專利名稱：具有穩(wěn)定區(qū)域的glp-1受體激動劑化合物的制作方法
具有穩(wěn)定區(qū)域的GLP-1受體激動劑化合物相關申請
本申請要求2010年7月28日提交的美國申請?zhí)?1/368，522的優(yōu)先權，其公開內容通過引用結合到本文中。領域
本公開內容涉及具有穩(wěn)定區(qū)域的胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1)受體激動劑化合物、含有GLP-1受體激動劑化合物的藥物組合物、使用GLP-1受體激動劑化合物的治療性治療和用于制備GLP-1受體激動劑化合物的方法。背景
肽和蛋白質在生物過程的調節(jié)中起關鍵性作用。例如肽作為激素和抑制劑起調節(jié)作用，并且還參與免疫識別。肽的重大生物作用使其在了解肽與其所結合的受體的相互作用時是重要的。肽的受體結合構象的確定對于肽類似物的合理設計而言極為重要。因為肽是高柔性分子，其結構受到其存在的環(huán)境的強烈影響，肽本身一般不可用于測定其受體結合構象。因此，必需以系統(tǒng)方式進行結構功能研究，以提供有關肽中對生物活性是重要的特定氨基酸殘基和官能團的信息。這種性質的研究可利用構象上受約束的肽模擬物。例如Hruby，Trends Pharmacol.Sc1., 8:336-339 (1987)提出構象約束可提供有關受體對作為激動劑或拮抗劑的配體具有不同要求的信息。肽模擬物(Peptide mimetics)或模擬肽(peptidomimetics)是在與受體和酶的相互作用中用作肽和/或氨基酸的合適替代物的結構。發(fā)現(xiàn)肽模擬物的合理方法的研發(fā)是藥物化學的一個主要目標。已通過經(jīng)驗篩選方法和特定合成設計兩者嘗試這類研發(fā)。肽模擬物的具體設計利用肽骨架修飾、肽二級結構的化學模擬和對肽母體的共價約束以利于這
類肽二級結構。α螺旋將其殘基的側鏈沿棒狀螺旋結構呈現(xiàn)。約3.6個氨基酸殘基構成α _螺旋的單個轉角。因此，空間上相鄰的側鏈形成α-螺旋的一“側”，其中每3-4個殘基出現(xiàn)的殘基沿著線性氨基酸序列。照本領域的慣例，這種間距可稱為“i，i+3/i+4，i+7”等以表示偏移殘基“i”的殘基側鏈以空間上鄰近的方式大致位于沿α螺旋一側。在α螺旋的情況下，術語“面”與術語“側”同義。認為1、i+3/i+4和i+7殘基可與靶蛋白發(fā)生關鍵性接觸，且這種接觸構成大部分結合能。Fairlie等Med.Chem.,5:29 (1998)。α -螺旋構象通過沿骨架的空間相互作用以及骨架酰胺羰基和各氨基酸的NH基團之間的氫鍵相互作用而穩(wěn)定。α螺旋的側鏈以眾所周知的距離和角關系突出出來。Jain等，#o7.Divers.,8:89-100 (2004)。通過將合成模板引入肽類(p^tidic)、通過使用β -發(fā)夾模擬物、通過使用β -肽序列和通過使用具有無關聯(lián)折疊傾向的非天然寡聚體，實現(xiàn)了具有穩(wěn)定α-螺旋構象的模擬肽的合成。能夠模擬約束肽表面的合成小分子提供穩(wěn)定性改進、分子量較低和在某些情況下生物利用度較好的 優(yōu)勢。在本領域中，已良好記載了采用各種定義明確的二級結構的合成小分子。本領域已知各種提高肽的α螺旋形成傾向的策略。示例性方法包括側鏈約束、加帽(capping)和非天然氨基酸取代。α螺旋的另一類約束利用閉環(huán)置換(ring closing metathesis,RCM)反應以形成摻入雙鍵(例如亞鏈烯基(alkenylenyl)橋)或無雙鍵(例如亞鏈烷基(alkylenyl)橋)的側鏈-側鏈橋。烯烴置換反應的發(fā)現(xiàn)提供了用于在溫和條件下合成和裂解碳-碳鍵的便利途徑。具體地說，利用受釕絡合物催化的RCM反應已成為用于有機合成中形成亞鏈烯基橋接結構的普遍方法。對帶有不飽和側鏈(例如烯丙基甘氨酸、高烯丙基甘氨酸等)并位于肽基序的戰(zhàn)略位置的氨基酸應用這種方法，可供通過固相肽合成(SPPS)方法制備環(huán)肽。本領域需要新的GLP-1受體激動劑化合物，其具有良好的穩(wěn)定性、對降解的抗性、良好的胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1)受體結合活性和體內葡萄糖降低活性并且可用于治療糖尿病和減輕體重。為了滿足這些需要，本文的公開內容尤其提供具有穩(wěn)定α-螺旋區(qū)的GLP-1受體激動劑化合物。概述
按照螺旋-卷曲轉變理論，蛋白質中全部氨基酸殘基的40%呈α -螺旋構象，預期由10個或更少氨基酸組成的α-螺旋因低的成核幾率而基本上是不穩(wěn)定的。在GLP-1受體激動劑的情況下，例如毒蜥外泌肽-4 (exendin-4)和GLP-1 (7-37)，α -螺旋代表重要的序列選擇性識別基序。毒蜥外泌肽-4中的α -螺旋受體結合區(qū)通常位于9-30位，而GLP-1 (7-37)中的α-螺旋受體結合區(qū)位于15-37位(包括15和37在內)。毒蜥外泌肽-4和GLP-1 (7-37)的螺旋特征擴展約20個氨基酸。本公開內容提供具有α -螺旋模擬物或可保持體外和體內活性的α -螺旋穩(wěn)定性的GLP-1受體激動劑化合物，例如毒蜥外泌肽_4。這就為可參與分子識別事件并可用于開發(fā)較小的具有優(yōu)異代謝穩(wěn)定性且性能提高的GLP-1受體激動劑化合物的關鍵側鏈殘基提供了更好的了解，使得它們 可用于口服制劑。這還提供了可用于治療許多疾病和病癥的新的GLP-1受體激動劑化合物。本公開內容提供含苯甲酰胺的肽化合物，所述化合物包含與式(I)具有至少50%序列同一性的氨基酸序列:
