專利名稱：紫杉醇的可注射組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及紫杉醇的可注射組合物。更確切地說，本發(fā)明涉及紫杉醇的可注射組合物，包含具有優(yōu)異抗癌效果的紫杉醇、無水乙醇、增溶劑(例如聚氧乙烯氫化蓖麻油)和穩(wěn)定劑(例如N-乙酰基氨基酸)。
背景技術(shù)：
紫杉醇是從紫杉樹皮提取的生物堿，它促進(jìn)從微管蛋白二聚物生成微管。它也被用作抗微管劑，其通過防止解聚而使微管穩(wěn)定，這在抗卵巢癌、乳腺癌、頭頸癌和非小細(xì)胞肺癌方面顯示了優(yōu)異的抗癌效果。
由于上述紫杉醇具有非常低的水溶解度，為30μg/ml，并且實(shí)際上是不穩(wěn)定的，因此關(guān)于紫杉醇的研究一直在進(jìn)行中。尤其是由于它的不可溶性，它難以作為注射劑使用。另外，紫杉醇注射劑具有多種問題，例如穩(wěn)定性低和由增溶劑所致毒性，為克服這類問題，多項(xiàng)研究正在進(jìn)行中。
現(xiàn)有技術(shù)(PCT/AU93/00599)公開了制備pH低于8.1的溶液的方法，該方法包括向紫杉醇加入有機(jī)酸，目的是提高藥物的穩(wěn)定性。不過，由于用在這種方法中的增溶劑聚氧乙烯甘油三蓖麻油酸酯、即Cremophor ELTM(以下稱之為“Cremophor EL”)導(dǎo)致嚴(yán)重的過敏反應(yīng)，并且它使增塑劑從聚乙烯氯樹脂中分離，因此它作為注射劑使用并非優(yōu)選。
此后，為了解決這類問題，使用由磷脂酰膽堿作為增溶劑制成脂質(zhì)體制劑，排除了Cremophor ELTM的使用，但是，溶解度低(0.8mg/ml)仍然沒有改進(jìn)，上述脂質(zhì)體制劑的穩(wěn)定性仍然是有問題的，因而，大量生產(chǎn)存在困難(Phrm.Res.，1994，11(2)，206-212；Pharm.Res.，1994，11(6)，889-896)。
最近，關(guān)于提高溶解度的研究正在積極進(jìn)行中，這種方法使紫杉醇與生物可降解的嵌段共聚物化學(xué)結(jié)合，后者作為增溶劑包含親水性區(qū)域和疏水性區(qū)域，但是這種方法難以應(yīng)用于藥物，因?yàn)閮煞N疏水性與親水性聚合物發(fā)生聚合，在制造過程期間難以蒸發(fā)和冷凍干燥，伴有生產(chǎn)成本增加和生物相容性降低(JP 116，082/89；JP206，815/94；EP0583955A2)。
市售名稱為Taxol的制備劑已被公開，它是一種液體制備劑，其中在5ml無水乙醇/CremophorELTM(1∶1)的混合溶液中溶解有30mg紫杉醇。在給藥時(shí)，將溶液用生理鹽水或5％葡萄糖溶液稀釋至0.6-1.2mg/ml。在6-24小時(shí)內(nèi)僅以175mg/m2靜脈滴注給藥。不過，作為上述增溶劑使用的Cremophor ELTM含有自身的毒性，這導(dǎo)致嚴(yán)重的毒性，例如過敏、呼吸困難和面紅。因而，為了使由Taxol給藥所導(dǎo)致的副作用，過敏反應(yīng)最小化，預(yù)先給以腎上腺皮質(zhì)激素(地塞米松)、抗組胺劑(苯海拉明)和H2拮抗劑(西米替丁)。另外，由于制劑穩(wěn)定性降低所致紫杉醇降解的效價(jià)下降問題，需要在低溫下貯存。而且，還報(bào)道有多種副作用，例如在對(duì)人體給藥時(shí)必須經(jīng)過過濾過程，因?yàn)殡S著時(shí)間的推移會(huì)產(chǎn)生顆粒。
