可單獨處方或為固定劑量的復(fù)方制劑。國際大規(guī)模臨床試驗證明合并用藥有其需要和價值，每種藥物的劑量不大，藥物的治療作用應(yīng)有協(xié)同或至少相加作用，其不良作用可以相互抵消或至少不重疊或相加。
在美國高血壓預(yù)防、檢測、評估和治療全國聯(lián)合委員會第七次報告(JNC-7)、歐洲心臟病學(xué)會/歐洲高血壓學(xué)會(ESC/ESH)及中國的高血壓防治指南推薦的高血壓聯(lián)合用藥中，半數(shù)以上的聯(lián)合用藥中使用了利尿劑，其中主要是噻嗪類利尿劑氫氯噻嗪(Hydrochlorothiazide)。
半個世紀(jì)以來，人們對利尿劑的使用較為波折。自50年代起，利尿劑就作為常見的抗高血壓藥應(yīng)用于臨床。1978年噻嗪類利尿劑即被世界衛(wèi)生組織列為一線降壓藥，常單獨應(yīng)用于治療輕、中度高血壓。但臨床應(yīng)用發(fā)現(xiàn)，長期使用噻嗪類利尿劑可引起低血鈉、低血鉀和低血氯，約30％的患者發(fā)生糖耐量異常。另外由于抑制碳酸酐酶，減少H+分泌使NH3排出減少，引起血氨升高。氫氯噻嗪長期使用可影響脂肪酶的活性，使甘油三脂分解代謝減少，甘油三脂升高，導(dǎo)致脂肪代謝紊亂，或引起輕度膽固醇增加。因此，隨著鈣通道阻滯劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑等新型抗高血壓藥的出現(xiàn)，利尿劑臨床使用量顯著減少。
然而近十年來，人們重新發(fā)現(xiàn)以小劑量利尿劑作為基礎(chǔ)降壓藥物，能顯著降低老年高血壓患者的心血管疾病的患病率和死亡率；小劑量利尿劑同以前的劑量相比，降壓效果相似而不良反應(yīng)減少；利尿劑引起的有效血容量減少是對高血壓必要的治療，可能是其他降壓藥物治療的基礎(chǔ)；于是又開始重視利尿劑的使用。并且認(rèn)為利尿劑和β受體拮抗劑是目前唯一明確的能夠顯著降低心血管疾病(尤其對老年患者)患病率和致死率的藥物。如果無使用禁忌證，無使用其他降壓藥物的強烈指征，應(yīng)首選這兩類藥物。
2005年歐洲心臟病學(xué)學(xué)會(ESC)學(xué)術(shù)大會公布ASCOT(Anglo-Scandinavian CardiocOutcomes Trial)的結(jié)果，ASCOT的研究對象為19257例高血壓(未治療者血壓≥160/100mmHg；已接受治療者血壓≥140/90mmHg)患者，至少有其他3個或以上的心血管危險因素，而無明確診斷的冠心病，ASCOT可作為針對臨床上常見的心血管中度危險高血壓患者心血管一級預(yù)防的研究，主要終點為非致命性心肌梗死(MI)或致命性冠心病(CHD)。結(jié)果與阿替洛爾或聯(lián)用利尿劑(β受體阻斷劑和噻嗪類利尿劑配伍)對比，氨氯地平(或聯(lián)用培哚普利)組總死亡率下降11％(P＝0.0247)，心血管死亡減少24％(P＝0.001)，腦卒中減少23％(P＝0.0003)，冠心病事件減少16％(P＜0.01)，新發(fā)生糖尿病減少30％(P＜0.01)。因此，具有心血管疾病中度危險的高血壓患者采用以鈣通道阻滯劑為基礎(chǔ)必要時加用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑的治療方案，其療效優(yōu)于以阿替洛爾為基礎(chǔ)或加用噻嗪類利尿劑的療效，這一優(yōu)勢尤其在患者治療早期達(dá)標(biāo)時最為顯著?？梢?，β受體阻斷劑聯(lián)用噻嗪類利尿劑不再是所有高血壓患者的一線治療藥物。
ASCOT研究引起人們重新審視利尿劑在高血壓治療中的地位，使用噻嗪類利尿劑的利弊都十分突出。美國高血壓防治指南JNC-7中，強化了噻嗪類利尿劑作為抗高血壓一線治療藥物的重要地位，在6項強適應(yīng)癥中有4項(心力衰竭、冠心病高危、糖尿病和預(yù)防腦卒中復(fù)發(fā))列有噻嗪類利尿劑；并且從成本一效益角度分析，噻嗪類利尿劑列為最值得選擇的抗高血壓藥物。同時噻嗪類利尿劑的不良反應(yīng)多也是被人們所公認(rèn)的。如何能夠進一步提高利尿劑或含有利尿劑的復(fù)方降壓藥對高血壓患者的靶器官保護作用，降低高血壓引起的心腦血管事件的風(fēng)險性，減少利尿劑或含有利尿劑的復(fù)方降壓藥的不良反應(yīng)，無論從臨床意義還是社會意義上，都是值得研究或解決的問題。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服含利尿劑的復(fù)方降壓藥存在的上述不足，提供一種在靶器官保護和降低心腦血管事件危險性方面優(yōu)于含利尿劑的復(fù)方降壓藥，而副作用不增加的藥物組合物。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案 一種藥物組合物，包括 (1)藥用劑量的血管緊張素II受體拮抗劑； (2)藥用劑量的利尿劑； (3)藥用劑量的葉酸類化合物； (4)藥劑學(xué)上可接受的載體。
上述“藥用劑量”是指《中國高血壓防治指南(2005年)》和《The Seventh Report of theJoint National Committee on Prevention，Detection，Evaluation，and Treatment of High BloodPressure(JNC-7)》中相對應(yīng)的各種具體降壓藥的推薦劑量，或各藥品說明書規(guī)定的劑量范圍。
上述藥用劑量的葉酸類化合物為葉酸、亞葉酸鈣或左旋亞葉酸鈣，劑量為0.2～1.6mg，優(yōu)選0.4～1.0mg。
上述血管緊張素II受體拮抗劑選自替米沙坦、厄貝沙坦、坎地沙坦、奧美沙坦、氯沙坦、依普沙坦、或纈沙坦中的一種，劑量為8～300mg。
上述利尿劑選自氫氯噻嗪、吲達(dá)帕胺、依普利酮、或螺內(nèi)酯中的一種，劑量為2.5～50mg。
上述藥用劑量的血管緊張素II受體拮抗劑/利尿劑降壓藥，其具體類別與劑量見下表，但不限于下表范圍。
上述藥用劑量的AT1受體拮抗劑為替米沙坦40～80mg；上述藥用劑量的利尿劑為氫氯噻嗪12.5～25mg；上述葉酸類化合物為葉酸、亞葉酸鈣或左旋亞葉酸鈣，劑量為0.2～1.6mg。
上述藥用劑量的AT1受體拮抗劑為厄貝沙坦75～300mg；上述藥用劑量的利尿劑為氫氯噻嗪12.5～25mg；上述葉酸類化合物為葉酸、亞葉酸鈣或左旋亞葉酸鈣，劑量為0.2～1.6mg。
上述藥用劑量的AT1受體拮抗劑為坎地沙坦8～32mg；上述藥用劑量的利尿劑為氫氯噻嗪12.5～25mg；上述葉酸類化合物為葉酸、亞葉酸鈣或左旋亞葉酸鈣，劑量為0.2～1.6mg。
