專利名稱：干燥物及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及接種了牛痘病毒(vaccinia virus)的兔子的炎癥皮膚提取液的干燥物以及該干燥物的制造方法。
背景技術(shù)：
接種了牛痘病毒的兔子的炎癥皮膚提取液(以下稱為提取液)是含有從接種了牛痘病毒的兔子的炎癥皮膚組織提取分離出的非蛋白性活性物質(zhì)的提取液。
含有該提取液作為有效成份的醫(yī)藥品的接種了牛痘病毒的家兔的炎癥皮膚提取液制劑(商品名神經(jīng)妥樂平)如《醫(yī)療藥日本醫(yī)藥品集》(2004年(第27版)，日本醫(yī)藥信息中心編，株式會(huì)社時(shí)報(bào)發(fā)行)的第2499～2501頁所述，是一種被認(rèn)為廣泛適應(yīng)于伴隨著腰痛、頸肩腕綜合癥、癥狀性神經(jīng)痛、肩周炎、變形性關(guān)節(jié)癥、皮膚病(濕疹、皮炎、蕁麻疹)的搔癢、過敏性鼻炎、亞急性脊髓視神經(jīng)病后遺癥的冷感·異常知覺·痛、帶狀皰疹后神經(jīng)痛等的非常獨(dú)特的制劑，作為醫(yī)療用醫(yī)藥品，其皮下注射、肌肉注射、靜脈注射用注射劑以及片劑均得到制造許可并在市面上銷售。
該提取液是來自生物體的提取液，未鑒定出其單一的有效成份。因此，有效成份的定量是通過檢測(cè)其生物活性(效價(jià))進(jìn)行，具體而言，利用疼痛臨界值比正常動(dòng)物低的慢性應(yīng)激反應(yīng)動(dòng)物——SART應(yīng)激反應(yīng)(反復(fù)寒冷負(fù)荷)鼠來求得鎮(zhèn)痛系數(shù)的生物學(xué)試驗(yàn)法(《日藥理志》，第72卷，第5號(hào)，573～584頁，1976年)。即，用SART應(yīng)激反應(yīng)鼠根據(jù)炎癥足加壓法(Randall-Selitto法)進(jìn)行鎮(zhèn)痛試驗(yàn)，求得鎮(zhèn)痛系數(shù)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的鎮(zhèn)痛系數(shù)求得的ED50值來規(guī)定神經(jīng)妥樂平單位(Neurotropin，NU)。神經(jīng)妥樂平注射劑每1mL以神經(jīng)妥樂平單位計(jì)，含1.2單位，神經(jīng)妥樂平片劑每片含4.0神經(jīng)妥樂平單位。
在出售將該提取液作為有效成份的醫(yī)藥品制劑的日本等地方，除上述鎮(zhèn)痛活性的定量以外，通過施行確認(rèn)具有規(guī)定水平以上的抑制類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的活性(下亦稱為KPI活性)的效能試驗(yàn)法，來更嚴(yán)格地確保藥劑的品質(zhì)和功效。
激肽釋放酶是廣泛存在于各種動(dòng)物的血漿和組織中的蛋白質(zhì)分解酶，已知有包括激肽釋放酶-激肽系的酶系。在血漿中，通過血液凝固第XII因子的活化，將非活性的前激肽釋放酶轉(zhuǎn)換為活性型血漿激肽釋放酶，該生成的血漿激肽釋放酶作用于血漿中的高分子激肽原，使作為九肽化學(xué)介質(zhì)的緩激肽游離出來。緩激肽具有因感覺神經(jīng)刺激導(dǎo)致強(qiáng)烈痛感、因血管擴(kuò)張導(dǎo)致血壓降低、因毛細(xì)血管透過性提高導(dǎo)致水腫等各種作用，被認(rèn)為在發(fā)痛、炎癥、血液調(diào)節(jié)方面發(fā)揮著重要作用。因此，具有緩激肽游離抑制作用的藥劑就表現(xiàn)出鎮(zhèn)痛、消炎、抗水腫等各種藥效。
該提取液已被證明具有抑制緩激肽游離的作用(Eur.J.Pharmacol.，vol.157，No.1，p93～99，1998)，該藥理活性基于抑制類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的作用。而且，還開發(fā)了可在體外(in vitro)定量測(cè)定藥劑的血漿類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生阻礙能的方法(《基礎(chǔ)和臨床》，第20卷，第17號(hào)，8889～8895頁，1986年)。