于是，為了克服上述問題，本發(fā)明人研究了包含低毒增溶劑和穩(wěn)定劑的紫杉醇的可注射組合物，從而發(fā)現(xiàn)使用聚氧乙烯氫化蓖麻油作為增溶劑，使用N-乙酰基氨基酸作為穩(wěn)定劑，制成含有無水乙醇的紫杉醇的可注射組合物。進(jìn)而，通過發(fā)現(xiàn)本發(fā)明組合物顯示比已知的紫杉醇的可注射組合物更多的藥學(xué)效果，藥物穩(wěn)定性在室溫下增加了，和毒性降低了，本發(fā)明人完成了本發(fā)明。
發(fā)明概述本發(fā)明的目的是提供抗腫瘤性紫杉醇的可注射組合物，其毒性降低。
更確切地說，本發(fā)明的目的是提供紫杉醇的可注射組合物，包含紫杉醇、無水乙醇、作為增溶劑的聚氧乙烯(polyoxyl)氫化蓖麻油和作為穩(wěn)定劑的N-乙?；被帷?br> 發(fā)明的公開為了達(dá)到所述目的，本發(fā)明提供紫杉醇的可注射組合物，包含紫杉醇、增溶劑、穩(wěn)定劑和無水乙醇，其中所述增溶劑是聚氧乙烯氫化蓖麻油。
本發(fā)明也提供紫杉醇的可注射組合物，包含紫杉醇、增溶劑、穩(wěn)定劑和無水乙醇，其中所述穩(wěn)定劑是N-乙酰基氨基酸。
下面將更加詳細(xì)地解釋本發(fā)明。
本發(fā)明提供紫杉醇的可注射組合物，包含0.1-5.0重量％的紫杉醇、95-99.89重量％的聚氧乙烯氫化蓖麻油與無水乙醇，和0.01-1.0重量％的穩(wěn)定劑。
所述紫杉醇是5β，20-環(huán)氧-1，2α，4，7β，10β，13α-六羥基紫杉-11-烯-9-酮-4，10-二乙酸基-2-苯甲酸基-13-酯，具體為(2R，3S)-N-苯甲?；?3-苯基異絲氨酸，是紫杉烷系列的一種化合物。所述物質(zhì)已知具有作為抗腫瘤劑的藥理作用。而且，紫杉醇的藥理作用是刺激從微管蛋白二聚物生成微管，和防止解聚，從而作為抗微管劑使用，使微管穩(wěn)定。
根據(jù)本發(fā)明的紫杉醇的可注射組合物含有0.1-5.0重量％的紫杉醇。
所述紫杉醇在水中的溶解度是30μg/ml，因而使用增溶劑使紫杉醇在水中的溶解度增加。將所述增溶劑與無水乙醇按30∶70-70∶30的體積/體積比混合，所制成的溶液用于溶解不溶性紫杉醇。將紫杉醇溶于通過混合所述增溶劑與無水乙醇所制成的所述溶液，其中向所述溶液加入穩(wěn)定劑。因而，紫杉醇被所述增溶劑均勻分散，不會(huì)聚集。結(jié)果，獲得紫杉醇的物理穩(wěn)定性，不會(huì)隨時(shí)間推移而降低。
按照本發(fā)明，使用聚氧乙烯氫化蓖麻油作為增溶劑。所述聚氧乙烯氫化蓖麻油是一種非離子型表面活性劑，通過氫化作用轉(zhuǎn)化蓖麻油為硬化油、再使所述硬化油與環(huán)氧乙烷縮合而制成。
在普通的組合物中，紫杉醇的羰基受Cremophor EL中羧酸陰離子的攻擊，紫杉醇分解為漿果赤霉素和乙基酯化合物。不過，所述聚氧乙烯氫化蓖麻油降低羧酸陰離子的反應(yīng)性，增加紫杉醇的穩(wěn)定性。而且，無需使所述陰離子與氧化鋁接觸的預(yù)備過程，通過使用聚氧乙烯氫化蓖麻油，羧酸陰離子的含量低于或等于0.6×10-6當(dāng)量/ml。
所述聚氧乙烯氫化蓖麻油是根據(jù)所加入的環(huán)氧乙烷的平均摩爾數(shù)進(jìn)行分類的。所加入的環(huán)氧乙烷的平均摩爾數(shù)優(yōu)選為40、50和60。更優(yōu)選地，使用聚氧乙烯甘油三羥基硬脂酸酯，這是使用平均60摩爾環(huán)氧乙烷所制備的聚氧乙烯氫化蓖麻油。所述聚氧乙烯氫化蓖麻油在pH4.5至8.0為條件下，能夠提高紫杉醇的穩(wěn)定性。
鑒于有效載體的功能、可分散性和粘度，通過向紫杉醇加入可注射組合物總重量的95-99.89重量％的聚氧乙烯氫化蓖麻油與無水乙醇，制備所述的混合溶液。優(yōu)選地，按30∶70-70∶30體積/體積比混合所述聚氧乙烯氫化蓖麻油和無水的油。更優(yōu)選地，體積/體積比為50∶50。