Xaas-Xaa2-Xaa3-GTfTSDLSKQ-Xaal4-EEEAVRLfIE-Xaa2rLKM-Z (I),
其中式(I)具有至少一個模擬一個或多個生理氨基酸側鏈的苯甲酰胺部分；且其中Xaa1'Xaa2、Xaa3、Xaa14、Xaa25和Z如本文定義。在一個實施方案中，含苯甲酰胺的肽化合物具有與式(I)有至少80%、至少90%或至少95%序列同一性的氨基酸序列。本公開內容提供包含這些含苯甲酰胺的化合物的藥物組合物。本公開內容提供使用含苯甲酰胺的化合物和含有所述化合物的藥物組合物治療多種疾病(例如糖尿病)的方法。本公開內容提供受約束的烯烴肽化合物，其包含與式(IV)有至少50%序列同一性的氨基酸序列:
XaarXaa2-Xaa3-GTFrSDLSKQ-Xia14-EEEAVRLFlE-Xaa25-LKN-Z (IV)
其中肽化合物中的至少一對氨基酸殘基通過亞鏈烯基橋或亞鏈燒基(alkylenyl)橋連接；且其中乂8&1、乂&&2、乂&&3、乂&&14、乂8&25和Z如本文定義。在一個實施方案中，受約束的烯烴肽化合物具有與式(IV)有至少80%、至少90%或至少95%序列同一性的氨基酸序列。本公開內容提供包含這些受約束的烯烴化合物的藥物組合物。本公開內容提供使用受約束的烯烴化合物和含有所述化合物的藥物組合物治療多種疾病(例如糖尿病)的方法。本公開內容提供用于本文所述含苯甲酰胺的肽化合物的固相合成的方法。使具有游離胺的樹脂結合試劑(resin-bound reagent)與具有側鏈替代部分的取代苯基、游離羧酸和硝基部分，反應從而形成樹脂結合的取代苯甲酰胺基(benzamidyl)。將硝基部分還原以形成游離胺，從而形成具有游離胺的樹脂結合的取代苯甲酰胺基，所述游離胺因此可用于額外的固相反應。附圖簡述
為了附圖及其所表示的實施例的目的，化合物(Cmpd) Tl為
HaijGTFTSDLSKQLEEEAVRLFlEFLKN-NH2 ;其中 2 位的小寫 “a” 為 dAla ;化合物 T2 為HGEGTrrSDLSKQLEEIAVRLFIEFLKN-NH2。在整個說明書中，由單字母氨基酸縮寫詞表示的序列中小寫“a”為dAla。

圖1表示對于本文所述的某些含苯甲酰胺的化合物，作為治療前水平百分比的血糖濃度的時程。治療前 葡萄糖濃度為123 mg/dL。各點表示平均值土 s.d.(標準差。緊隨基線樣品后，在t=0時給2小時禁食的NIH/Swiss小鼠IP注射化合物(100 nmol/kg)。在t=30、60、120、180和240分鐘時采集樣品。按照生產商的說明書，使用One Touch Ultra (LifeScan, Inc., Milpitas, CA)測量血糖。圖例:溶媒(實心方框)；化合物12 (空心菱形)；化合物14 (尖向下的實心三角形)；化合物13 (尖向上的實心三角形)；化合物T2(空心三角形)；化合物Tl (交叉線)。圖2表示對于本文所述的某些含亞鏈烯基的化合物，作為治療前水平百分比的血糖濃度的時程。實驗條件與圖1所述實驗條件相同。圖例:溶媒(實心方框)；化合物22(空心菱形)；化合物27 (尖向下的實心三角形)；化合物34 (尖向上的實心三角形)；化合物T2 (空心三角形)；化合物Tl (交叉線)。圖3表示化合物Tl的側鏈和化合物13的側鏈替代部分之間可利用的重疊的分子
建模研究結果。圖4表示化合物Tl的側鏈與化合物27和化合物34的側鏈替代部分之間可利用的重疊的分子建模研究結果。發(fā)明詳述
本文所用縮寫詞具有其在化學和生物領域內的常規(guī)含義。本文所示化學結構和化學式按照化學領域已知化學價的標準規(guī)則建立。如果常規(guī)含義和本文所述定義間存在差異，則以本文定義為準。如果取代基用其常規(guī)化學式指定，自左向右書寫，則它同樣包括自右向左書寫結構得到的化學上相同的取代基，例如-CH2O-等同于-0CH2-。術語“烴基(alkyl) ”獨自或作為另一取代基的部分，意指直鏈(即不分支的)或支鏈或其組合，其可以是完全飽和的、單不飽和的或多不飽和的，可包括具有規(guī)定碳原子數(shù)(即(；-(:1(|意指1、2、3、4、5、6、7、8、9和10個碳)的二價和多價基團。飽和烴基(saturatedhydrocarbon radicals)的實例包括但不限于以下基團:例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、仲丁基、(環(huán)己基)甲基、例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等的同系物和異構體。不飽和烴基(unsaturated alkyl group)是具有一個或多個雙鍵(即“烯基”)或三鍵(即“炔基”)的烴基。不飽和烴基(unsaturated alkyl group)的實例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、巴豆基、2-異戊烯基、2-( 丁二烯基)、2，4-戊二烯基、3-(1，4-戊二烯基)、乙炔基、1-丙炔基和3-丙炔基、3- 丁炔基和高級同系物和異構體。烴氧基(alkoxy)是通過氧連接基(-0-)與分子的其余部分連接的烴基。烴基硫基(alkylthio)是通過硫連接基(-S-)與分子的其余部分連接的烴基。術語“亞烷基(alkylene)”和“亞鏈烷基(alkylenyl) ”單獨或作為另一取代基的部分，意指衍生自烷基的二價基團，例如但不限于-CH2CH2CH2CH2-O通常，烷基(或亞烷基)可具有1-24個碳原子，優(yōu)選10個或更少碳原子，更優(yōu)選4個或更少碳原子?！