本發(fā)明涉及在制造最終制品的中間階段得到的干燥物及該干燥物的制造方法，該最終制品具有將接種了牛痘病毒的兔子的炎癥皮膚提取液作為有效成份的口服制劑的規(guī)格和試驗(yàn)方法所規(guī)定的KPI活性。關(guān)于提取液的干燥物，在下述專利文獻(xiàn)1中，僅記載了在減壓下干燥固化等內(nèi)容，但在由提取液制造口服制劑方面，尚不存在揭示了用于制造具有KPI活性的干燥物的具體方法的現(xiàn)有技術(shù)。
專利文獻(xiàn)1特開昭53-101515號(hào)公報(bào)。

發(fā)明內(nèi)容
當(dāng)將該提取液制成片劑等用于口服的固體制劑時(shí)，需要干燥該提取液?？墒?，通過通常施行的濃縮干燥等得到的該提取液的干燥物被認(rèn)為沒有KPI活性，所以不能制造具有KPI活性的片劑等固體制劑作為最終制劑。
本公司長年致力于研究開發(fā)將已制造出售的神經(jīng)妥樂平注射劑轉(zhuǎn)化為口服制劑，而當(dāng)時(shí)的困難之一是得到具有KPI活性的最終制劑。本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)，用經(jīng)驗(yàn)性特定方法制造的最終制劑具有KPI活性，完成了神經(jīng)妥樂平片劑的開發(fā)，但申請(qǐng)人將該技術(shù)作為技術(shù)秘密。本發(fā)明人等對(duì)提取液的用于得到具有KPI活性的干燥物的干燥方法進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在干燥固化提取液之前，添加糖類并混合，將其干燥，由此得到具有KPI活性的提取液的干燥物，并找到此時(shí)的最適pH值等，從而完成了本發(fā)明。
發(fā)明效果本發(fā)明提供一種接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液的具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生活性的干燥物，該干燥物最終可用作制造具有KPI活性的片劑、顆粒劑、散劑、細(xì)粒等固體制劑的原料。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明涉及一種接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液的具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生活性的干燥物以及該干燥物的制造方法。具體涉及一種提取液的干燥物的制造方法，其特征在于，當(dāng)干燥提取液時(shí)，在干燥固化之前添加糖類并混合，干燥該混合物。利用該制造方法，可得到具有KPI活性的提取液的干燥物，使用該干燥物最終可制造出保持KPI活性的片劑等固體制劑。
接種了牛痘病毒的家兔的炎癥皮膚提取液等本提取液可利用后述方法制造，本發(fā)明方法的特征在于，當(dāng)干燥所得提取液時(shí)，在干燥固化提取液前，添加糖類并混合，干燥該混合物。本發(fā)明的糖類可舉出葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖、山梨糖等單糖類；乳糖、蔗糖、麥芽糖、棉子糖、松三糖等低聚糖類；茁霉多糖、糊精、β-糊精、葡聚糖等多糖類等。添加的糖類既可使用上述糖中的一種，也可組合使用兩種以上。多糖類中不溶于水的多糖不適用于本發(fā)明，可溶于水的多糖能用于本發(fā)明。另外，不溶于水的多糖類是指符合《日本藥典》(第十四修正版)通則23中的“幾乎不溶”的多糖類，可例舉出結(jié)晶纖維素、淀粉等。
糖類的添加量可根據(jù)所用糖類的種類、提取液濃度等適當(dāng)設(shè)定，在下述實(shí)施例1的受驗(yàn)提取液中使用乳糖的情況下，優(yōu)選為0.1重量％以上，為得到再現(xiàn)性很高、且具有高KPI活性的提取液的干燥物，更優(yōu)選添加0.5重量％以上的乳糖。