上述藥用劑量的AT1受體拮抗劑為奧美沙坦20～40mg；上述藥用劑量的利尿劑為吲達(dá)帕胺2.5～5mg；上述葉酸類化合物為葉酸、亞葉酸鈣或左旋亞葉酸鈣，劑量為0.2～1.6mg。
我們運用本發(fā)明藥物對高血壓治療的研究過程中，著重針對靶器官保護和降低心腦血管事件危險性方面。這是因為若高血壓不進行有效控制，持續(xù)幾年后可引起全身細(xì)小動脈硬化，管腔變窄，輸送至組織的血流速度減慢，造成心、腦、腎、眼等重要臟器損害。高血壓引起的靶器官損害，包括左室肥厚、良性小動脈性腎硬化癥、惡性小動脈性腎硬化癥、腎功能衰竭、視網(wǎng)膜動脈硬化、或高血壓眼底病變。當(dāng)上述這些靶器官損害仍不能給予有效控制，則發(fā)展成為更嚴(yán)重的后果，即心腦血管事件的發(fā)生，心腦血管事件包括心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、腦梗塞、或腦出血，其中腦梗塞、腦出血統(tǒng)稱為腦卒中。因此，治療高血壓病人的主要目的是最大限度地降低心腦血管病的死亡和病殘的總危險，降壓與靶器官保護并舉是高血壓治療的核心。
研究發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的藥物組合物不僅具有降壓作用還具有靶器官保護作用。當(dāng)將AT1受體拮抗劑/利尿劑與葉酸類化合物合用時，還能協(xié)同增強靶器官保護作用，且其保護作用強于僅應(yīng)用AT1受體拮抗劑/利尿劑二聯(lián)復(fù)方降壓藥，也強于單用葉酸類化合物，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
因此，本發(fā)明提供了上述藥用劑量的AT1受體拮抗劑/利尿劑和藥用劑量的葉酸類化合物組成的藥物組合物在制備用于預(yù)防、治療或延緩高血壓的藥物中的用途；本發(fā)明提供該藥物組合物在制備用于預(yù)防、治療或延緩高血壓引起的靶器官損害的藥物中的用途，高血壓引起的靶器官損害，包括左室肥厚、良性小動脈性腎硬化癥、惡性小動脈性腎硬化癥、腎功能衰竭、視網(wǎng)膜動脈硬化、或高血壓眼底病變。
進一步，在實驗中，我們發(fā)現(xiàn)，當(dāng)將AT1受體拮抗劑/利尿劑與葉酸類化合物合用時，能協(xié)同降低心腦血管事件危險性，且作用強于僅應(yīng)用AT1受體拮抗劑/利尿劑二聯(lián)復(fù)方降壓藥，也強于單用葉酸類化合物，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
進而，本發(fā)明還提供該藥物組合物在制備用于降低高血壓引起的心腦血管事件危險性的藥物中的用途；其中降低心腦血管事件危險性是指降低心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、腦梗塞、或腦出血的發(fā)生率，降低心腦血管事件危險性還指降低腦卒中的發(fā)生率。
該藥物組合物中還含有藥劑學(xué)可接受的載體，可制成普通口服制劑，包括普通片劑、膠囊、顆粒劑等，制成普通口服制劑時所述藥學(xué)上可接受的載體包括有助于將活性化合物配制成藥用制劑的賦形劑和輔藥，如淀粉、微晶纖維素、無機鹽類、蔗糖、糊精、乳糖、糖粉、葡萄糖、氯化鈉、半胱氨酸、檸檬酸和亞硫酸鈉等的一種或幾種物質(zhì)的組合物，屬于本領(lǐng)域常識。
該藥物組合物的劑型包括但不限于普通片劑、雙層片劑、多層片劑、緩釋片劑、單室控釋片劑、雙室控釋片劑、微孔型控釋片劑、舌下含片、口腔速崩片、分散片、腸溶片、顆粒劑、丸劑、腸溶膠囊、延遲釋放片、定時/位釋放片、普通膠囊、緩釋膠囊、控釋膠囊、含有微丸或小片的膠囊、含有微丸或小片的pH依賴型膠囊、顆粒劑、口服液、膜劑或貼劑等劑型，其中優(yōu)選片劑、膠囊或顆粒劑。
根據(jù)本發(fā)明，藥物組合物也可以是指含有兩個或三個獨立藥物的藥盒。當(dāng)“藥物組合物”是指含有兩個獨立藥物的藥盒時，上述“組合藥盒”是一種盒狀容器，內(nèi)置多種劑量形式的藥物組合，及其服用說明書，“組合藥盒”更適用于個體化用藥；第一個藥物為含有AT1受體拮抗劑/利尿劑，第二個藥物為葉酸類化合物。當(dāng)“藥物組合物”是指含有三個獨立藥物的藥盒時，上述“組合藥盒”是一種盒狀容器，內(nèi)置多種劑量形式的藥物組合，及其服用說明書；第一個和第二個藥物分別含有AT1受體拮抗劑和利尿劑，第三個藥物中含有葉酸類化合物。該藥盒中的兩個或三個獨立的藥物可以伴隨給藥，也可以在同一種藥物制劑中或者在不同的藥物制劑中按順序給藥。
本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明提供的藥物組合物具有明顯協(xié)同作用，其協(xié)同作用在于能協(xié)同降低高血壓引起的靶器官損害，協(xié)同降低高血壓引起的心腦血管事件危險性。因此，本發(fā)明提供了上述藥用劑量的AT1受體拮抗劑/利尿劑和藥用劑量的葉酸類化合物組成的藥物組合物在制備用于預(yù)防、治療或延緩高血壓、高血壓引起的靶器官損害或高血壓相關(guān)疾病的藥物中的用途；進一步，本發(fā)明提供了上述藥物組合物在制備用于降低高血壓引起的心腦血管事件危險性的藥物中的用途。通過本發(fā)明的實施，提供給患者這種特定用途的藥物組合物可以提高患者依從性，使患者服藥方便，降低醫(yī)療費用，具有較好市場前景。
下面結(jié)合具體實施方式
對本發(fā)明做進一步說明，藥理作用的實驗支持詳見以下具體實施方式
。

具體實施例方式 實施例1替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸對自發(fā)性高血壓大鼠降壓及靶器官損害的保護作用 自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)分別購自上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司(許可證號SCXK(滬)2003-0003)，北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司(許可證號SCXK(京)2002-0003)，并在本室飼養(yǎng)繁殖，備用。8～10周齡后大鼠血壓升高，測定大鼠血壓1周(第1、6天)，取血壓穩(wěn)定的大鼠用于實驗。高血壓大鼠分組和給藥劑量見表1，另設(shè)WKY正常對照組，每組20只。灌胃給藥，每天1次，每周稱重一次，根據(jù)體重調(diào)整藥量，連續(xù)26周。觀察指標(biāo) (1)分別測定給藥前和給藥后不同時間血壓(179型血壓測定儀，美國IITC Life ScienceInc．)計算降壓幅度(＝給藥前收縮壓-給藥后收縮壓)；26周末，取血測按試劑盒說明書，測定血清一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。