暗图壨榛被颉暗图墎喭榛笔禽^短鏈的烷基或亞烷基，一般具有8個或更少碳原子。術語“亞烯基(alkenylene) ”和“亞鏈烯基(alkenylenyl) ”單獨或作為另一取代基的部分,意指衍生自烯烴的二價基團。術語“雜烴基(heteroalkyl) ”獨自或與另一術語組合意指穩(wěn)定的直鏈或支鏈或其組合，由至少一個碳原子和至少一個選自O、N、P、Si和S的雜原子組成，其中氮和硫原子可任選被氧化，且氮雜原子可任選被季銨化。雜原子O、N、P、S和Si可位于雜烴基的任一內部位置或位于烴基與分子的其余部分連接的位置。實例包括但不限于:-ch2-ch2-o-ch3、-ch2-CH2-NH-CH3、-CH2-CH2-N (CH3) -CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-CH2、-S (O) -CH3、-CH2-CH2-S (O) 2_CH3、_CH=CH-O-CH3、-S i (CH3) 3、-CH2-CH=N-OCH3、-CH=CH-N (CH3) -CH3、-O-CH3、-O-CH2-CH3 和-CN。最多兩個雜原子可以是連續(xù)的，例如-CH2-NH-OCH3。術語“雜亞烴基(heteroalkylene) ”和“雜亞鏈烴基(heteroalkylenyl) ”單獨或作為另一取代基的部分，意指衍生自雜烴基的二價基團，例如但不限于-CH2-CH2-S-CH2-CH2-和-CH2-S-CH2-CH2-NH-CH2-。對于雜亞烴基，雜原子還可占據(jù)鏈末端的任一端或兩端(例如亞烴基氧基、亞烴基二氧基、亞烴基氨基、亞烴基二氨基等)。更進一步，對于亞烴基和雜亞烴基連接基團，連接基團式中書寫的方向并不意味著連接基團的方向。例如，式-c(o)2r’-表示-C(0)2R’ -和-R’ C(O)2-兩者。如上所述，本文所用雜烴基，包括通過雜原子與分子的其余部分連接的基團，例如-C (0) R’、-C (0) NR，、-NR，R’ ’、-0R，、-SR’和/或-SO2R'。當敘述“雜烴基”，接著列舉特定的雜烴基時，例如-NR’ R’ ’等，要理解術語雜烴基和-NR’ R’ ’并不多余或相互排斥。更確切地說，列舉特定的雜烴基以增加明確性。因此，術語“雜烴基”在本文不應解釋為排除特定的雜烴基，例如-NR’ R’ ’等。術語“環(huán)經(jīng)基(cycloalkyl) ”和“雜環(huán)經(jīng)基(heterocycloalkyl) ”獨自或與其它術語組合分別意指“烴基”和“雜烴基”的環(huán)狀形式。此外，對于雜環(huán)烴基，雜原子可占據(jù)雜環(huán)與分子的其余部分連接的位置。環(huán)烴基的實例包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、1-環(huán)己烯基、3-環(huán)己烯基、環(huán)庚基等。雜環(huán)烴基的實例包括但不限于1-(1, 2，5，6-四氫吡啶基)、1_哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-嗎啉基、3-嗎啉基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃-3-基、四氫噻吩-2-基、四氫噻吩-3-基、1-哌嗪基、2-哌嗪基等?！碍h(huán)亞烴基(cycloalkylene) ”或“環(huán)亞鏈烴基(cycloalkylenyl) ”和“雜環(huán)亞烴基(heterocycloalkyIene) ”或“雜環(huán)亞鏈經(jīng)基(heterocycloalkylenyl) ”單獨或作為另一取代基的部分，意指分別衍生自環(huán)烴基和雜環(huán)烴基的二價基團。術語“齒代”或“齒素”獨自或作為另一取代基的部分，意指氟、氯、溴或碘原子。此夕卜，術語例如“鹵代烴基”意指包括一 鹵代烴基和多鹵代烴基。例如，術語“鹵代(C1-C4)烴基”包括但不限于氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、4-氯丁基、3-溴丙基等。術語“?；币庵?C(O)R,其中R為取代或未取代的烴基、取代或未取代的環(huán)烴基、取代或未取代的雜烴基、取代或未取代的雜環(huán)烴基、取代或未取代的芳基或者取代或未取代的雜芳基。術語“芳基”意指多不飽和的芳族烴取代基(hydrocarbon substituent),其可為單環(huán)或稠合在一起(即稠合環(huán)芳基)或共價連接的多環(huán)(優(yōu)選1-3個環(huán))。稠環(huán)芳基是指稠合在一起的多環(huán)，其中稠環(huán)的至少一個為芳環(huán)。術語“雜芳基”是指含有1-4個選自N、0和S的雜原子的芳基(或環(huán))，其中氮和硫原子任選被氧化，氮原子任選被季銨化。因此，術語“雜芳基”包括稠環(huán)雜芳基(即稠合在一起的多環(huán)，其中稠環(huán)的至少一個為雜芳環(huán))。5，6-稠環(huán)雜亞芳基是指稠合在一起的兩個環(huán)，其中一個環(huán)具有5元，另一環(huán)具有6元，且其中至少一個環(huán)是雜芳環(huán)。同樣地，6，6-稠環(huán)雜亞芳基是指稠合在一起的兩個環(huán)，其中一個環(huán)具有6元，另一個環(huán)具有6元，且其中至少一個環(huán)是雜芳環(huán)。