專利名稱：含抗壞血酸或其鹽的灌洗液及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本申請涉及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別涉及用于醫(yī)學(xué)操作中的灌洗液。
背景技術(shù)：
目前，肌肉骨骼疾病是導(dǎo)致世界上殘疾的主要原因，并占醫(yī)療費(fèi)用的25%。隨著人們體育運(yùn)動的增加，運(yùn)動損傷也逐漸增多，這也引起了對運(yùn)動損傷的有效治療方法的廣泛社會關(guān)注。運(yùn)動損傷包括各種形式的肌腱和韌帶損傷，其占用了相當(dāng)比重的醫(yī)療衛(wèi)生資源。這些損傷以其愈合緩慢和恢復(fù)機(jī)制差為特點(diǎn)。但是，至今為止，還沒有非常有效的改善肌腱和韌帶損傷愈合的方法。

發(fā)明內(nèi)容
在一實(shí)施方案中，提供灌洗液，其含有15-50mM抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽；以及電解質(zhì)，所述灌洗液具有270m0sm至340m0sm的同滲容摩。在另一實(shí)施方案中，提供治療個體肌腱和/或韌帶損傷的方法，其包括用本文所公開的灌洗液灌洗所述肌腱和/或韌帶。 在另一實(shí)施方案中，提供抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽在制備用于促進(jìn)治療個體肌腱和/或韌帶損傷的愈合的灌洗液中的用途，其中所述抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽在所述灌洗液中的濃度為15_50mM，所述灌洗液具有270m0sm至340m0sm的同滲容摩。


本文的附圖作為說明書一部分，示例性說明本申請的一個或多個實(shí)施方案，并與本文的描述一起來解釋所公開的實(shí)施方案。該附圖僅是示例性說明本文的一個或多個實(shí)施方案，并不能理解為對其的限制。圖1為與生理鹽水比較，采用含維生素C鈉鹽的外科灌洗液對大鼠模型中肌腱治愈的彈性模量的影響。圖2為與生理鹽水比較，采用含維生素C鈉鹽的外科灌洗液對大鼠模型中肌腱治愈的極限抗拉強(qiáng)度的影響。圖3為與生理鹽水比較，采用含維生素C鈉鹽的外科灌洗液灌洗對大鼠模型中接受ACL重建之后的大鼠的靜態(tài)前后膝松弛度的影響。圖4為與生理鹽水比較，采用含維生素C鈉鹽的外科灌洗液灌洗對大鼠模型中接受ACL重建之后的膝關(guān)節(jié)強(qiáng)度的影響。實(shí)施方案的詳細(xì)描述定義
本文所用術(shù)語“個體”或“患者”并不僅限于人類，也包括除人類以外的其他的哺乳動物。在一些實(shí)施方案中，所述“個體”或“患者”可以交替使用并指實(shí)施外科手術(shù)的個體或患有肌腱和/或韌帶損傷的個體。本文所用術(shù)語“滲透壓”"同滲容摩(osmolarity)"指每升溶液中含有的溶解物質(zhì)(溶質(zhì))的濃度(滲透壓摩爾，Osm)，其形成溶液的滲透壓。本文所用單數(shù)形式的“a”，“an”和“the”也包括復(fù)數(shù)，除非另有所指。具體而言，當(dāng)使用不定冠詞時，其應(yīng)根據(jù)說明書理解為既包括復(fù)數(shù)又包括單數(shù)，除非另有所指。本文所用術(shù)語“約”或大約，當(dāng)其與數(shù)值一起使用時，其意為與該數(shù)值具有1%至5%以內(nèi)的變量的數(shù)值。其他的實(shí)施方案能夠根據(jù)以下實(shí)施方案的詳細(xì)描述而顯而易見。應(yīng)該理解，以下詳細(xì)描述和實(shí)施例在說明實(shí)施方案時，僅僅是示例性的，因?yàn)閷Ρ绢I(lǐng)域技術(shù)人員來說，在發(fā)明精神范疇內(nèi)，對這些實(shí)施方案進(jìn)行修改或替換是顯而易見的。本申請所引用的所有公開出版物、專利文獻(xiàn)以及其他參考文獻(xiàn)均以引用的方式并入本文成為本申請的一部分，就如同單獨(dú)地詳細(xì)地進(jìn)行描述一樣。