干燥方案可采用通常的制劑調(diào)制中所采用的濃縮干燥。例如，在溫和條件下的濃縮方案可舉出不用加熱到很高溫度、在溫浸(Maceration)下(35～45℃)，減壓蒸餾除去水分，并減壓干燥的方案。再者，將含有上述糖類的賦形劑等添加到提取液或其濃縮液中并混煉結(jié)合后，再造粒干燥，也可得到顆粒狀的本發(fā)明干燥物。提取液的濃縮優(yōu)選在溶液pH為10以下的條件下進(jìn)行，為得到具有高KPI活性的提取液的干燥物，更優(yōu)選為在將pH調(diào)整為8.5～9.7的條件下進(jìn)行。
本發(fā)明的糖類的添加既可在一開始就添加到提取液中，也可在濃縮到某種程度后添加到提取液中，通常在制造固體制劑的情況下，由于在干燥固化后再添加糖類，使最終制造出的干燥物不具有KPI活性。根據(jù)本發(fā)明制造片劑等固體制劑時(shí)，可使用各種添加劑來制劑，如《日本藥典》(第十四修正版)制劑總則所述，可舉出用適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ固砑由鲜鎏穷惒饪s干燥的提取液的干燥物直接形成顆粒，或在加入賦形劑、粘合劑、崩解劑或其它適當(dāng)添加劑后與上述干燥物均勻混合的產(chǎn)物形成顆粒，然后添加潤滑劑等的壓縮成型方法；或?qū)⒒旌袭a(chǎn)物直接壓縮成型的方法等。還可采用在提取液濃縮到某種程度時(shí)，添加上述糖類及賦形劑、粘合劑、崩解劑等添加劑均勻混合并混煉，用適當(dāng)?shù)姆椒ㄔ炝８稍锏玫礁稍镂铮缓笤偌尤霛櫥瑒┑葔嚎s成型的方法，用該方法也可實(shí)施將提取液制成片劑的工藝。而且，根據(jù)需要，還可添加著色劑、矯味劑等，也可用適當(dāng)涂敷劑施以劑皮。
制造本發(fā)明干燥物所用提取液可通過將牛痘病毒接種到兔子皮膚上，出了痘的炎癥皮膚組織經(jīng)搗碎，添加提取溶劑除去組織片后，進(jìn)行除蛋白處理，然后使之吸附在吸附劑上，最后洗提出有效成份而得到。
本發(fā)明的兔子包括屬于兔目的所有兔子。即，兔子可以是例如穴兔(家兔)、野兔(日本野兔)、啼兔、雪兔等任一種，日本過去飼養(yǎng)的家畜或作為實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物而繁殖的被稱為家兔的兔子也很易于使用。
作為個(gè)例，提取液可按照下述工序制造。
(a)采取接種牛痘病毒并出痘的兔子的皮膚組織，將出痘組織搗碎，在加入水、石炭酸水、生理鹽水或石炭酸加甘油水等提取溶劑后，利用過濾或離心分離得到提取液(濾液或上清)。
(b)調(diào)整上述提取液的pH至酸性并加熱，進(jìn)行除蛋白處理。然后將經(jīng)除蛋白處理的溶液調(diào)為堿性并加熱后，過濾或離心分離。
(c)使所得濾液或上清呈酸性，吸附在活性炭、高嶺土等吸附劑上。
(d)將水等提取溶劑加入上述吸附劑，調(diào)整pH至堿性，洗提吸附成份，由此可得到牛痘病毒接種炎癥組織提取液。然后，調(diào)整pH為適當(dāng)中性附近，即可制成制劑用的原體。
下面更具體地說明上述各工序。
關(guān)于(a)工序采取將牛痘病毒接種在家兔等兔子上而出痘的炎癥皮膚組織經(jīng)搗碎，添加該組織量1～5倍量的提取溶劑，制成乳化懸濁液。提取溶劑可使用蒸餾水、生理鹽水、弱酸性～弱堿性的緩沖液等，也可適當(dāng)添加甘油等穩(wěn)定劑，石炭酸等殺菌/防腐劑，氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂等鹽類等。此時(shí)，通過凍結(jié)融解、超音波、細(xì)胞膜溶解酶或表面活性劑等的處理，破壞細(xì)胞組織，可更易于提取。
關(guān)于(b)工序經(jīng)過濾或離心分離所得乳狀提取液等，除去組織片后，進(jìn)行除蛋白處理。可利用常用的眾所周知的方法實(shí)施除蛋白操作，如可使用加熱處理、用酸、堿、尿素、胍、丙酮等有機(jī)溶劑等的蛋白質(zhì)變性劑處理、等電離點(diǎn)沉淀、鹽析等方法。接著，使用不溶物除去的常用方法例如濾紙(纖維素、硝基纖維素等)、玻璃過濾器、硅藻土、塞氏過濾板等進(jìn)行過濾、超過濾、離心分離等，除去析出的不溶蛋白質(zhì)。