6，5-稠環(huán)雜亞芳基是指稠合在一起的兩個環(huán)，其中一個環(huán)具有6元，另一個環(huán)具有5元，且其中至少一個環(huán)是雜芳環(huán)。雜芳基可通過碳或雜原子與分子的其余部分連接。芳基和雜芳基的非限制性實例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-聯(lián)苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-噁唑基、4-噁唑基、2-苯基-4-噁唑基、5-噁唑基、3-異噁唑基、4-異噁唑基、5-異噁唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯并噻唑基、嘌呤基、2-苯并咪唑基、5-吲哚基、1-異喹啉基、5-異喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔啉基、3-喹啉基和6-喹琳基。以上提到的芳基和雜芳基環(huán)體系每一個的取代基選自下述可接受:的取代基?！皝喎蓟焙汀半s亞芳基”單獨或作為另一取代基的部分，意指分別衍生自芳基和雜芳基的二價基團。術語“芳基”當與其它術語組合時(例如芳氧基、芳基硫氧基(arylthioxy)、芳基烴基(arylalkyl))包括上述 定義的芳環(huán)和雜芳環(huán)兩者。因此，術語“芳基烴基”意指包括其中芳基與烴基連接的那些基團(例如芐基、苯乙基、吡啶基甲基等)，所述烴基包括其中碳原子(例如亞甲基)被例如氧原子置換的那些烴基(例如苯氧基甲基、2-吡啶基氧基甲基、3-(1-萘氧基)丙基等)。術語“氧代”意指與碳原子雙鍵合的氧。術語“烴基磺?；币庵妇哂惺?S (O2)-R'的部分，其中R’為上述定義的烴基。R’可具有規(guī)定數(shù)目的碳(例如Y1-C4烴基磺?；?。上述術語(例如“烴基”、“雜烴基”、“芳基”和“雜芳基”)的每一個包括指定基團的取代和未取代形式兩種。下文提供每種基團類型的優(yōu)選取代基。烴基和雜烴基(包括通常稱為亞烴基、烯基、雜亞烴基、雜烯基、炔基、環(huán)烴基、雜環(huán)烴基、環(huán)烯基和雜環(huán)烯基)的取代基可為選自以下的各組中的一個或多個，但不限于:-0R’、=0、=NR’、=N-OR,、-NR’ R’ ’、-SR’、-鹵素、-SiR’ R’ ’ R’ ’ ’、-OC (0) R’、-C (0) R’、
-CO2R'、-CONR' R’ ’、-OC (0) NR’ R’ ’、-NR’ ’ C (0) R’、-NR’ -C (0) NR’ ’ R’ ’ ’、-NR’ ’ C (0) 2R’、-NR-C (NR，R，，R，，，)=NR，…、-NR-C (NR，R，’) =NR，，，、-S (0) R，、-S (0) 2R，、-S (0) 2NR，R，’、-NRS02R’、-CN和-NO2，取代基數(shù)的范圍為0至^!!!^^其中!!!’是這類基團中碳原子的總數(shù)。R’、R’ ’、R’ ’ ’和R’ ’ ’ ’各自優(yōu)選獨立地指氫、取代或未取代的雜烴基、取代或未取代的環(huán)烴基、取代或未取代的雜環(huán)烴基、取代或未取代的芳基(例如被1-3個鹵素取代的芳基)、取代或未取代的烴基、烴氧基(alkoxy)或硫代烴氧基(thioalkoxy)或芳基烴基(arylalkyl)。當本發(fā)明的化合物包括多于一個R基團時，例如，當存在多于一個的這些基團時，則各R基團獨立選自各1 ’、1 ’’、1 ’’’和R’’’’基團。當R’和R’’與同一氮原子連接時，它們與氮原子結合在一起形成4元、5元、6元或7元環(huán)。例如，-NR’ R’ ’包括但不限于1_批咯烴基和4-嗎啉基。根據(jù)取代基的以上論述，技術人員應了解術語“烴基”意包括這樣的基團，其包括與氫基團以外的基團結合的碳原子，例如鹵代烴基(例如-CF3和-CH2CF3)和?；?例如-C (O) CH3、-C (O) CF3、-C (O) CH2OCH3 等)。與對于烴基所述的取代基類似，芳基和雜芳基的取代基是多樣的，選自例如:-0R’、-NR’ R’ ’、-SR’、-鹵素、-SiR’ R’ ’ R’ ’ ’、-OC (0) R’、-C (0) R’、-CO2R,、-CONR' R’ ’、 -OC (0) NR’ R’ ’、-NR’ ’ C (0) R’、-NR’ -C (0) NR’ ’ R’ ’ ’、-NR’ ’ C (0) 2R’、-NR-C (NR’ R’ ’ R’ ’ ’)=NR’ ’ ’ ’ ,-NR-C(NR，R，’) =NR’，，、_S(0) R，、-S (0)2R，、-S (0)2NR’ R，’、-NRSO2R,、-CN、_N02、-R，、-N3、-CH(Ph)2、氟(C1-C4)烴氧基和氟(C1-C4)烴基，取代基數(shù)的范圍為0至芳族環(huán)體系開放化合價的總數(shù)；且其中R’、R’ ’、R’ ’ ’和R’ ’ ’ ’優(yōu)選獨立選自氫、取代或未取代的烴基、取代或未取代的雜烴基、取代或未取代的環(huán)烴基、取代或未取代的雜環(huán)烴基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的雜芳基。當本發(fā)明的化合物包括多于一個R基團時，例如，當存在多于一個的這些基團時，各R基團獨立選自各R’、R’’、R’’’和R’’’’基團。兩個或更多個取代基可任選連接形成芳基、雜芳基、環(huán)烴基或雜環(huán)烴基。這類所謂的成環(huán)取代基雖然不是必需的，但通常發(fā)現(xiàn)與環(huán)狀基礎結構連接。