而且，為了防止效價(jià)因不穩(wěn)定的紫杉醇分解而降低，在制備紫杉醇的可注射組合物過程中加入根據(jù)本發(fā)明的穩(wěn)定劑。使用加入到紫杉醇的可注射組合物中的任何普通穩(wěn)定劑作為所述穩(wěn)定劑。確切而言，使用有機(jī)酸、無機(jī)酸、聚山梨醇酯、乙醇胺、精氨酸、賴氨酸和N-乙酰基氨基酸作為所述穩(wěn)定劑。有機(jī)酸選自由乙酸、酒石酸、抗壞血酸、磺酸和枸櫞酸組成的組。無機(jī)酸選自由鹽酸、氫溴酸、氫氟酸、硫酸和稍酸組成的組。
所述穩(wěn)定劑的pH在8和以下的范圍內(nèi)，優(yōu)選6.0-7.5，以防止效價(jià)因紫杉醇分解而降低。
而且，就紫杉醇的穩(wěn)定性和pH控制而言，向紫杉醇的可注射組合物加入0.01-1.0重量％的所述穩(wěn)定劑，相對(duì)于組合物的總重量而言。
本發(fā)明還提供紫杉醇的可注射組合物，包含0.1-5.0重量％的紫杉醇、95-99.89重量％的通過混合增溶劑與無水乙醇所制成的溶液和0.01-1.0重量％的N-乙?；被?。
使用通常紫杉醇的可注射組合物包含的任何普通增溶劑作為所述增溶劑。優(yōu)選地，使用聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油和泊洛沙姆作為所述增溶劑。所述聚氧乙烯蓖麻油是Cremopher EL或聚乙氧基化蓖麻油(以下稱之為Cremophor ELPTM)。所述聚氧乙烯氫化蓖麻油是這樣制備的，將其中有40、50或60摩爾環(huán)氧乙烷的聚氧乙烯蓖麻油氫化。泊洛沙姆是聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物(copolymer of polyethyle-propylene glycol)。
在該過程中使用通過按規(guī)定比例混合所述增溶劑與無水乙醇所制成的溶液。鑒于有效載體的功能、可分散性和粘度，向組合物加入95-99.89重量％的所述溶液，相對(duì)于可注射組合物的總重量而言。優(yōu)選地，按30∶70-70∶30體積/體積比混合所述增溶劑與無水的油。更優(yōu)選地，體積/體積比是50∶50。
向紫杉醇的可注射組合物加入N-乙?；被嶙鳛楦鶕?jù)本發(fā)明的穩(wěn)定劑，以提高紫杉醇的穩(wěn)定性。N-乙?；被岬膒H在8和以下的范圍內(nèi)，從而防止效價(jià)因紫杉醇分解而降低。
普通穩(wěn)定劑在過量使用的情況下面臨安全性的危險(xiǎn)。不過，所述N-乙酰基氨基酸包含在營(yíng)養(yǎng)溶液中，因而紫杉醇的穩(wěn)定性或安全性是優(yōu)異的。根據(jù)大鼠毒性試驗(yàn)結(jié)果，N-乙?；腚装彼峄蜩蹤此岬腖D50分別是3600mg/kg或42mg/kg。該結(jié)果顯示，N-乙?；腚装彼岬亩拘员辱蹤此岬?0倍。因而，使用N-乙?；被嶙鳛榉€(wěn)定劑所制成的紫杉醇的可注射組合物的穩(wěn)定性高于普通的組合物。
確切而言，所述N-乙酰基氨基酸選自由N-乙酰基纈氨酸、N-乙?；彼?、N-乙?；彼?、N-乙酰基色氨酸和N-乙?；腚装彼峤M成的組。更優(yōu)選地，使用N-乙酰基半胱氨酸作為穩(wěn)定劑。
而且，就紫杉醇的穩(wěn)定性和pH控制而言，向組合物加入0.01-1.0重量％的所述N-乙酰基氨基酸，相對(duì)于組合物的總重量而言。