具體實(shí)施例方式在一實(shí)施方案中，提供灌洗液，其含有15-50mM抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽；以及電解質(zhì)，所述灌洗液具有270m0sm至340m0sm的同滲容摩。在另一實(shí)施方案中，提供治療個體肌腱和/或韌帶損傷的方法，其包括用本文所公開的灌洗液灌洗所述肌腱和/或韌帶。在另一實(shí)施方案中，提供抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽在制備用于促進(jìn)治療個體肌腱和/或韌帶損傷的愈合的灌洗液中的用途，其中所述抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽所述灌洗液中的濃度為15_50mM,所述灌洗液具有270m0sm至340m0sm的同滲容摩。在一個實(shí)施方案中，本文所公開的灌洗液能夠用于外科手術(shù)、外科操作或醫(yī)學(xué)過程。在另一實(shí)施方案中，所述外科手術(shù)選自整形外科手術(shù)、關(guān)節(jié)鏡手術(shù)以及開放傷手術(shù)。在另一實(shí)施方案中，所述灌洗液是外科灌洗液。在另一實(shí)施方案中，所述灌洗液用于促進(jìn)個體肌腱或韌帶的愈合。在另一實(shí)施方案中，所述灌洗液的同滲容摩為290m0sm至310m0sm。在另一實(shí)施方案中，所述灌洗液與欲應(yīng)用的組織是生理匹配的或是與該組織是等滲的。在一具體的實(shí)施方案中，所述灌洗液具有約298m0sm等滲容摩。在一實(shí)施方案中，所述抗壞血酸的藥物可接受的鹽選自抗壞血酸鈉、抗壞血酸鉀、抗壞血酸鈣以及以上任意的組合。在另一實(shí)施方案中，所述抗壞血酸的藥物可接受的鹽是抗壞血酸鈉。在一些實(shí)施方案中，所述灌洗液中的電解質(zhì)選自氯化鈉、氯化鉀、聯(lián)氯化鈣、硫酸鎂以及以上任意的組合。

在本文的公開的實(shí)施方案中，可以通過調(diào)節(jié)所述灌洗液中電解質(zhì)或非電解質(zhì)分子的濃度來調(diào)節(jié)期望的滲透壓范圍。在一些實(shí)施方案中，電解質(zhì)或非電解質(zhì)物質(zhì)的濃度可以根據(jù)如下已知的計(jì)算公式來計(jì)算:ImOsm(毫等滲容摩)=lmmol/L電解質(zhì)離子或非電解質(zhì)分子濃度(張強(qiáng)等，第二章“滅菌制劑與無菌制劑”，見“藥劑學(xué)”，第一版，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2005年I月，ρρ113)ο在一個具體的實(shí)施方案中，所述電解質(zhì)為氯化鈉、其在灌洗液中的濃度為99-133mM。在另一實(shí)施方案，所述灌洗液由15-50mM抗壞血酸鈉與99-133mM氯化鈉水溶液組成。在一個實(shí)施方案中，所述灌洗液具有生理范圍的pH，例如為5.5-8.5、或5.5-7.4或 5.5-6.7。在其他的實(shí)施方案中，本文所公開的灌洗液可以利用或不用緩沖系統(tǒng)來將其pH維持在上述范圍。當(dāng)不需要緩沖系統(tǒng)時，所述電解質(zhì)即可維持所述灌洗液的PH范圍。當(dāng)需要緩沖系統(tǒng)時，所述緩沖系統(tǒng)包含重碳酸鹽離子或兩性離子化合物，例如N- (2-羥乙基)哌嗪-N’ -乙磺酸，常稱為HEPES。在一些實(shí)施方案中，本文所公開的灌洗液是安全、無毒和/或穩(wěn)定的溶液。本申請說明書通篇所用的“一(個)實(shí)施方案”、“另一實(shí)施方案” “其他實(shí)施方案”或“一些實(shí)施方案”，是指與該實(shí)施方案有關(guān)的一些具體的特征、結(jié)構(gòu)或特性被包括至少一個實(shí)施方案中。因此，顯而易見的是，在本申請說明書通篇出現(xiàn)的“一(個)實(shí)施方案”、“另一實(shí)施方案” “其他實(shí)施方案”或“一些實(shí) 施方案”并不必然地指該實(shí)施方案本身，它們相互之間可以替換使用，而且，重要的是，所包含的具體的特征、結(jié)構(gòu)或特性可以適當(dāng)?shù)靥鎿Q或組合成一個或更多個實(shí)施方案。以下將以急性蓋肌腱損傷模型和前交叉韌帶重建(ACLR)模型為例，示例性說明肌腱和/或韌帶的損傷愈合的實(shí)施方案，應(yīng)理解，這些例子僅僅是示例性地說明本文所公開的實(shí)施方案，不應(yīng)理解為對其他方法和其他手術(shù)形式的限制。實(shí)施例實(shí)施例1采用二個月齡的雄性SD大鼠的膝蓋骨肌腱窗損傷動物模型，來證明本文公開的灌洗液對急性肌腱損傷愈合的作用。