在一個實施方案中，成環(huán)取代基與基礎結構的相鄰成員連接。例如，與環(huán)狀基礎結構相鄰成員連接的兩個成環(huán)取代基產生稠環(huán)結構。在另一個實施方案中，成環(huán)取代基與基礎結構的單一成員連接。例如，與環(huán)狀基礎結構的單一成員連接的兩個成環(huán)取代基產生螺環(huán)結構。在又一個實施方案中，成環(huán)取代基與基礎結構的非相鄰成員連接。芳環(huán)或雜芳環(huán)的相鄰原子上的兩個取代基可任選形成式-T-C(0)-(CRR’)q-U-的環(huán)，其中T和U獨立地為-NR-、-O-、-CRR’ -或單鍵，q為0_3的整數(shù)。或者，芳環(huán)或雜芳環(huán)的相鄰原子上的兩個取代基可被式-A-(CH2)^B-的取代基任選置換，其中A和B獨立地為-CRR’ -、-O-、-NR-、-S-、-S (O) -、-S (O) 2_、-S (O) 2NR’ -或單鍵，r 為 1-4 的整數(shù)。如此形成的新環(huán)的單鍵之一可任選被雙鍵置換?；蛘?，芳環(huán)或雜芳環(huán)的相鄰原子上的兩個取代基可任選被式-(CRR’) S_X’ - (C’ ’ R’ ’ ’)d-的取代基置換，其中s和d獨立地為0-3的整數(shù)，X’為-O
-、-NR’ -、-S-、-S (O) -、-S (O) 2-或-S (O) 2NR’ -。取代基 R、R’、R’ ’ 和 R’ ’ ’ 優(yōu)選獨立選自氫、取代或未取代的烴基、取代或未取代的環(huán)烴基、取代或未取代的雜環(huán)烴基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的雜芳基。術語“雜原子”或“環(huán)雜原子”意指氧(O)、氮(N)、硫⑶、磷⑵和硅(Si)?！叭〈币庵高x自以下部分的基團:
(A)-OH、-NH2, -SH、-CN、-CF3> -NO2、氧代、鹵素、未取代的烴基、未取代的雜烴基、未取代的環(huán)烴基、未取代的雜環(huán)烴基、未取代的芳基、未取代的雜芳基，和
(B)被選自以下的至少一個取代基取代的烴基、雜烴基、環(huán)烴基、雜環(huán)烴基、芳基和雜芳基:
(i)氧代、-OH、-NH2, -SH、-CN、-CF3> -NO2,鹵素、未取代的烴基、未取代的雜烴基、未取代的環(huán)烴基、未取代的雜環(huán)烴基、未取代的芳基、未取代的雜芳基，和
( )被選自以下的至少一個取代基取代的烴基、雜烴基、環(huán)烴基、雜環(huán)烴基、芳基和雜
芳基:
(a)氧代、-OH、-NH2,-SH、-CN、-CF3, -NO2,鹵素、未取代的烴基、未取代的雜烴基、未取代的環(huán)烴基、未取代的雜環(huán)烴基、未取代的芳基、未取代的雜芳基，和
(b)被選自以下至少一個取代基取代的烴基、雜烴基、環(huán)烴基、雜環(huán)烴基、芳基或雜芳基:氧代、-oh、-nh2、-sh、-cn、-cf3、-no2、鹵素、未取代的烴基、未取代的雜烴基、未取代的環(huán)烴基、未取代的雜環(huán)烴基、未取代的芳基和未取代的雜芳基。術語“藥學上可接受的鹽”意指包括根據(jù)本文所述化合物中存在的具體取代基，用相對無毒的酸或堿制備的活性化合物的鹽。如果本發(fā)明的化合物含有相對酸性的官能團，則可不摻溶劑(neat)或在合適的惰性溶劑中，通過使這類化合物的中性形式與足量的所需堿接觸，而獲得堿加成鹽。藥學上可接受的堿加成鹽的實例包括鈉、鉀、鈣、銨、有機氨基或鎂鹽或類似的鹽。如果本發(fā)明的化合物含有相對堿性的官能團，則可不摻溶劑或在合適的惰性溶劑中，使這類化合物的中性形式與足量的所需酸接觸，來獲得酸加成鹽。藥學上可接受的酸加成鹽的實例包括來源于無機酸的酸加成鹽，無機酸如鹽酸、氫溴酸、硝酸、碳酸、一氫碳酸、磷酸、一氫磷酸、二氫磷酸、硫酸、一氫硫酸、氫碘酸或亞磷酸等，以及來源于相對無毒的有機酸的鹽，有機酸如乙酸、丙酸、異丁酸、馬來酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富馬酸、乳酸、扁桃酸、鄰苯二甲酸、苯磺酸、對甲苯基磺酸、檸檬酸、酒石酸、草酸、甲磺酸等。還包括氨基酸的鹽(例如精 氨酸鹽等)和有機酸(諸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸(galactunoric acid))的鹽等。本發(fā)明的某些具體化合物含有允許化合物轉化成堿加成鹽或酸加成鹽的堿性官能團和酸性官能團兩者。本文所述化合物可作為鹽(例如與藥學上可接受的酸)存在。本發(fā)明包括這類鹽。這類鹽的實例包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、甲磺酸鹽、硝酸鹽、馬來酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽(例如(+)_酒石酸鹽、(-)_酒石酸鹽或其混合物包括外消旋混合物)、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽，以及與氨基酸(例如谷氨酸)的鹽。這些鹽可通過本領域技術人員已知方法制備。通過使鹽與堿或酸接觸，按常規(guī)方法分離母體化合物，優(yōu)選使化合物的中性形式再生。在某些物理性質(例如極性溶劑的溶解度)方面，化合物的母體形式不同于各種鹽形式。除鹽形式以外，本發(fā)明還提供呈前藥形式的化合物。本文所述化合物的前藥為在生理條件下容易進行化學變化以提供本發(fā)明化合物的那些化合物。此外，前藥可在離體環(huán)境中通過化學或生物化學方法轉化成本發(fā)明的化合物。例如，當置于具有合適的酶或化學試劑的透皮貼劑庫中時，前藥可慢慢轉化成本發(fā)明的化合物。本發(fā)明的某些化合物可以非溶劑化形式以及溶劑化形式存在，包括水合形式?？偟膩碚f，溶劑化形式與非溶劑化形式等效，并包括在本發(fā)明的范圍內。本發(fā)明的某些化合物可以多晶或無定形形式存在?？偟膩碚f，所有的物理形式對于本發(fā)明的預期用途是等效的，且旨在落入本發(fā)明的范圍。本發(fā)明的某些化合物具有不對稱碳原子(光學中心)或雙鍵；外消旋體、非對映體、互變異構體、幾何異構體和各個異構體均包括在本發(fā)明的范圍內。