根據(jù)本發(fā)明的包含紫杉醇、聚氧乙烯氫化蓖麻油增溶劑和N-乙?；被岱€(wěn)定劑的紫杉醇的可注射組合物與普通組合物相比具有更大的功效。而且，所述組合物具有低毒性以及提高了的室溫溶解度與穩(wěn)定性。就粒度的細(xì)度而言，所述組合物能夠借助靜脈內(nèi)注射對(duì)機(jī)體給藥。
如實(shí)驗(yàn)例所示，在加入Cremophor EL的組合物的情況下，殘留的紫杉醇百分比在50℃下4周內(nèi)降低了24％。不過，根據(jù)本發(fā)明在加入聚氧乙烯氫化蓖麻油作為增溶劑的組合物的情況下，殘留的紫杉醇百分比在50℃下4周內(nèi)降低了5％。結(jié)果顯示，本發(fā)明組合物的穩(wěn)定性提高了5倍。而且，在加入N-乙?；被嶙鳛榉€(wěn)定劑的組合物的情況下，殘留的紫杉醇百分比在50℃下4周內(nèi)降低了2-3％。在加入N-乙?；被嶙鳛榉€(wěn)定劑的組合物的情況下，殘留的紫杉醇百分比在50℃下4周內(nèi)降低了2-3％。而且，在將組合物用生理鹽水稀釋十倍所制成的稀釋溶液的情況下，殘留的紫杉醇百分比降低了2％。結(jié)果顯示，紫杉醇在稀釋了的溶液中具有穩(wěn)定性。
而且，紫杉醇穩(wěn)定性的降低導(dǎo)致紫杉醇中的聚集與沉淀和粒度的增加。不過，如實(shí)驗(yàn)例所示，粒度在溶液中沒有變化，紫杉醇穩(wěn)定地溶解在組合物中。
所述組合物是這樣制備的，向由增溶劑與無水乙醇按30∶70-70∶30比例混合而成的溶液加入紫杉醇，再向其中加入穩(wěn)定劑。
將175mg/m2(300-500mg/60kg成人)所述組合物稀釋在生理鹽水或葡萄糖溶液中，靜脈給藥，每3周一次。在小瓶?jī)?nèi)含有1-5ml所述組合物，其中含有6-30mg紫杉醇。根據(jù)本發(fā)明的組合物的劑量依賴于紫杉醇的含量、給藥方法和治療條件。在成人的情況下，將2-5支小瓶?jī)?nèi)的成分稀釋在生理鹽水或葡萄糖溶液中，靜脈給藥。
下面利用實(shí)施例更詳細(xì)地說明本發(fā)明。不過不應(yīng)被解釋為限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1-6包含紫杉醇、增溶劑和無水乙醇的紫杉醇的可注射組合物
<實(shí)施例1>紫杉醇的可注射組合物1向527mg(56.7重量％)Cremophor EL與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，得到紫杉醇的可注射組合物。
<實(shí)施例2>紫杉醇的可注射組合物2向527mg(56.7重量％)Cremophor ELP與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，得到紫杉醇的可注射組合物。
<實(shí)施例3>紫杉醇的可注射組合物3向0.5ml無水乙醇與527mg(56.7重量％)通過向硬化油平均加入40mol環(huán)氧乙烷制成聚氧乙烯氫化蓖麻油(HCO 40，以下稱之為HCO 40)的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，得到紫杉醇的可注射組合物。
<實(shí)施例4>紫杉醇的可注射組合物4向0.5ml無水乙醇與527mg(56.7重量％)通過向硬化油平均加入60mol環(huán)氧乙烷制成的聚氧乙烯氫化蓖麻油(HCO 60，以下稱之為HCO 60)的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，得到紫杉醇的可注射組合物。