(2)收集尿液，用磺基水楊酸法在分光光度計測定尿蛋白濃度，計算24h尿蛋白量。放免法測定24h尿α1微球蛋白，按照試劑盒說明書測定尿肌酐；取血測定血肌酐、血尿素氮(BUN)，計算肌酐清除率(Ccr)。
(3)左心室重和室重指數(shù) 取大鼠心臟，用預(yù)冷生理鹽水洗凈，分離左心室(包括室間隔)，稱左心重，計算室重指數(shù)(左心室mg/體重g)。
(4)心肌羥脯氨酸測定 大鼠處死后，取左室心肌組織約50mg，采用Bergman法測定羥脯氨酸含量，并計算膠原含量。膠原含量＝8.2×羥脯氨酸含量(mg/g)。
(5)心肌組織常規(guī)切片，HE染色，采用Takemori等描述的方法，每一標(biāo)本取10個胞核位于中央的心肌細(xì)胞，測量心肌細(xì)胞的橫截面積、長徑和短徑，取其均值作為該標(biāo)本的所得值。心肌組織常規(guī)切片，天狼星紅-苦味酸染色，測量心肌膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)和心肌血管周圍膠原面積(PVCA)。CVF為膠原面積與心肌總面積的比值，其中膠原面積不包括血管周圍膠原面積，隨機分析5個視野，取其均值。PVCA為每一標(biāo)本測量4支呈橫切面的壁內(nèi)小動脈的周圍面積與管腔面積的比值，取其均值。
(6)腸系膜動脈的組織學(xué)觀察處死大鼠后，取腸系膜上動脈第二級分枝5mm(從回盲部倒數(shù)，第二根腸系膜上動脈分枝的第二級分枝中間5mm)，置10％中性福爾馬林中固定，常規(guī)脫水、包埋，切片厚5μm，HE染色，每條動脈切5個橫切面，選取標(biāo)準(zhǔn)橫切面的切片進行光鏡觀察，利用計算機圖像采集系統(tǒng)與分析系統(tǒng)進行分析，在統(tǒng)一放大10×40倍的顯微鏡下，測量小血管中膜厚度、內(nèi)徑，計算中膜厚度/管腔內(nèi)徑比。
統(tǒng)計分析計量資料用

表示，兩組間比較采用t檢驗。
結(jié)果與正常組大鼠比較，高血壓組大鼠血壓顯著升高；與高血壓組比較，葉酸組大鼠血壓有所改善，替米沙坦/氫氯噻嗪組及替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(0.04、0.08mg/kg)組大鼠血壓均顯著降低；但與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較，替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(0.04、0.08mg/kg)組大鼠的降壓幅度進一步增大，其中替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(0.08mg/kg)組差異具有顯著性。
內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)作為心血管損害的早期標(biāo)志受到廣泛關(guān)注，內(nèi)皮細(xì)胞活性標(biāo)志物(一氧化氮及其代謝產(chǎn)物，內(nèi)皮素等)研究可作為一種檢測內(nèi)皮功能的簡單方法。機體在正常代謝過程中產(chǎn)生活性氧自由基，當(dāng)體內(nèi)的抗氧化劑和抗氧化酶的作用不能抗衡時即發(fā)生脂質(zhì)過氧化作用。丙二醛(MDA)是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)鏈終止階段產(chǎn)生的小分子物質(zhì)，其含量可間接反映自由基的產(chǎn)生情況和機體組織的脂質(zhì)過氧化程度，而超氧化物岐化酶(SOD)是體內(nèi)最重要的清除自由基的抗氧化酶。與正常組大鼠比較，高血壓組大鼠血清NO、SOD水平顯著降低，ET、MDA水平顯著升高，與高血壓組比較，葉酸組、替米沙坦/氫氯噻嗪組大鼠血漿NO、SOD升高、ET、MDA降低，替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(0.04、0.08mg/kg)組大鼠血漿NO、SOD進一步升高，ET、MDA進一步降低，與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較有顯著差異。表明自發(fā)性高血壓大鼠出現(xiàn)顯著的內(nèi)皮細(xì)胞功能損害，脂質(zhì)過氧化，替米沙坦/氫氯噻嗪、葉酸對大鼠內(nèi)皮細(xì)胞功能具有保護作用，并且可以抗脂質(zhì)過氧化，兩者合用保護作用顯著增強。見表1。
表1替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸灌胃給藥連續(xù)26周對自發(fā)性高血壓大鼠血壓、血清NO、ET、SOD、MDA的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與高血壓組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01； 與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較，★P＜0.05，★★P＜0.01 24小時尿α1微球蛋白是反映早期近曲小管損害的標(biāo)記物，蛋白尿除作為一種腎臟損害標(biāo)志外，更是一種促進腎臟病進展的獨立危險因素。與正常組比較，高血壓組大鼠尿24hα1-微球蛋白、尿蛋白顯著升高，Ccr明顯降低，BUN升高，與高血壓組比較，替米沙坦/氫氯噻嗪組、替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(0.04、0.08mg/kg)組大鼠尿24hα1-微球蛋白、尿蛋白降低、Ccr升高、BUN降低，葉酸單用對自發(fā)性高血壓大鼠腎功能損害無明顯影響。替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(0.04、0.08mg/kg)組大鼠尿24hα1-微球蛋白、尿蛋白進一步降低，Ccr進一步升高，與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較有顯著性差異。表明自發(fā)性高血壓大鼠出現(xiàn)早期腎功能損害，替米沙坦/氫氯噻嗪對自發(fā)性高血壓大鼠的腎功能損害具有保護作用，葉酸與替米沙坦/氫氯噻嗪合用，對自發(fā)性高血壓大鼠的腎功能保護作用顯著增強。見表2。