本發(fā)明的化合物還可在構成這類化合物的一個或多個原子處含有原子同位素的非天然部分。例如，化合物可用放射性同位素標記，例如氚(3H)、碘-125 (125I)或碳-14(14C)。本發(fā)明化合物的所有同位素變體，不論放射性與否，都包括在本發(fā)明的范圍內。符號“一 ”表示化學部分與分子式或化學式的其余部分的連接點。在肽的情況下，本文所用“類似物”是指相對于母體化合物具有氨基酸插入、缺失和/或取代的化合物。類似物可具有優(yōu)良的穩(wěn)定性、溶解度、功效、半衰期等。在一些實施方案中，類似物是與母體化合物具有以下序列同一性的化合物:至少50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%。在一個實施方案中，母體化合物為毒蜥外泌肽_4?！把苌铩倍x為具有母體或其類似物的氨基酸序列、但其氨基酸側基、α -碳原子、末端氨基或末端羧酸基團的一個或多個還具有化學修飾的分子?；瘜W修飾包括但不限于添加化學部分、產生新的化學鍵和脫去化學部分。氨基酸側基上的修飾包括而不限于賴氨酸ε -氨基的?；?；精氨酸、組氨酸或賴氨酸的N-烷基化(alkylation);谷氨酸或天冬氨酸羧酸基團的烷基化和谷氨酰胺或天冬酰胺的脫酰氨基化。末端氨基的修飾包括而不限于脫氨基、N-低級烴基、N- 二-低級烴基、受約束的烴基(例如支鏈、環(huán)狀、稠合、金剛烷基(adamantyl))和N-?；揎?。末端羧基的修飾包括而不限于酰胺、低級烴基酰胺、受約束的烴基(例如支鏈、環(huán)狀、稠合、金剛烷基)、烴基、二烴基酰胺和低級烴基酯修飾。此外，一個或多個側基或端基可用具有普通技術的合成化學師已知的保護基保護。氨基酸的α-碳可被一甲基化的或二甲基化。激動劑和類似物的衍生物也包括在所提供的方法內，其中一個或多個特定位點上的各氨基酸的立體化學結構可從(L)/S反轉成(D)/R。所提供的方法還包括通過Asn、Ser和/或Thr殘基的糖基化進行修飾的激動劑和類似物。 在比較兩個或更多個核酸或肽序列的情況下，術語“同一性”、“序列同一性”等是指是相同的兩個或更多個 序列或亞序列，或者具有相同特定百分比的氨基酸殘基或核苷酸的兩個或更多個序列或亞序列(即在比較窗或指定區(qū)內比較和比對最大一致性時，在規(guī)定區(qū)域內約 50% 同一,性，優(yōu)選 50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%)，如采用本領域已知序列比較算法測量的，例如BLAST或BLAST
2.0。該定義包括具有缺失和/或添加的序列，以及具有取代的序列，以及天然存在的序列，例如多態(tài)變體或等位基因變體及人工變體。在優(yōu)選的算法中，按照本領域已知方法計算出空位等。對于序列比較，通常一個序列用作參比序列，將試驗序列與之進行比較。當采用序列比較算法，將試驗序列和參比序列鍵入計算機，必要時指定亞序列坐標(subsequencecoordinate)，并指定序列算法程序參數(shù)。優(yōu)選可使用默認程序參數(shù)，或者可指定備選參數(shù)。然后根據(jù)程序參數(shù)，序列比較算法計算出試驗序列相對于參比序列的百分比序列同一'I"生?？蛇M行序列的最佳比對用于比較，例如通過局部同源性算法(Smith和Waterman,Adv.App 1.Math., 2:482 (1981));通過同源性比對算法(Needleman 和 Wunsch, J.Mol.Biol., 48:443 (1970));通過相似性搜索方法(Pearson 和 Lipman, Proc.Nat，1.Acad.Sc1., USA 85:2444 (1988));通過這些算法(GAP、BESTFIT、FASTA 和 TFASTA，載于 Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 ScienceDr., Madison, Wis.)的計算機執(zhí)行,或者通過手動比對和目視檢查。參見例如CurrentProtocols in Molecular Biology (Ausubel 等編輯，1995 增刊))。適于測定百分比序列同一性和序列相似性的算法的優(yōu)選實例包括BLAST和BLAST 2.0算法，該算法描述于Altschul 等Acids Res., 25:3389-3402 (1977)和 Altschul 等，J.Mol.Biol.215:403-410 (1990)。采用本領域已知的BLAST和BLAST 2.0來測定本發(fā)明的核酸和蛋白質的百分比序列同一性。用于進行BLAST分析的軟件是可公開獲自國家生物技術信息中心(National Center for Biotechnology Information)網(wǎng)站。