<實(shí)施例5>紫杉醇的可注射組合物5向0.5ml無水乙醇與527mg(56.7重量％)聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物Pluronic L64(BASF Corporation)的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，得到紫杉醇的可注射組合物。
<實(shí)施例6>紫杉醇的可注射組合物6向0.5ml無水乙醇與527mg(56.7重量％)聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段PluronicL44(BASF Corporation)的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，得到紫杉醇的可注射組合物。
實(shí)施例7-10包含紫杉醇、增溶劑、N-乙?；彼岷蜔o水乙醇的紫杉醇的可注射組合物<實(shí)施例7>紫杉醇的可注射組合物7向527mg(56.7重量％)Cremophor EL與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，以完全溶解紫杉醇。向其中加入0.5mg(0.05重量％)N-乙?；彼幔玫阶仙即嫉目勺⑸浣M合物。
<實(shí)施例8>紫杉醇的可注射組合物8
向527mg(56.7重量％)Cremophor ELP與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，以完全溶解紫杉醇。向其中加入0.5mg(0.05重量％)N-乙?；彼?，得到紫杉醇的可注射組合物。
<實(shí)施例9>紫杉醇的可注射組合物9向527mg(56.7重量％)HCO 60與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，以完全溶解紫杉醇。向其中加入0.5mg(0.05重量％)N-乙?；彼?，得到紫杉醇的可注射組合物。
<實(shí)施例10>紫杉醇的可注射組合物10向527mg(56.7重量％)HCO 40與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，以完全溶解紫杉醇。向其中加入0.5mg(0.05重量％)N-乙酰基脯氨酸，得到紫杉醇的可注射組合物。
實(shí)施例11-14包含紫杉醇、HCO 60、N-乙?；被岷蜔o水乙醇的紫杉醇的可注射組合物<實(shí)施例11>紫杉醇的可注射組合物11向527mg(56.7重量％)HCO 60與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，以完全溶解紫杉醇。向其中加入1.2mg(0.1重量％)N-乙酰基脯氨酸，得到紫杉醇的可注射組合物。
<實(shí)施例12>紫杉醇的可注射組合物12向527mg(56.7重量％)HCO 60與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，以完全溶解紫杉醇。向其中加入0.75mg(0.1重量％)N-乙?；彼?，得到紫杉醇的可注射組合物。
<實(shí)施例13>紫杉醇的可注射組合物13向527mg(56.7重量％)HCO 60與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，以完全溶解紫杉醇。向其中加入0.1mg(0.1重量％)N-乙酰基色氨酸，得到紫杉醇的可注射組合物。