關(guān)于(c)工序使用鹽酸、硫酸、氫溴酸等酸將如上所述而得的含有效成份的提取液調(diào)整為酸性，優(yōu)選pH為3.5～5.5，進(jìn)行對(duì)吸附劑的吸附操作?？墒褂玫奈絼┛膳e出活性炭、高嶺土等，將吸附劑添加到提取液中并攪拌，或使提取液通過吸附劑填充柱，可使該吸附劑吸附有效成份。在將吸附劑添加到提取液中的情況下，經(jīng)過濾或離心分離等除去溶液，可得到吸附了有效成份的吸附劑。
關(guān)于(d)工序?yàn)榱藢⑽絼┲械挠行С煞萑艹?溶離)，將溶離溶劑添加到上述吸附劑中，在室溫下或經(jīng)適當(dāng)加熱，或攪拌溶離，用過濾或離心分離等通常方法除去吸附劑而可達(dá)成溶離。所用的溶離溶劑可使用堿性溶劑，例如調(diào)整pH至堿性的水、甲醇、乙醇、異丙醇等，或它們的適當(dāng)混合溶液，可優(yōu)選pH調(diào)整為9～12的水。
這樣得到的提取液(溶出液)可適當(dāng)調(diào)制為作為制劑用的原體或醫(yī)藥品制劑優(yōu)選的形態(tài)。例如調(diào)整溶液的pH為中性附近或適當(dāng)?shù)膒H值，作為制劑用的原體。
實(shí)施例下面為本提取液的制造方法的實(shí)例。
參考例1將牛痘病毒接種在健康的成熟家兔皮膚上，剝下出痘的皮膚，將皮膚搗碎，添加石炭酸水。然后對(duì)其加壓過濾，用鹽酸調(diào)整所得濾液的pH至5，然后在90～100℃下加熱處理30分鐘。過濾除蛋白后，用氫氧化鈉調(diào)整pH至9，再于90～100℃下加熱處理15分鐘后過濾。用鹽酸調(diào)整濾液的pH約為4，添加2％的活性炭，攪拌2小時(shí)后，離心分離。將水添加到所得到的活性炭中，用氫氧化鈉調(diào)整pH至10，在60℃下攪拌1.5小時(shí)后，離心分離得到上清。再次將水添加到經(jīng)離心分離而沉淀的活性炭中，用氫氧化鈉調(diào)整pH至11，在60℃下攪拌1.5小時(shí)后，離心分離得到上清。將兩次所得上清合并，用鹽酸中和，得到提取液。
參考例2將牛痘病毒接種在健康的成熟家兔皮膚上，使之感染，然后在無菌環(huán)境下剝下出痘的皮膚，將皮膚切碎，然后添加含石炭酸的甘油水，用勻漿器磨碎成乳狀。然后過濾，用鹽酸調(diào)整所得濾液至弱酸性(pH4.5～5.5)后，在100℃下加熱處理并過濾。用氫氧化鈉將濾液調(diào)至弱堿性(pH8.5～10.0)，再于100℃下加熱處理后過濾。用鹽酸將濾液的pH調(diào)至約為4.5，添加約1.5％的活性炭，攪拌1～5小時(shí)后過濾。將水添加到所得到的活性炭中，用氫氧化鈉調(diào)整pH為9.4～10，攪拌3～5小時(shí)后過濾。用鹽酸中和濾液到中性附近。
參考例3
將牛痘病毒接種在健康的成熟家兔的皮膚上，使之活化后，在無菌環(huán)境下剝下活化的皮膚，將其切碎并加水，用勻漿器磨碎成乳狀物。然后對(duì)其加壓過濾，用鹽酸調(diào)整所得濾液的pH至5.0后，在蒸汽流通和100℃下加熱處理。過濾除蛋白后，用氫氧化鈉調(diào)至pH9.1，再于100℃下加熱處理后過濾。用鹽酸調(diào)整濾液的pH約為4.1，添加2％的活性炭并攪拌2小時(shí)后過濾。再將活性炭5.5％添加到濾液中并攪拌2小時(shí)后過濾。將水添加到最初得到的活性炭中，用氫氧化鈉調(diào)至pH9.9，在60℃下攪拌1.5小時(shí)后過濾。將水添加到最初得到的活性炭和后來得到的活性炭中，用氫氧化鈉調(diào)至pH10.9，在60℃下攪拌1.5小時(shí)后過濾。將濾液合并，用鹽酸中和濾液后，用分子量為100的膜的電滲析法進(jìn)行脫鹽處理。