與正常組比較，高血壓組大鼠左心重和室重指數(shù)明顯增加，葉酸單用對自發(fā)性高血壓大鼠左心重和室重指數(shù)無明顯影響，替米沙坦/氫氯噻嗪組、替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組大鼠左心重和室重指數(shù)均顯著降低，與高血壓組比較有顯著差異；與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較，替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組大鼠左心重和室重指數(shù)有進一步降低趨勢，但是差異無顯著性。表明高血壓組大鼠出現(xiàn)左心室心肌肥厚，替米沙坦/氫氯噻嗪組、替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組長期給藥可以預(yù)防大鼠心肌肥厚，聯(lián)合用藥組改善左心室肥厚的作用更強。見表3 心室重構(gòu)是高血壓的重要病理變化，主要表現(xiàn)為心肌細(xì)胞增殖、肥大及間質(zhì)纖維化，羥脯氨酸為膠原纖維所特有，其含量可反映纖維化程度。與正常組比較，高血壓組大鼠心肌膠原蛋白含量顯著升高。與高血壓組比較，替米沙坦/氫氯噻嗪組大鼠心肌膠原蛋白含量顯著降低，替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組大鼠心肌膠原蛋白含量進一步降低，與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較有顯著性差異。見表3。
表2替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸連續(xù)給藥26周對自發(fā)性高血壓大鼠尿α1-微球蛋白、尿蛋白、血肌酐清除率、血尿素氮的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與高血壓組比較，▲▲P＜0.01； 與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較，★P＜0.05，★★P＜0.01 表3替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸連續(xù)給藥26周對自發(fā)性高血壓大鼠左心室重、室重指數(shù)、心肌膠原蛋白含量的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與高血壓組比較，▲▲P＜0.01； 與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較，★P＜0.05 與正常組大鼠比較，高血壓組大鼠心肌細(xì)胞的橫截面積、長徑和短徑均顯著增大，替米沙坦/氫氯噻嗪組大鼠心肌細(xì)胞的橫截面積、長徑和短徑顯著降低，替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組大鼠心肌細(xì)胞橫截面積、長徑和短徑進一步降低，其中細(xì)胞橫截面積與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較有顯著性差異。見表4。
與正常組大鼠比較，高血壓組大鼠心肌間質(zhì)纖維化指標(biāo)CVF、心肌血管周圍纖維化指標(biāo)PVCA均顯著增加，CVF與PVCA升高幾乎同步，表明心肌間質(zhì)纖維化參與了SHR心臟重構(gòu)的病理過程。與高血壓組比較，替米沙坦/氫氯噻嗪組大鼠心肌CVF、PVCA均顯著降低，替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組大鼠心肌CVF、PVCA進一步降低，與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較有顯著性差異。見表5。
表4替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸連續(xù)給藥26周對自發(fā)性高血壓大鼠心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)參數(shù)的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與高血壓組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01； 與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較，★P＜0.05 表5替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸連續(xù)給藥26周對自發(fā)性高血壓大鼠心肌膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)和心肌血管周圍膠原面積(PVCA)的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與高血壓組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01； 與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較，★P＜0.05 高血壓引起的血管改變，主要表現(xiàn)為血管壁外膜的纖維化，管壁中層增厚(由平滑肌細(xì)胞增生、肥厚和細(xì)胞間質(zhì)增多所致)；內(nèi)膜玻璃樣變，內(nèi)皮細(xì)胞增生，上述變化使血管壁厚度/管腔比值減小，舒張功能受限，冠脈的儲備功能下降。與正常組大鼠比較，高血壓組大鼠腸系膜動脈中膜厚度增加，內(nèi)徑減小，中膜/內(nèi)徑比增加。與高血壓組比較，替米沙坦/氫氯噻嗪組大鼠腸系膜動脈中膜厚度降低、中膜/內(nèi)徑比降低，替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組大鼠腸系膜動脈中膜厚度和中膜/內(nèi)徑比均進一步降低，與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較有顯著性差異。見表6。