<實(shí)施例14>紫杉醇的可注射組合物14向527mg(56.7重量％)HCO 60與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，以完全溶解紫杉醇。向其中加入0.6mg(0.1重量％)N-乙?；腚装彼幔玫阶仙即嫉目勺⑸浣M合物。
<對(duì)比例>Taxol的防腐性可注射組合物(得自Faulding Corporation)向527mg(56.7重量％)Cremophor EL527與0.5ml無水乙醇的溶液加入6mg(0.6重量％)紫杉醇。將混合物攪拌30分鐘，以完全溶解紫杉醇。向其中加入0.2mg(0.2重量％)枸櫞酸，得到紫杉醇的可注射組合物。所述組合物的pH為6.0。
得自Faulding Corporation的可注射組合物的穩(wěn)定性試驗(yàn)顯示，殘余的紫杉醇百分比減少了6.56％，所述組合物的粒度為10.0nm。
<實(shí)驗(yàn)例1>因增溶劑而異的殘余的紫杉醇百分比測(cè)量為了測(cè)量紫杉醇因增溶劑而異的穩(wěn)定性，測(cè)量了由所述實(shí)驗(yàn)1-6制備的紫杉醇的可注射組合物中殘余的紫杉醇百分比。
將含有紫杉醇和增溶劑的紫杉醇的可注射組合物分別在50℃下處理一周、兩周和四周。用高效液相色譜測(cè)量處理后的組合物的殘余百分比。結(jié)果如表1所示。
表1殘余的紫杉醇百分比(％)
如表1所示，在以Cremophor EL作為穩(wěn)定劑的情況下，殘余的紫杉醇百分比與初始相比減少了26.27％。Cremophor EL的結(jié)果顯示了殘余的紫杉醇百分比的減少最大。在使用增溶劑、例如HCO 60、Pluronic L64和PluronicL44制備的紫杉醇可注射組合物中，殘余的紫杉醇百分比減少了5％或更低。因而，所述穩(wěn)定劑增加紫杉醇的穩(wěn)定性。
<實(shí)驗(yàn)例2>因穩(wěn)定劑而異的殘余的紫杉醇百分比測(cè)量為了測(cè)量紫杉醇因穩(wěn)定劑而異的穩(wěn)定性，測(cè)量了借助所述實(shí)驗(yàn)7-10制備的紫杉醇的可注射組合物中殘余的紫杉醇百分比。
將含有紫杉醇、增溶劑和穩(wěn)定劑N-乙?；彼岬淖仙即嫉目勺⑸浣M合物分別在50℃下處理一周、兩周和四周。用高效液相色譜測(cè)量處理后的組合物的殘余百分比。結(jié)果如表2所示。
表2殘余的紫杉醇百分比(％)
如表2所示，在加入N-乙?；彼嶙鳛榉€(wěn)定劑的情況下，與實(shí)驗(yàn)1-4相比，殘余的紫杉醇百分比增加兩倍。結(jié)果顯示，在加入增溶劑和穩(wěn)定劑如N-乙?；彼岬那闆r下，提高了紫杉醇的穩(wěn)定性。
而且，對(duì)比實(shí)驗(yàn)顯示了商業(yè)上可得到的Taxol的可注射組合物的殘余百分比。在對(duì)比實(shí)驗(yàn)中，殘余的紫杉醇百分比在4周內(nèi)減少6.56％。不過在實(shí)驗(yàn)8中，殘余的紫杉醇百分比在相同時(shí)間內(nèi)減少3.82％。所以，在加入N-乙?；彼嶙鳛榉€(wěn)定劑的情況下，殘余的紫杉醇百分比增加兩倍。
<實(shí)驗(yàn)例3>因N-乙?；被岫惖臍堄嗟淖仙即及俜直葴y(cè)量測(cè)量加入各種N-乙?；被嶂苽涞淖仙即嫉目勺⑸浣M合物中殘余的紫杉醇百分比，如所述實(shí)驗(yàn)9、11-14。
將含有紫杉醇、增溶劑和穩(wěn)定劑N-乙?；被岬淖仙即嫉目勺⑸浣M合物分別在50℃下處理一周、兩周和四周。用高效液相色譜測(cè)量處理后的組合物的殘余百分比。結(jié)果如表3所示。
表3殘余的紫杉醇百分比(％)