該算法包括先通過鑒定查詢序列中長度W的短字碼來鑒定高評分序列對(high scoring sequence pair, HSP),當與數(shù)據(jù)庫序列中的相同長度字碼比對時，所述查詢序列符合或滿足某一正值的閾值分數(shù)T。T稱為鄰域字碼分數(shù)閾值(neighborhood word score threshold) (Altschul 等，同上)。這些初始鄰域字碼命中(word hits)用作開始檢索以查找包含它們的較長HSP的種子。字碼命中然后沿各個序列的兩個方向延伸，直到可以增加累積比對分數(shù)為止。例如對于核苷酸序列，累積分數(shù)采用參數(shù)M (匹配殘基對的獎勵分數(shù)；總是〉O)和N (錯配殘基的處罰分數(shù)；總是〈O)計算。對于氨基酸序列，采用評分矩陣計算累積分數(shù)。各方向上字碼命中的延伸在以下情況下終止:累積比對分數(shù)從其獲得的最大值下降量X ;累積分數(shù)由于一個或多個負得分殘基比對的累積而導致變成零或以下；或者達到任一序列的末端。BLAST算法參數(shù)W、T和X決定比對的靈敏度和速度。BLASTN程序(對于核苷酸序列)將字長(W) 11、期望(E) 10、M=5、N=-4和兩條鏈的比較用作默認。對于氨基酸序列，BLASTP程序將字長3、期望(E) 10 和 BL0SUM62 評分矩陣(參見 Henikoff 和 Henikoff，/￥oc.Natl.Acad.Sc1.USA89:10915 (1989))比對(B) 50、期望(E) 10、M=5、N=_4和兩條鏈比較用作默認。為了測定2個氨基酸序列或2個核酸的百分比同一性或相似性，出于最佳比較目的對序列進行比對(例如可將空位引入第一氨基酸或核酸序列的序列中，用于與第二氨基酸或核酸序列進行最佳比對)。然后比較相應氨基酸位置或核苷酸位置上的氨基酸殘基或核苷酸。當?shù)谝恍蛄兄械奈恢帽坏诙蛄邢鄳恢玫南嗤蝾愃频陌被釟埢蚝塑账嵴紦?jù)時，則該位置上的分子是相同或相似的。2個序列的百分比同一性或相似性是該序列共有的相同或相似位置數(shù)的函數(shù)(即％同一性=相同位置數(shù)/位置總數(shù)(例如重疊位置)X100)。2個氨基酸的相似性可通過本領域已知的各種方法評價。例如非極性中性殘基(例如Ala、Cys、Gly、I le、Leu、Met、Phe、Pro、Trp、Val)可視為類似，繼而酸性帶電荷極性(例如Glu、Asp)、堿性帶電荷極性(例如Arg、His、Lys)和中性極性(例如Asn、Gin、Ser、Thr、Tyr)殘基各可視為類似?？扇菀椎赜嬎阃恍院拖嗨菩詢烧?。例如，在計算百分比同一性時，只可計算精確匹配，而且相對于局部比對，可進行全局比對。測定序列間的同一性或相似性的常用方法包括例如公開于Carillo等，1988，SIAM J.Applied Math.48:1073的方法。設計測定同一性的示例性方法以得到所測序列間的最大匹配。市售計算機程序中也提供測定同一性和相似性的示例性方法。用于2個序列比較的數(shù)學算法的具體實例是Karlin等，1990, Proc.Natl.Acad.Sc1.USA 87:2264-2268 的算法，以及例如 Karlin 等，1993，Proc.NatLAcad.Sc1.USA 90:5873-5877 的改進算法。這類算法被并入 Altschul 等，1990，J.Mol.Biol.215:403-410的NBLAST和XBLAST程序中。為了獲得用于比較目的的具有空位的比對(gapped alignments),可按 Altschul 等，1997，Nucleic Acids Res.25:3389-3402 所述應用Gapped BLAST?；蛘撸刹捎脵z測分子間的遠緣關系的PS1-Blast進行重復檢索。當應用BLAST、Gapped BLAST和PS1-Blast程序時，可使用本領域已知的各個程序的默認參數(shù)(例如XBLAST和NBLAST)。此外，可采用FASTA方法(Atschul等，1990，同上)。用于序列比較的數(shù)學算法的另一個具體實例是Myers等，1988，4:11-17的算法。這類算法被并入ALIGN程序(2.0版)中，其是GCG序列比對軟件包的部分(Devereux等，1984，Nucleic Acids Res.12(1):387)?？赏ㄟ^用 Vector NTI (Invitrogen ；Carlsbad CA)中的AlignX 模塊進行分析，來測定百分比同一性?！盎颊摺笔侵笢匮獎游铩；颊甙ㄈ?；陪伴動物(例如狗、貓)；農場動物(例如牛、馬、綿羊、豬、山羊)；野生動物等。在一個實施方案中，患者是人。在一個實施方案中，患者是患有2型糖尿病的人。在一個實施方案中，患者是患有2型糖尿病的胖人。術語“肽”和“多肽”在本文所述肽綴合物的組分的情況下是同義詞。術語“肽”在習慣意義上是指通過酰胺鍵連接的氨基酸的聚合物。術語“脫氨基酸”、“des-AA”、“desLys”等是指給定氨基酸不存在。氨基酸“不存在”意指之前在所述不存在氨基酸的N端和C端側連接的殘基(或官能團)鍵合在一起。術語“側鏈替代物”等是指模擬天然的生理氨基酸的側鏈部分的化學部分。應注意在整個申請書中，備選物以馬庫什(Markush)基團書寫，例如含有多于一個可能氨基酸的各個氨基酸位置。特別預期的是，應分別考慮馬庫什基團的每個成員，從而包括另一個實施方案，且馬庫什基團不意味著作為單一單元。“GLP-1受體激動劑化合物”是指當通過本領域已知方法評價時，誘導毒蜥外泌肽參比肽(例如毒蜥外泌肽-4)或GLP-1 (7-37)參比肽的生物活性的化合物，所述方法例如受體結合研究或體內血糖測定，例如以下文獻描述的:Hargrove等，2007，RegulatoryPeptides, 141:113-119，該公開內容通過引用結合到本文中。