表6替米沙坦/氫氯噻嗪+葉酸連續(xù)給藥26周對自發(fā)性高血壓大鼠腸系膜動脈的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與高血壓組比較，▲▲P＜0.01； 與替米沙坦/氫氯噻嗪組比較，★P＜0.05，★★P＜0.01 實施例2厄貝沙坦/氫氯噻嗪+葉酸對自發(fā)性高血壓大鼠靶器官損害的保護作用 白發(fā)性高血壓大鼠(SHR)8～10周齡后大鼠血壓升高，測定大鼠血壓1周，取血壓穩(wěn)定的大鼠用于實驗。根據(jù)血壓數(shù)值，將SHR分成模型組、厄貝沙坦/氫氯噻嗪(15+1.25mg/kg)組、厄貝沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(15+1.25+0.04mg/kg)、厄貝沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(15+1.25+0.08mg/kg)組、葉酸組(0.08mg/kg)，另設(shè)WKY正常對照組，每組20只，灌胃給藥，每天1次，連續(xù)26周。26周末，取血測定血清一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET)水平；收集尿液，測定24h尿α1微球蛋白、尿肌酐；取大鼠心臟，測定左心重和室重指數(shù)；測定羥脯氨酸含量和計算膠原含量；心肌組織常規(guī)切片，測量心肌細(xì)胞的橫截面積、長徑和短徑；天狼星紅-苦味酸染色，測量心肌膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)和心肌血管周圍膠原面積(PVCA)；腸系膜動脈二級分支切片，測量小動脈內(nèi)徑、中膜厚度，計算中膜厚度/內(nèi)徑比。計量資料用

表示，兩組間比較采用t檢驗。
結(jié)果與模型組比較，葉酸組、厄貝沙坦/氫氯噻嗪組大鼠血漿NO升高、ET降低，厄貝沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(0.04、0.08mg/kg)組大鼠血漿NO進一步升高，ET進一步降低；與模型組比較，厄貝沙坦/氫氯噻嗪組、厄貝沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(0.04、0.08mg/kg)組大鼠尿24hα1-微球蛋白、尿蛋白降低、Ccr升高，厄貝沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(0.04、0.08mg/kg)組大鼠尿24hα1-微球蛋白、尿蛋白進一步降低，Ccr進一步升高；與模型組比較，厄貝沙坦/氫氯噻嗪組、厄貝沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組大鼠左心重、室重指數(shù)、心肌膠原蛋白含量、CVF、PVCA、心肌細(xì)胞的橫截面積、長徑和短徑均顯著降低，與厄貝沙坦/氫氯噻嗪組比較，厄貝沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組大鼠上述心肌相關(guān)參數(shù)進一步降低；與模型組比較，厄貝沙坦/氫氯噻嗪組大鼠腸系膜動脈中膜厚度和中膜/內(nèi)徑比均降低，厄貝沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組大鼠腸系膜動脈中膜厚度和中膜厚度/內(nèi)徑比均進一步降低，與厄貝沙坦/氫氯噻嗪組比較有顯著性差異。上述結(jié)果表明，厄貝沙坦/氫氯噻嗪、葉酸對高血壓大鼠內(nèi)皮細(xì)胞功能、腎功能、心肌結(jié)構(gòu)具有保護作用，兩者合用對保護作用顯著增強。
實施例3坎地沙坦/氫氯噻嗪+葉酸對卒中易感型自發(fā)性高血壓大鼠(SHRsp)靶器官損害的保護作用 8～10周齡SHRsp分別購自上海市高血壓病研究所、阜外醫(yī)院實驗動物中心，飼養(yǎng)在室溫(23±2)℃，相對濕度(50±10)％，光照明暗各12h，自由攝食標(biāo)準(zhǔn)飼料，固形飼料由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物繁育場提供，飲用水為純凈水。試驗前測定血壓，根據(jù)血壓數(shù)值，將SHRsp分成模型組、坎地沙坦/氫氯噻嗪(1.6mg/kg+1.25mg/kg)組、坎地沙坦/氫氯噻嗪+葉酸(1.6mg/kg+1.25mg/kg+0.08mg/kg)組，另設(shè)WKY對照組，每組30只。灌胃給藥，每天1次，每周稱重一次，根據(jù)體重調(diào)整藥量，連續(xù)20周。觀察指標(biāo) (1)每日觀察動物飲食、存活情況及行為活動，記錄各組動物腦卒中發(fā)作數(shù)。
(2)神經(jīng)功能分級參照Bederson的神經(jīng)功能分級標(biāo)準(zhǔn)(Bederson JB，Pitts LH，Tsuji M，et al.Ratmiddle cerebral artery occlusionEvaluation of the model and development a eurologicexamination[J].Stroke，1986，17(3)472-476.)，分為如下5級，每周觀察一次。
0級(正常)無神經(jīng)功能缺損癥狀。
1級(輕微)前肢蜷縮或屈曲，主要是持續(xù)性腕屈曲或肩內(nèi)收伴肘部伸展。
2級(中度)前肢持續(xù)性蜷縮或屈曲，可見腕、肘全部屈曲、肩部內(nèi)收或內(nèi)旋。
3級(嚴(yán)重)持續(xù)性肢體蜷縮或屈曲，一側(cè)肢體推力體抗持續(xù)性減弱，自主活動時不伴肢體劃圈行為。
4級(甚重)雙側(cè)肢體持續(xù)性蜷縮或屈曲，一側(cè)肢體推力體抗持續(xù)性減弱，自主活動時出現(xiàn)肢體劃圈行為。
(3)腦動脈及腦組織病理學(xué)觀察 所有存活大鼠麻醉后行主動脈插管，2.5％戊二醛灌注固定，斷頭取腦，分離顱底動脈環(huán)及腦實質(zhì)內(nèi)的小動脈和細(xì)動脈，2.5％戊二醛固定，包埋、切片，甲苯胺藍(lán)染色。計算機病理圖像分析系統(tǒng)測定血管的中膜厚度、管腔內(nèi)徑徑，計算中膜厚度/管腔內(nèi)徑的比值，每張切片測10條血管。所有存活動物及死亡后可取得病理組織的大鼠均取腦組織，切片、HE染色，觀察腦出血、腦梗塞或混合性腦卒中，計算各組大鼠腦卒中發(fā)生率。
結(jié)果 (1)一般觀察 實驗過程中，模型組大鼠卒中后出現(xiàn)明顯精神萎靡，嗜睡，毛發(fā)蓬松、干枯或脫落、無光澤，體重下降，主動活動明顯減少，行動遲緩，肢體呈不同程度癱瘓，部分大鼠發(fā)病同時伴有抽搐、腹瀉、小便失禁、眼球出血等癥狀，病情嚴(yán)重者數(shù)小時內(nèi)死亡。治療組的大部分動物神經(jīng)功能缺損較模型組輕微，精神狀態(tài)明顯優(yōu)于模型組，自主活動增加，主動覓食、飲水，體重下降不明顯，毛發(fā)也較模型組順滑有光澤。