KPI活性測(cè)定法根據(jù)文獻(xiàn)所述方法測(cè)定受驗(yàn)物質(zhì)對(duì)血漿類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的阻礙活性(KPI活性)(《基礎(chǔ)和臨床》，第20卷，第17號(hào)，8889-8895頁，1986年)。即，如該文獻(xiàn)8890頁所述，將受驗(yàn)溶液和經(jīng)生理鹽水稀釋的人體正常血漿混合后，向其中添加高嶺土懸濁液，使產(chǎn)生血漿激肽釋放酶的反應(yīng)開始，經(jīng)過一定時(shí)間后，添加利馬豆胰蛋白酶抑制劑(LBTI)等活化型血液凝固第XII因子的特異阻礙劑，使激肽釋放酶的產(chǎn)生反應(yīng)停止后，用顯色性合成基質(zhì)(S-2302、chromogenix社制)來定量所產(chǎn)生的激肽釋放酶。合成基質(zhì)S-2302在激肽釋放酶作用下，使顯色性p-硝基苯胺游離，所以可通過在405nm下的吸光度測(cè)定p-硝基苯胺量，來測(cè)定所產(chǎn)生的激肽釋放酶量(活性量)。通過求得未添加受驗(yàn)物質(zhì)組(對(duì)照物)和受驗(yàn)物質(zhì)添加組的吸光度差，可判定受驗(yàn)物質(zhì)的KPI活性。
另外，可適當(dāng)設(shè)定是否具有KPI活性的判斷標(biāo)準(zhǔn)，神經(jīng)妥樂平制劑以吸光度差為0.1以上的制劑為規(guī)格，本發(fā)明干燥物也使用該標(biāo)準(zhǔn)。
實(shí)施例1測(cè)定根據(jù)上述參考例1制造的牛痘病毒接種家兔炎癥皮膚提取液的干燥固化物重量，調(diào)制1mg/mL、pH為9.5的受驗(yàn)提取液。稱量該受驗(yàn)提取液100mL，在約40℃的溫浸下，在減壓下進(jìn)行濃縮干燥。將水添加到干燥物中溶解，調(diào)成1mg/mL的受驗(yàn)溶液。將該受驗(yàn)溶液0.2mL和0.5M氯化鈉溶液0.2mL混合，下面，根據(jù)上述KPI活性測(cè)定法的試驗(yàn)操作實(shí)施測(cè)定試驗(yàn)。表1表示直接濃縮干燥了受驗(yàn)提取液的情況和濃縮干燥添加乳糖，調(diào)制乳糖含量為1重量％的受驗(yàn)提取液的情況的試驗(yàn)結(jié)果(n＝2)的一例。另外，對(duì)照物為水(下同)。
表1

上述試驗(yàn)系統(tǒng)是通過吸光度測(cè)定因產(chǎn)生的激肽釋放酶的酶活性而導(dǎo)致顯色性合成基質(zhì)游離出的p-硝基苯胺量的測(cè)量系統(tǒng)。在對(duì)照物中，也產(chǎn)生一定量的激肽釋放酶，可測(cè)定出如表1上段所述的吸光度，當(dāng)反應(yīng)系統(tǒng)中存在阻礙激肽釋放酶產(chǎn)生的受驗(yàn)物質(zhì)時(shí)，隨著激肽釋放酶產(chǎn)生的降低，測(cè)定的吸光度顯示出低值。即，與對(duì)照物的吸光度差大的一方顯示出受驗(yàn)物質(zhì)的KPI活性高。如表1所示，不添加乳糖而濃縮干燥的受驗(yàn)溶液的吸光度與對(duì)照物相比無變化，所以被認(rèn)為毫無KPI活性。相對(duì)于此，添加乳糖而濃縮干燥的受驗(yàn)溶液卻顯示出測(cè)定出明顯的KPI活性，所以通過添加乳糖可制造具有KPI活性的提取液的干燥物。
實(shí)施例2將與實(shí)施例1一樣將乳糖添加到受驗(yàn)提出液中濃縮干燥的情況與在受驗(yàn)提取液的濃縮干燥后添加乳糖的情況作比較。并將乳糖溶液作為空白溶液進(jìn)行測(cè)定。表2表示結(jié)果的一例。如表2所示，預(yù)先添加乳糖再濃縮干燥的受驗(yàn)溶液顯示出KPI活性，而在濃縮干燥受驗(yàn)提取液后添加了乳糖與僅含乳糖的溶液均沒有檢出任何KPI活性。
表2


實(shí)施例3與實(shí)施例1一樣將乳糖之外的添加劑添加到受驗(yàn)提取液中濃縮干燥的結(jié)果如表3所示。添加葡萄糖(單糖類)或茁酶多糖(多糖類)(均為1重量％)等糖類并干燥的干燥物顯出KPI活性，而使用磷酸氫鈣等糖類之外的賦形劑或不溶于水的多糖類的結(jié)晶纖維素或玉米淀粉的情況下沒有檢出KPI活性。
表3