在此實(shí)施例中，實(shí)驗(yàn)組中，采用的灌洗液分別含有15mM、50mM和150mM抗壞血酸鈉，而對照組采用生理鹽水。其中三個實(shí)驗(yàn)組中所用灌洗液分別為:LD vitC:含 3mg/ml (或約 15mM)抗壞血酸鈉，7.8g/L NaCl ；MD vitC:含 10mg/ml (或約 5OmM)，5.8g/L NaCl ；HD vitC:僅含 15mg/ml (或約 151mM)抗壞血酸鈉。動物在第42天處死后，通過生物力學(xué)試驗(yàn)來檢測本文所公開的灌洗液對組織愈合中機(jī)械強(qiáng)度的作用，結(jié)果如圖1和圖2所示。實(shí)驗(yàn)證明，在手術(shù)中開始應(yīng)用本文所公開的灌洗液是有利的并能夠促進(jìn)肌腱損傷的愈合。如圖1所示，在成熟的膝蓋肌腱窗模型中，SD大鼠(η = 10)接受生理鹽水(鹽水)，15mM抗壞血酸鈉(LD vitC), 50mM抗壞血酸鈉(MD vitC)或150mM抗壞血酸鈉(HDvitC)對傷口進(jìn)行灌洗。在第6周，LD vitC(p = 0.008)和MD vitC組(p = 0.004)的膝蓋肌腱彈性模量顯著高于鹽水組(P = 0.022)，這表明，在肌腱性能重建中，含15mM或50mM抗壞血酸鈉的灌洗液明顯好于生理鹽水，是較好的外科灌洗液。此外，ACLR MD vitC組的靜態(tài)A-P松弛也低于ACLR鹽水組，但由于樣本量小而沒有觀察到顯著性。在另一增加樣本量的實(shí)驗(yàn)中，在膝關(guān)節(jié)韌帶松弛重建中，含50mM抗壞血酸鈉的灌洗液明顯好于生理鹽水。如圖2所示,在相同的模型中，LD vitC組(P = 0.001)和MD vitC組(p = 0.001)的極限抗拉強(qiáng)度明顯好于鹽水組的膝極限抗拉強(qiáng)度，表明在肌腱張力恢復(fù)方面含15mM和50mM抗壞血酸鈉的灌洗液是較好的灌洗液。實(shí)施例2在動物實(shí)驗(yàn)中，采用三個月齡的雄性SD大鼠的前交叉韌帶(ACL)重建模型來證明本文公開的灌洗液對肌腱損傷愈合的作用。實(shí)驗(yàn)組中，采用的灌洗液分別含有15mM、50mM和150mM抗壞血酸鈉，而對照組采用生理鹽水。其中三個實(shí)驗(yàn)組中所用灌洗液分別為:LD vitC:含 3mg/ml (或 15mM)抗壞血酸鈉，7.8g/L NaClMD vitC:含 10mg/ml (或 50mM)，5.8g/L NaClHD vitC:僅含 15mg/ml (或 151mM)抗壞血酸鈉。動物在第42天處死后，通過生物力學(xué)試驗(yàn)來檢測靜態(tài)的前后(A-P)膝松弛性和膝強(qiáng)度，結(jié)果如圖3和圖4所示。實(shí)驗(yàn)證明，在手術(shù)中開始應(yīng)用本文所公開的灌洗液是有利的并能夠促進(jìn)前交叉韌帶移植物的 愈合。如圖3所示，在成熟的ACL重建模型中，SD大鼠(η = 8)接受ACL重建手術(shù)(ACLR)或假手術(shù)。在手術(shù)中，利用生理鹽水(ACLR鹽水)，15mM抗壞血酸鈉(ACLR LD vitC),50mM抗壞血酸鈉(ACLR MD vitC)或150mM抗壞血酸鈉(ACLR HD vitC)對傷口進(jìn)行灌洗。在第6周，ACLR LD vitC組的靜態(tài)A-P松弛顯著低于ACLR鹽水組(p = 0.022)，這表明，在膝關(guān)節(jié)韌帶松弛重建中，含15mM抗壞血酸鈉的灌洗液明顯好于生理鹽水。此外，ACLR MD vitC組的靜態(tài)A-P松弛也低于ACLR鹽水組，但由于樣本量小而沒有觀察到顯著性。在另一增加樣本量的實(shí)驗(yàn)中，在膝關(guān)節(jié)韌帶松弛重建中，含50mM抗壞血酸鈉的灌洗液明顯好于生理鹽水。如圖4所示，在相同的模型中，ACLR LD vitC組的膝強(qiáng)度明顯好于ACLR鹽水組的膝強(qiáng)度(P = 0.04)，表明在膝關(guān)節(jié)性能恢復(fù)方面含15mM抗壞血酸鈉的灌洗液是較好的灌洗液。此外，ACLR MD vitC組的膝強(qiáng)度也高于ACLR鹽水組，但由于樣本量小而沒有觀察到顯著性。這也表明在膝關(guān)節(jié)功能恢復(fù)中，含50mM抗壞血酸鈉的灌洗液好于生理鹽水。再者，利用本文所公開的灌洗液處理的動物模型，未表現(xiàn)出任何副作用，并隨后的人體實(shí)驗(yàn)表明其是高度安全并能夠耐受的。因此，本文所公開的灌洗液在臨池應(yīng)用中不會產(chǎn)生安全問題。