(2)神經(jīng)功能評分與正常組比較，模型組神經(jīng)癥狀評分顯著增加，坎地沙坦/氫氯噻嗪組、坎地沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組神經(jīng)癥狀評分顯著降低，其中坎地沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組進一步降低，與坎地沙坦/氫氯噻嗪組比較有顯著性差異。見表7、表8。
表7坎地沙坦/氫氯噻嗪+葉酸連續(xù)給藥10周對SHRsp大鼠腦卒中神經(jīng)功能分級比較(只) Riddit檢驗，與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01； 與坎地沙坦/氫氯噻嗪組比較，★P＜0.05 表8坎地沙坦/氫氯噻嗪+葉酸連續(xù)給藥20周對SHRsp大鼠腦卒中神經(jīng)功能分級比較(只) Riddit檢驗，與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01； 與坎地沙坦/氫氯噻嗪組比較，★P＜0.05 (3)腦卒中發(fā)生率 由于神經(jīng)功能評分1級介于正常與腦卒中之間，判斷差異較大，影響因素多，故本試驗以神經(jīng)功能評分2級及2級以上為標(biāo)準(zhǔn)，判斷腦卒中的發(fā)生。正常組無1只發(fā)生腦卒中，模型組30只大鼠中2只給藥不當(dāng)意外死亡，18只發(fā)生腦卒中，除1只動物外，其他29只動物均進行了病理組織學(xué)觀察，共24只有腦卒中發(fā)生，其中腦出血10只，腦梗死7只，混合性中風(fēng)7只。腦卒中灶及周圍均可見小動脈透明變性或纖維素樣壞死，管壁增厚，管腔狹窄，有的管腔內(nèi)可見微血栓形成，管周滲血?？驳厣程?氫氯噻嗪組30只大鼠有12只發(fā)生腦卒中，1只動物未能取得病理組織，其他29只動物均進行了病理組織學(xué)觀察，共17只有腦卒中發(fā)生，與模型組比較有顯著差異?？驳厣程?氫氯噻嗪+葉酸組30只大鼠中，有1只給藥不當(dāng)導(dǎo)致死亡，有7只發(fā)生腦卒中，其中2只動物未能取得病理組織，其他28只動物均進行了病理組織學(xué)觀察，共9只有腦卒中發(fā)生，其腦卒中發(fā)生率明顯降低，且與模型對照組比較差異具有顯著性(P＜0.01)，與坎地沙坦/氫氯噻嗪組比較，坎地沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組大鼠腦卒中發(fā)生率進一步降低(P＜0.05)。見表9。
(4)對SHRsp大鼠腦動脈的影響 高血壓引起的腦血管改變，主要表現(xiàn)為管壁中層增厚、內(nèi)膜玻璃樣變，內(nèi)皮細(xì)胞增生，血管壁厚度/管腔比值減小。與正常組大鼠比較，模型組大鼠腦動脈中膜厚度增加，管腔內(nèi)徑減小，中膜厚度/管腔內(nèi)徑比增加。與模型組比較，坎地沙坦/氫氯噻嗪組大鼠腦動脈中膜厚度、中膜厚度/管腔內(nèi)徑比降低，坎地沙坦/氫氯噻嗪+葉酸組腦動脈中膜厚度、中膜厚度/管腔內(nèi)徑比進一步降低，與坎地沙坦/氫氯噻嗪組比較有顯著性差異。見表10。
表9坎地沙坦/氫氯噻嗪+葉酸連續(xù)給藥20周對SHRsp大鼠腦卒中的影響 x2檢驗，與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01； 與坎地沙坦/氫氯噻嗪組比較，★P＜0.05 表10坎地沙坦/氫氯噻嗪+葉酸連續(xù)給藥20周對卒中易感型自發(fā)性高血壓大鼠腦動脈的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與高血壓組比較，▲▲P＜0.01； 與坎地沙坦/氫氯噻嗪組比較，★★P＜0.01 實施例4奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣對自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)降壓及靶器官損害的保護作用 SHR大鼠，體重150～180g，平均分為5組，每組20只，分別為模型組、奧美沙坦/吲達(dá)帕胺(2+0.25mg/kg)組、奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣(2+0.25+0.02mg/kg)組、奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣(2+0.25+0.04mg/kg)組、左旋亞葉酸鈣(0.04mg/kg)組，另取20只正常大鼠作為正常對照組。給予等容量0.5％CMC溶液，每周稱重一次，根據(jù)體重調(diào)整藥量，連續(xù)給藥20周。觀測指標(biāo) (1)血壓 分別測定給藥前和給藥后不同時間鼠尾收縮壓，比較各組間血壓差別。
(2)腎功能 收集24h尿液，用比濁法測定尿蛋白、放免法測定24h尿α1微球蛋白，按照試劑盒說明書測定尿肌酐，取血測定血肌酐，計算肌酐清除率(Ccr)。
(3)心肌羥脯氨酸測定 大鼠處死后，取左室心肌組織約50mg，采用Bergman法測定羥脯氨酸含量，并計算膠原含量。膠原含量＝8.2×羥脯氨酸含量(mg/g)。
(4)心肌膠原組織測定 心肌組織常規(guī)切片，天狼星紅-苦味酸染色，測量心肌膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)和心肌血管周圍膠原面積(PVCA)。CVF為膠原面積與心肌總面積的比值，其中膠原面積不包括血管周圍膠原面積，隨機分析5個視野，取其均值。PVCA為每一標(biāo)本測量4支呈橫切面的壁內(nèi)小動脈的周圍面積與管腔面積的比值，取其均值。
(5)腸系膜動脈的組織學(xué)觀察 處死大鼠后，取腸系膜上動脈第二級分枝5mm(從回盲部倒數(shù)，第二根腸系膜上動脈分枝的第二級分枝中間5mm)，置10％中性福爾馬林中固定，常規(guī)脫水、包埋，切片厚5μm，HE染色，每條動脈切5個橫切面，選取標(biāo)準(zhǔn)橫切面的切片進行光鏡觀察，利用計算機圖像采集系統(tǒng)與分析系統(tǒng)進行分析，在統(tǒng)一放大10×40倍的顯微鏡下，測量小血管中膜厚度、內(nèi)徑，計算中膜厚度/管腔內(nèi)徑比。
統(tǒng)計分析計量資料用

表示，兩組間比較采用t檢驗。