實(shí)施例4使用上述實(shí)施例所述糖類之外的糖類并與實(shí)施例1一樣進(jìn)行的結(jié)果如表4所示(均添加受驗(yàn)提取液的1重量％)。而添加乳糖0.5重量％、0.1重量％的結(jié)果也示于該表中。表4綜合了多次試驗(yàn)結(jié)果(對(duì)照物的吸光度值0.306～0.363)，表示受驗(yàn)溶液的吸光度以及受驗(yàn)溶液與對(duì)照物的吸光度差(KPI活性)。
表4

實(shí)施例5與實(shí)施例1一樣測(cè)定提取液的干燥固化物重量，調(diào)制1mg/mL、pH為8.8～9.3的受驗(yàn)提取液。稱量該受驗(yàn)提取液10L，在進(jìn)行溫度調(diào)節(jié)以維持濃縮液溫度在約40℃下的同時(shí)，進(jìn)行減壓下濃縮。濃縮到200mL(50mg/mL)，向其中添加200g乳糖及其它賦形劑或崩解劑等約160g并混煉，造粒干燥。向如此得到的干燥顆粒中添加硬脂酸鎂等潤滑劑并壓縮成型，可制造片劑等，制成口服固體制劑。
分取計(jì)算含有提取液的干燥固化物重量50mg的量的上述干燥顆粒，添加50mL的三氨基甲烷鹽酸緩沖液(pH8.0)并攪拌混合。然后使用膜過濾器過濾，將濾液作為受驗(yàn)溶液與實(shí)施例1一樣測(cè)定KPI活性。而分取在上述添加乳糖等賦形劑之前的50mg/mL濃縮液，用水稀釋到1mg/mL濃度作為受驗(yàn)溶液也進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果的一例顯示于表5。如表5所示，該濃縮液及將乳糖等賦形劑添加到提取液的濃縮液中，經(jīng)混煉融合，造粒干燥而制造出的干燥顆粒均具有KPI活性。
表5


實(shí)施例6當(dāng)與實(shí)施例1一樣將乳糖添加到受驗(yàn)提取液中并濃縮干燥時(shí)，調(diào)整受驗(yàn)提取液至各種pH并進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果的一例如表6所示。當(dāng)受驗(yàn)提取液的pH為10.5時(shí)幾乎沒有KPI活性，隨著pH從9.5變化到酸性，干燥物的KPI活性慢慢降低。
表6

配方例1與實(shí)施例5所述方法一樣制造提取液的干燥顆粒，將其壓縮成型，制造片劑。即，將各成份混合，使每片片劑中接種牛痘病毒家兔炎癥皮膚提取液的干燥物為4mg、乳糖為104mg、結(jié)晶纖維素為40mg、羧甲基纖維素鈣為20mg的成份量，造粒干燥。將硬脂酸鎂(每片片劑中含量2mg)添加到該干燥顆粒中并混合，用打片機(jī)壓縮成型，制造片劑。
配方例2與配方例1一樣，制造每片片劑中含有接種牛痘病毒的家兔的炎癥皮膚提取液的干燥物5mg、乳糖80mg、磷酸氫鈣20mg、低取代羥丙基纖維素42mg、羥丙基纖維素2mg、硬脂酸鎂1mg的片劑。將涂敷液(羥丙基纖維素40g、10g的聚乙二醇6000、氧化鈦3g、滑石5g、色淀染料0.5g、凈水941.5g的混合物)噴涂在該胚片上，制造薄膜涂布片劑。
此外，本發(fā)明干燥物可經(jīng)適當(dāng)加工成散劑、顆粒、膠囊等口服固體制劑。
產(chǎn)業(yè)上的可利用性本發(fā)明提供一種接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液的具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生活性的干燥物，該干燥物可制成片劑等固體制劑。具有KPI活性的提取液的干燥物的制造方法，在制造將提取液作為有效成份的口服固體制劑中從根本上來說是最為重要的。本發(fā)明是可提供將提取液作為有效成份且具有KPI活性的口服固體制劑的劃時(shí)代發(fā)明，另一方面，本發(fā)明是在干燥固化提取液之前和規(guī)定條件下添加糖類并混合，再將其干燥的簡(jiǎn)便操作，便于實(shí)施。而且，因無需添加特殊添加劑、在經(jīng)濟(jì)面上也為極有用的方法。
權(quán)利要求
1.一種提取液干燥物制造方法，其特征在于，在將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液干燥時(shí)，在干燥固化所述提取液之前，添加糖類并混合，然后干燥該混合物。