如表3所示，在加入穩(wěn)定劑，例如N-乙?；被岬那闆r下，殘余的紫杉醇百分比在4周內(nèi)減少5％或更低。確切而言，在加入N-乙?；i氨酸或N-乙?；腚装彼嶙鳛榉€(wěn)定劑的情況下，殘余的紫杉醇百分比分別減少2.2％或1.91％。結(jié)果顯示相對(duì)于其他N-乙?；被岫?，N-乙?；i氨酸或N-乙?；腚装彼崽岣吡俗仙即嫉姆€(wěn)定性。
<實(shí)驗(yàn)例4>稀釋試驗(yàn)將紫杉醇的可注射組合物用生理鹽水或5％葡萄糖溶液稀釋10倍，對(duì)機(jī)體給藥。為了觀察紫杉醇在稀釋溶液中的穩(wěn)定性，將在所述實(shí)驗(yàn)中制備的紫杉醇的可注射組合物按一至十的比例稀釋在生理鹽水溶液中。用高效液相色譜測(cè)量所處理組合物的殘余百分比。結(jié)果如表4所示。
表4稀釋溶液中殘余的紫杉醇百分比(％)
如表4所示，在所述稀釋溶液的情況下，殘余的紫杉醇百分比減少了3％或更低。確切而言，在使用HCO 40作為穩(wěn)定劑所制備的稀釋溶液的情況下，殘余的紫杉醇百分比減少了1.75％。結(jié)果顯示，作為穩(wěn)定劑的HCO 40為組合物中的紫杉醇提供最大的穩(wěn)定性。
<實(shí)驗(yàn)例5>粒度的測(cè)量為了觀察紫杉醇的粒度隨時(shí)間推移的變化，向在所述實(shí)驗(yàn)1-16中制備的紫杉醇的可注射組合物加入蒸餾水，稀釋這些組合物。測(cè)量稀釋液中紫杉醇的粒度。結(jié)果如表5所示。
表5
如表5所示，比較初始與4周后的粒度。如果紫杉醇在稀釋溶液中的穩(wěn)定性降低了，紫杉醇的粒度因紫杉醇的聚集或沉淀而增加。因而結(jié)果顯示，紫杉醇溶解在稀釋溶液中，沒有聚集或沉淀。
<實(shí)驗(yàn)例6>紫杉醇的可注射組合物的大鼠毒性試驗(yàn)在紫杉醇的可注射組合物的毒性試驗(yàn)中使用4周齡ICR系雄性大鼠。
在紫杉醇的可注射組合物包含紫杉醇、HCO 60和N-乙酰基半胱氨酸的情況下，向大鼠尾靜脈內(nèi)注射給以表6所示劑量。而且，按相同程序向大鼠尾部給以來自Bristol-Myers Squibb Corporation的Taxol。上述毒性試驗(yàn)進(jìn)行2周。結(jié)果如表6所示。
表6
按照與實(shí)驗(yàn)9相同的方法使用增溶劑(例如HCO 60)和穩(wěn)定劑(例如N-乙?；腚装彼?制備的紫杉醇的可注射組合物，向大鼠靜脈內(nèi)注射給藥。如表6所示，30mg和45mg可注射組合物分別導(dǎo)致100％和75％的存活比。而且在上述情況下，LD50為45mg或更高。20mg、30mg和45mg Taxol分別導(dǎo)致75％、50％和50％。在上述情況下，LD50為45mg。
結(jié)果顯示，由于HCO 60的低毒性和N-乙酰基半胱氨酸的穩(wěn)定性，根據(jù)本發(fā)明的包含HCO 60和N-乙?；腚装彼岬目勺⑸浣M合物的毒性低于通過混合紫杉醇與增溶劑Cremophor EL所制備的普通可注射組合物。
工業(yè)實(shí)用性如上所述，本發(fā)明提供制備紫杉醇的可注射組合物的方法，該組合物包含紫杉醇、無水乙醇、增溶劑(例如聚氧乙烯氫化蓖麻油)和穩(wěn)定性(例如N-乙酰基氨基酸)。所述組合物與普通組合物相比具有更高的功效。而且，所述組合物具有低毒性以及提高了的室溫穩(wěn)定性。因而，根據(jù)本發(fā)明的紫杉醇的可注射組合物可有效地用作抗腫瘤劑。
權(quán)利要求