結(jié)果 (1)對SHR血壓的影響與正常組大鼠比較，模型組大鼠血壓顯著升高；與模型組比較，葉酸組大鼠血壓有所改善，奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組及奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣(0.02、0.04mg/kg)組大鼠血壓均顯著降低；與奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組比較，奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣組大鼠的降壓幅度沒有顯著改變。見表11。
表11奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣對SHR大鼠血壓(mmHg)的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，▲▲P＜0.01 (2)對SHR大鼠腎功能的影響與正常組大鼠比較，模型組大鼠尿24hα1-微球蛋白、尿蛋白顯著升高，Ccr明顯降低。與模型組比較，奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組大鼠尿24hα1-微球蛋白、尿蛋白顯著降低，Ccr顯著升高。奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣(0.02、0.04mg/kg)組大鼠Ccr進一步升高，尿24hα1-微球蛋白、尿蛋白進一步降低，與奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組比較有顯著性差異。表明奧美沙坦/吲達(dá)帕胺對SHR大鼠出現(xiàn)的早期腎功能損害具有保護作用，與左旋亞葉酸鈣合用，對SHR大鼠的腎功能保護作用顯著增強，見表12。
(3)對SHR大鼠心肌膠原蛋白含量及心肌膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)和心肌血管周圍膠原面積(PVCA)的影響與正常組大鼠比較，模型組大鼠心肌膠原蛋白含量，心肌間質(zhì)纖維化指標(biāo)CVF、心肌血管周圍纖維化指標(biāo)PVCA均顯著增加，表明心肌間質(zhì)纖維化參與了高血壓大鼠心臟重構(gòu)的病理過程。與模型組比較，奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組大鼠心肌膠原蛋白含量、心肌CVF、PVCA均顯著降低。奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣組大鼠心肌膠原蛋白含量及心肌CVF、PVCA進一步降低，與奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組比較有顯著性差異。表明奧美沙坦/吲達(dá)帕胺與左旋亞葉酸鈣合用，對高血壓大鼠心肌保護作用增強。見表13。
表12奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣對SHR大鼠腎功能的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，▲▲P＜0.01； 與奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組比較，★P＜0.05，★★P＜0.01 表13奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣對SHR大鼠心肌膠原蛋白含量、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)和心肌血管周圍膠原面積(PVCA)的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01； 與奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組比較，★P＜0.05，★★P＜0.01 (4)對SHR大鼠腸系膜動脈的影響 高血壓大鼠的血管改變，主要表現(xiàn)為血管壁外膜的纖維化，管壁中層增厚；內(nèi)膜玻璃樣變，內(nèi)皮細(xì)胞增生，上述變化使血管壁厚度/管腔比值減小。與正常組大鼠比較，模型組大鼠腸系膜動脈中膜厚度增加，內(nèi)徑減小，中膜/內(nèi)徑比增加。與模型組比較，奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組大鼠腸系膜動脈中膜厚度降低、中膜/內(nèi)徑比降低，奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣組大鼠腸系膜動脈中膜厚度、中膜/內(nèi)徑比均進一步降低，與奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組比較有顯著性差異。見表14。
表14奧美沙坦/吲達(dá)帕胺+左旋亞葉酸鈣連續(xù)給藥20周對自發(fā)性高血壓大鼠腸系膜動脈的影響
與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01； 與奧美沙坦/吲達(dá)帕胺組比較，★P＜0.05，★★P＜0.01 實施例5替米沙坦40mg/氫氯噻嗪12.5mg/葉酸0.2mg片的制備 處方 替米沙坦 40.0g 氫氯噻嗪 12.5g 葉酸 0.2g 淀粉 30.0g 微晶纖維素 60.0g 羧甲基淀粉鈉 15.0g 泊洛薩姆F681.0g 水 適量 硬脂酸鎂 適量 制成1000片 制備工藝葉酸過120目篩，其他輔料分別過100目篩后75℃干燥2小時，備用；精密稱定處方量的替米沙坦、氫氯噻嗪、乳糖、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和微晶纖維素過篩混勻，備用；取處方量的葉酸和泊洛薩姆F68充分混合均勻后等量遞增加入預(yù)混好的氨氯地平、乳糖、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉和微晶纖維素，加入水適量制軟材，30目篩制粒，60℃干燥3h；整粒，加入適量硬脂酸鎂混勻，含量測定后壓片，包裝。
實施例6替米沙坦40mg/氫氯噻嗪12.5mg/葉酸0.4mg片的制備 處方 替米沙坦 40.0g 氫氯噻嗪 12.5g 葉酸 0.4g 乳糖 30.0g 微晶纖維素 40.0g 羧甲基淀粉鈉 10.0g 泊洛薩姆F68 1.0g 水 適量 硬脂酸鎂 適量制成1000片 制備工藝同實施例5。
實施例7替米沙坦40mg/氫氯噻嗪12.5mg/葉酸0.8mg片的制備 處方 替米沙坦 40.0g 氫氯噻嗪 12.5g 葉酸 0.8g 乳糖 50.0g 微晶纖維素 80.0g 羧甲基淀粉鈉 20.0g 十二烷基硫酸鈉 5.0g 水 適量 硬脂酸鎂 適量制成1000片 制備工藝同實施例5。