2.一種提取液干燥物制造方法，所述干燥物具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的活性，其特征在于，在將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液干燥時(shí)，在干燥固化所述提取液之前，添加糖類并混合，然后干燥該混合物。
3.如權(quán)利要求1或2所述的干燥物制造方法，其特征在于，將糖類添加到接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液中并混合，然后濃縮干燥該混合物。
4.如權(quán)利要求1或2所述的干燥物制造方法，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加糖類并混合，然后干燥該混合物。
5.如權(quán)利要求3或4所述干燥物制造方法，其特征在于，所述提取液的濃縮干燥在pH為10以下的條件下進(jìn)行。
6.如權(quán)利要求3或4所述干燥物制造方法，其特征在于，所述提取液的濃縮干燥在pH為8.5～9.7的條件下進(jìn)行。
7.如權(quán)利要求1～6任一項(xiàng)所述的干燥物制造方法，其特征在于，所述糖類使用選自葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖、山梨糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、棉子糖、松三糖、茁霉多糖、糊精、β-糊精、葡聚糖的任一種或兩種以上。
8.一種干燥物，其特征在于，在將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液干燥時(shí)，在干燥固化所述提取液之前，添加糖類并混合，然后干燥該混合物而得到的提取液干燥物。
9.一種干燥物，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液干燥時(shí)，在干燥固化所述提取液之前，添加糖類并混合，干燥該混合物而得到的提取液干燥物，所述提取液干燥物具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的活性。
10.如權(quán)利要求8或9所述干燥物，其特征在于，將糖類添加到接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液中并混合，濃縮干燥所述混合物而得到。
11.如權(quán)利要求8或9所述干燥物，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加糖類并混合，然后干燥所述混合物而得到。
12.如權(quán)利要求10或11所述干燥物，其特征在于，所述提取液的濃縮干燥在pH為10以下的條件下進(jìn)行。
13.如權(quán)利要求10或11所述干燥物，其特征在于，所述提取液的濃縮干燥在pH為8.5～9.7的條件下進(jìn)行。
14.如權(quán)利要求8～13任一項(xiàng)所述干燥物，其特征在于，所述糖類使用選自葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖、山梨糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、棉子糖、松三糖、茁霉多糖、糊精、β-糊精、葡聚糖的任一種或兩種以上。
15.一種干燥顆粒，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混煉物造粒干燥而得到所述提取液的干燥顆粒。
16.一種干燥顆粒，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混合物造粒干燥得到干燥顆粒，所述提取液干燥顆粒具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的活性。
17.一種口服固體制劑，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混合物造粒干燥得到干燥顆粒，使用所述干燥顆粒制造所述口服固體制劑，所述口服固體制劑含有所述提取液作為有效成份。