討論肌腱好韌帶損傷的愈合通常包括四個不同的階段，即炎癥期、細(xì)胞聚集期、組織修復(fù)期和重建期。已知的促進(jìn)肌腱和韌帶愈合的嘗試多數(shù)針對愈合的后期，例如增加細(xì)胞增殖和基質(zhì)的合成等。本申請實(shí)施例的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，抗壞血酸及其藥物可接受的鹽表現(xiàn)出對受損肌腱和韌帶的機(jī)械性能產(chǎn)生積極的作用。這些證據(jù)證明，在愈合的早期甚至在手術(shù)過程中局部應(yīng)用抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽會對發(fā)揮有益的作用。
由于抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽具有極高的安全性，它們能夠廣泛地應(yīng)用于臨床實(shí)踐，例如手術(shù)或創(chuàng)傷中的肌腱和/或韌帶的愈合，并對醫(yī)生和患者產(chǎn)生積極的作用 。
權(quán)利要求
1.灌洗液，包含 15-50mM抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽,和 電解質(zhì)， 所述灌洗液具有270m0sm至340m0sm的等滲容摩。
2.如權(quán)利要求1所述的灌洗液,其中所述灌洗液的等滲容摩為290m0sm至310m0sm。
3.如權(quán)利要求1或2所述的灌洗液，其中所述抗壞血酸的藥物可接受的鹽選自抗壞血酸鈉、抗壞血酸鉀、抗壞血酸鈣以及上述的任意組合。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的灌洗液，其中所述抗壞血酸的藥物可接受的鹽為抗壞血酸鈉。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的灌洗液，其中所述電解質(zhì)選自氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、硫酸鎂及其任意的組合。
6.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的灌洗液，其中所述電解質(zhì)為99-133mM濃度的氯化· 鈉。
7.如權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述灌洗液，其中所述灌洗液由15-50mM抗壞血酸鈉和99-133mM氯化鈉水溶液組成。
8.如權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的灌洗液，其中所述灌洗液具有5.5-8.5,5.5-7.4或5.5-6.7 的 pH 值。
9.如權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的灌洗液，其中所述灌洗液用于外科手術(shù)、外科操作或醫(yī)學(xué)操作或者用于促進(jìn)個體的肌腱和/或韌帶損傷的愈合。
10.如權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的灌洗液，其中所述外科手術(shù)選自整形外科手術(shù)、關(guān)節(jié)鏡手術(shù)以及開放傷手術(shù)。
11.15-50mM抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽在制備用于促進(jìn)個體的肌腱和/或韌帶損傷的愈合或者治療個體的肌腱和/或韌帶損傷的權(quán)利要求ι- ο任一項(xiàng)所述的灌洗液中的用途。
12.如權(quán)利要求11所述的用途，其中所述個體正經(jīng)歷外科手術(shù)、外科操作或醫(yī)學(xué)操作、或者患有肌腱和/或韌帶損傷。
13.如權(quán)利要求11或12所述的用途，其中所述個體為哺乳動物或人。
全文摘要
本申請公開了含有15-50mm抗壞血酸和/或其藥物可接受的鹽、以及電解質(zhì)的灌洗液。還公開了該灌洗液的用途。
文檔編號A61K31/375GK103070859SQ201110342820
公開日2013年5月1日 申請日期2011年10月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月25日
發(fā)明者陳啟明 申請人:香港中文大學(xué)