實施例8厄貝沙坦150mg/氫氯噻嗪12.5mg/葉酸0.4mg膠囊的制備 處方 厄貝沙坦 150g 氫氯噻嗪 12.5g 葉酸 0.4g 淀粉 60.0g 微晶纖維素 40.0g 羧甲基淀粉鈉 40.0g 5％聚維酮k-30水溶液 適量 微粉硅膠 適量制成1000粒 制備工藝將厄貝沙坦、氫氯噻嗪、葉酸、微晶纖維素、淀粉、羧甲基淀粉鈉粉碎、過篩后混合均勻，與適量的5％聚維酮k-30水溶液混合制成軟材后制粒、干燥、加入微粉硅膠混合均勻，按常規(guī)方法裝膠囊1000粒即得。
實施例9厄貝沙坦150mg/氫氯噻嗪12.5mg/葉酸0.8mg膠囊的制備 處方 厄貝沙坦 150g 氫氯噻嗪 12.5g 葉酸 0.8g 淀粉 60.0g 微晶纖維素40.0g 羧甲基淀粉鈉 40.0g 5％聚維酮k-30水溶液 適量 微粉硅膠 適量 制成1000粒 制備工藝同實施例8。
實施例10替米沙坦40mg/螺內(nèi)酯50mg/亞葉酸鈣0.4mg膠囊的制備 處方 替米沙坦 40g 螺內(nèi)酯 50g 亞葉酸鈣(按亞葉酸計) 0.4g 淀粉 40.0g 微晶纖維素 20.0g 羧甲基淀粉鈉 20.0g 5％聚維酮k-30水溶液適量 微粉硅膠 適量 制成1000粒 制備工藝同實施例8。
實施例11坎地沙坦16mg/氫氯噻嗪12.5mg/葉酸0.8mg片的制備 處方 坎地沙坦 16g 氫氯噻嗪 12.5mg 葉酸 0.8g 微晶纖維素 80.0g 乳糖 40.0g 羧甲基淀粉鈉 25.0g 水 適量 硬脂酸鎂 0.5g 制成1000片 制備工藝取處方量的坎地沙坦、氫氯噻嗪、葉酸過100目篩后按等量遞增法混合均勻備用；其他輔料分別過100目篩后75℃干燥2小時；按處方量的微晶纖維素、乳糖、羧甲基淀粉鈉混勻后再與混好的原料藥等量遞增法混合均勻；加入水適量制軟材，24目篩制粒，40～45℃干燥、整粒，干顆粒加入適量硬脂酸鎂混勻，含量測定后壓片。
實施例12坎地沙坦16mg/氫氯噻嗪12.5mg/葉酸1.6mg片的制備 處方 坎地沙坦 16g 氫氯噻嗪 12.5mg 葉酸 1.6g 微晶纖維素 80.0g 乳糖 40.0g 羧甲基淀粉鈉 25.0g 水 適量 硬脂酸鎂 0.5g制成1000片 制備工藝同實施例11。
實施例13奧美沙坦20mg/吲達(dá)帕胺2.5mg/左旋亞葉酸鈣0.2mg片的制備 處方 奧美沙坦 20.0g 吲達(dá)帕胺 2.5g 左旋亞葉酸鈣(按左旋亞葉酸計) 0.2g 微晶纖維素45.0g 乳糖 25.0g 羧甲基淀粉鈉 15.0g 水適量 硬脂酸鎂 0.5g 制成1000片 制備工藝同實施例11。
實施例14奧美沙坦20mg/吲達(dá)帕胺2.5mg/左旋亞葉酸鈣0.4mg片的制備 處方 奧美沙坦 20.0g 吲達(dá)帕胺 2.5g 左旋亞葉酸鈣(按左旋亞葉酸計) 0.4g 微晶纖維素 45.0g 乳糖 25.0g 羧甲基淀粉鈉 15.0g 水 適量 硬脂酸鎂 0.5g 制成1000片 制備工藝同實施例11。
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，包括
(1)藥用劑量的血管緊張素II受體拮抗劑；
(2)藥用劑量的利尿劑；
(3)藥用劑量的葉酸類化合物；
(4)藥劑學(xué)上可接受的載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述血管緊張素II受體拮抗劑選自替米沙坦、厄貝沙坦、坎地沙坦、奧美沙坦、氯沙坦、依普沙坦、或纈沙坦中的一種，劑量為8～300mg。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述利尿劑選自氫氯噻嗪、吲達(dá)帕胺、依普利酮、或螺內(nèi)酯中的一種，劑量為2.5～50mg。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于所述藥用劑量的葉酸類化合物為葉酸、亞葉酸鈣或左旋亞葉酸鈣，劑量為0.2～1.6mg。
5.根據(jù)權(quán)利要求1～4中任一所述的藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物的制藥劑型為口服制劑，包括片劑、膠囊或顆粒劑。
6.權(quán)利要求1～4中任一所述的藥物組合物在制備用于預(yù)防、治療或延緩高血壓的藥物中的用途。
7.權(quán)利要求1～4中任一所述的藥物組合物在制備用于預(yù)防、治療或延緩高血壓引起的靶器官損害的藥物中的用途。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的用途，其特征在于所述的靶器官損害包括左室肥厚、良性小動脈性腎硬化癥、惡性小動脈性腎硬化癥、腎功能衰竭、視網(wǎng)膜動脈硬化、或高血壓眼底病變。
9.根據(jù)權(quán)利要求1～4中任一所述的藥物組合物在制備用于降低高血壓引起的心腦血管事件危險性的藥物中的用途。
10.如權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于所述降低高血壓引起的心腦血管事件危險性是指降低心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、腦梗塞、或腦出血的發(fā)生率。
11.如權(quán)利要求9所述的用途，其特征在于所述降低高血壓引起的心腦血管事件危險性是指降低腦卒中的發(fā)生率。
全文摘要
本發(fā)明涉及血管緊張素II受體拮抗劑/利尿劑/葉酸聯(lián)合應(yīng)用的藥物組合物及其用途。該組合物包括藥用劑量的血管緊張素II受體拮抗劑、藥用劑量的利尿劑、藥用劑量的葉酸類化合物、和藥劑學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明提供了該組合物在制備用于預(yù)防、治療或延緩高血壓、高血壓引起的靶器官損害或高血壓相關(guān)疾病的藥物中的用途；本發(fā)明還提供了該藥物組合物在制備用于降低高血壓引起的心腦血管事件危險性的藥物中的用途。通過本發(fā)明的實施，提供給患者該藥物組合物，可以提高療效，增加患者依從性，使患者用藥方便，降低醫(yī)療費用。
文檔編號A61K45/06GK101199847SQ20071016577
公開日2008年6月18日 申請日期2007年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月11日
發(fā)明者陳光亮, 王琳琳, 莉 李, 呂紅霞, 劉海鵬, 胡容峰, 段炎炎, 聰 孫, 王媛媛, 徐希平 申請人:深圳奧薩醫(yī)藥有限公司, 安徽省生物醫(yī)學(xué)研究所