1.紫杉醇的可注射組合物，包含紫杉醇、增溶劑、穩(wěn)定劑和無水乙醇，其中該增溶劑是聚氧乙烯氫化蓖麻油。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的紫杉醇的可注射組合物，其中該組合物含有0.1-5.0重量％的紫杉醇、95-99.89重量％的聚氧乙烯氫化蓖麻油與無水乙醇、和0.01-1.0重量％的穩(wěn)定劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的紫杉醇的可注射組合物，其中該聚氧乙烯氫化蓖麻油是通過加入平均摩爾數(shù)40、50和60的環(huán)氧乙烷制備的。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的紫杉醇的可注射組合物，其中該聚氧乙烯氫化蓖麻油是通過加入平均摩爾數(shù)60的環(huán)氧乙烷制備的。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的紫杉醇的可注射組合物，其中該聚氧乙烯氫化蓖麻油與無水乙醇是按30∶70-70∶30的體積/體積比混合的。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的紫杉醇的可注射組合物，其中該穩(wěn)定劑選自由有機(jī)酸、無機(jī)酸、聚山梨醇酯、乙醇胺、精氨酸、賴氨酸和N-乙?；被峤M成的組。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的紫杉醇的可注射組合物，其中所述組合物的pH在8和以下的范圍內(nèi)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的紫杉醇的可注射組合物，其中pH在6.0至7.5的范圍內(nèi)。
9.紫杉醇的可注射組合物，包含紫杉醇、增溶劑、穩(wěn)定劑和無水乙醇，其中該穩(wěn)定劑是N-乙酰基氨基酸。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的紫杉醇的可注射組合物，其中該組合物含有0.1-0.5重量％的紫杉醇、95-99.89重量％的增溶劑與無水乙醇、和0.01-1.0重量％的N-乙?；被?。
11.根據(jù)權(quán)利要求9的紫杉醇的可注射組合物，其中該增溶劑與無水乙醇是按30∶70-70∶30的體積/體積比混合的。
12.根據(jù)權(quán)利要求9的紫杉醇的可注射組合物，其中該增溶劑是聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫化蓖麻油或泊洛沙姆。
13.根據(jù)權(quán)利要求9的紫杉醇的可注射組合物，其中該N-乙?；被崾荖-乙?；i氨酸、N-乙?；彼?、N-乙?；彼帷-乙?；彼峄騈-乙酰基半胱氨酸。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的紫杉醇的可注射組合物，其中該N-乙?；被崾荖-乙酰基半胱氨酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及紫杉醇的可注射組合物，更確切為具有優(yōu)異抗癌效果的紫杉醇的可注射組合物，包含增溶劑(例如聚氧乙烯氫化蓖麻油)、無水乙醇和穩(wěn)定劑(例如N－乙?；被?。該紫杉醇的可注射組合物提供高于已知組合物的醫(yī)療效果，不僅顯示更低的毒性，而且顯示優(yōu)異的紫杉醇溶解性和室溫穩(wěn)定性，從而能夠得到含有微細(xì)顆粒的靜脈注射劑。
文檔編號(hào)A61K36/185GK1568178SQ02820127
公開日2005年1月19日 申請(qǐng)日期2002年9月9日 優(yōu)先權(quán)日2001年9月10日
發(fā)明者李佑榮, 李相憲, 金桂顯 申請(qǐng)人:中外制藥株式會(huì)社