18.一種口服固體制劑，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混合物造粒干燥得到干燥顆粒，使用所述干燥顆粒制造所述口服固體制劑，所述口服固體制劑含有所述提取液作為有效成份，并具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的活性。
19.如權(quán)利要求17或18所述的口服固體制劑，其特征在于，所述口服固體制劑為片劑。
20.一種口服固體制劑的制造方法，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混合物造粒干燥得到干燥顆粒，使用所述干燥顆粒制造含有所述提取液作為有效成份的口服固體制劑。
21.一種口服固體制劑的制造方法，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混合物造粒干燥，得到干燥顆粒，使用所述干燥顆粒制造含有所述提取液作為有效成份的口服固體制劑，所述口服固體制劑具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的活性。
22.一種干燥物，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混合物造粒干燥而得到。
23.一種干燥物，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混合物造粒干燥而得到，所得干燥物具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的活性。
24.一種干燥顆粒，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混煉物造粒干燥而得到干燥顆粒。
25.一種干燥顆粒，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混合物造粒干燥得到干燥顆粒，所述干燥顆粒具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的活性。
26.一種口服固體制劑，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混合物造粒干燥而得到干燥顆粒，由此制得的口服固體制劑含有所述提取液作為有效成份。
27.一種口服固體制劑，其特征在于，將接種了牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液濃縮，在干燥固化所述提取液之前，添加含有至少一種糖類的賦形劑并混煉，將該混合物造粒干燥，得到干燥顆粒，使用所述干燥顆粒制得口服固體制劑，所述口服固體制劑含有所述提取液作為有效成份，具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生的活性。
全文摘要
本發(fā)明的目的是提供接種牛痘病毒(vacciniavirus)的兔的炎癥皮膚提取液的具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生活性的干燥物及其制造方法。本發(fā)明涉及一種提取液的干燥物的制造方法，其特征在于，為了制造將接種牛痘病毒的兔的炎癥皮膚提取液作為有效成分的固體制劑而進(jìn)行干燥時(shí)，在干燥固化之前，添加糖類并混合，干燥該混合物。通過本制造方法可得到提取液的具有阻礙類激肽釋放酶物質(zhì)產(chǎn)生活性的干燥物，而且使用該干燥物可制造片劑等口服固體制劑。
文檔編號(hào)A61K35/36GK1706398SQ20051007674
公開日2005年12月14日 申請(qǐng)日期2005年6月10日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月1日
發(fā)明者黑橋正晴, 芝山洋二 申請(qǐng)人:日本臟器制藥株式會(huì)社