GLP-1受體激動劑化合物包括例如天然毒蜥外泌 肽、毒蜥外泌肽類似物、天然GLP-1、GLP-1類似物、GLP-1 (7-37)和GLP-1 (7-37)類似物。術語“毒蜥外泌肽”包括本文所述的天然存在的毒蜥外泌肽(或天然存在的毒蜥外泌肽的合成形式)。毒蜥外泌肽包括該分子的酰胺化形式、酸形式、藥學上可接受的鹽形式和任何其它生理活性形式。在一個實施方案中，術語毒蜥外泌肽可與術語“毒蜥外泌肽激動劑”互換使用。沒有相反的明確指示時，預期本文所述所有肽呈酰胺化形式和游離酸形式?！岸掘嵬饷陔念愃莆铩笔侵鸽?；含有肽模擬物、氨基酸取代和/或其它修飾的肽；含有本文所述的N端構象受約束的化合物和/或其它化學部分的肽；或當通過本領域已知方法評價時，誘導類似于毒蜥外泌肽參比肽(例如毒蜥外泌肽-4)的生物活性的其它化合物，所述方法例如受體結合測定或體內血糖測定，例如以下文獻描述的=Hargrove等,2007,Regulatory Peptides 141:113-119,該公開內容通過引用結合到本文中并用于所有目的。優(yōu)選在這類受體結合測定中，毒蜥外泌肽類似物以小于I μΜ的親和力、小于5 ηΜ的親和力、小于I ηΜ的親和力或小于0.1 ηΜ的親和力結合。在一個實施方案中，術語“毒蜥外泌肽類似物”是指當與毒蜥外泌肽-4的氨基酸序列比較時，具有1、2、3、4、5、6、7或8個氨基酸取代、插入、缺失或者其兩種或更多種組合的氨基酸序列的肽。在一個實施方案中，術語毒蜥外泌肽類似物是毒蜥外泌肽-4類似物。在其它實施方案中，術語“毒蜥外泌肽類似物”是指與毒蜥外泌肽-4的氨基酸序列具有至少85%、至少88%、至少90%、至少93%、至少95%或至少98%序列同一性的肽。毒蜥外泌肽類似物包括該分子的酰胺化形式、酸形式、藥學上可接受的鹽形式和任何其它生理活性形式。在一個實施方案中，術語毒蜥外泌肽類似物可與術語“毒蜥外泌肽激動劑類似物”互換使用。"GLP-1 (7-37)類似物”是指肽；含有肽模擬物和/或其它修飾的肽；含有本文所述的N端構象受約束的化合物和/或其它化學部分的肽；或當通過本領域已知方法評價時，誘導類似于GLP-1 (7-37)的生物活性的其它化合物，所述方法例如受體結合測定或體內血糖測定，例如以下文獻描述的:Hargrove等,2007 (同上)。在一個實施方案中，術語“GLP-l(7-37)類似物”是指當與GLP-1 (7-37)的氨基酸序列比較時，具有1、2、3、4、5、6、7、或8個氨基酸取代、插入、缺失或者其兩種或更多種組合的氨基酸序列的肽。在一個實施方案中，GLP-1 (7-37)類似物是GLP-1 (7-36)。GLP-1 (7-37)類似物包括該分子的酰胺化形式、酸形式、藥學上可接受的鹽形式和任何其它生理活性形式。本公開內容提供與式⑴具有至少50%氨基酸序列同一性的含苯甲酰胺的肽化合物:
權利要求
1.式⑴的化合物:XaarXaarXaarGTFTSDLSKQ-XaatrEEEAVRIf IbXaa2rLKNJ (I) 其中Xaa1.Xaa2.Xaa3、Xaa14.Xaa25和Z如權利要求書中所定義，且其中2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個連續(xù)氨基酸殘基被苯甲酰胺基團Y1取代。
2.下式(II)的化合物: Xaai Xaaj GIy TIir Phc Thr Scr Asp Xaaso^391 ] Χ,33|2 j5Xaa3ft Xmti Ala.Xaai令 Xaa，X_1-Y\-l(IJ) 其中Xaa1、Xaa2、Xaa3、Xaa14.Xaa2^Y1和Z如權利要求書中所定義，且其中Xaaici為Leu或不存在；Xaan為Ser或不存在；Xaa12為Lys或不存在；Xaa13為Gln或不存在；Xaa15為Glu或不存在；Xaa16為Glu或Ala ；Xaa17為Glu或Ala ；Xaa19為Val或不存在；Xaa2。為Arg或不存在；Xaa21為Leu或不存在。
3.下式(III)的化合物: Xaa: Xaai Xaaj Gly 'flr Xaafj Xaa Xaag Xia§ Xaa,&Xaa: I Xaa§2 Xaao X i4 Xaaj 5 Xaa^ XaanAia Val ArgLm Phe He Glu Leu Lys Asn -Z(HI) 其中Xaa1' Xaa2λ Xaa3Λ Xaa14、Xaa25和Z如權利要求書中所定義； Xaa6-Xaa14總的合在一起選自:Phe Thr Ser Y1 ；Phe Y1 Gln Met ；Phe Thr Y1 Met ；Y1 Lys Gln Met ；Phe Y1 Gln Leu ；Phe Thr Y1 Leu ；Y1 Lys Gln Leu ；Y1 Ser Lys Gln Met ；Phe Y1 Lys Gln Met ；Phe Thr Y1 Gln Met ；Phe Thr Ser Y1 Met ；Phe Thr Ser Asp Y1；Y1 Ser Lys Gln Leu ；Phe Y1 Lys Gln Leu ；Phe Thr Y1 Gln Leu ；Phe Thr Ser Y1 Leu ；Phe Thr Ser Asp Leu Y1 ；Phe Thr Ser Asp Y1 Met ；Phe Thr Ser Y1 Gln Met ；Phe Thr Y1 Lys Gln Met ；Phe Y1 Ser Lys Gln Met ；Y1 Leu Ser Lys Gln Met ；Phe Thr Ser Asp Y1 Leu ；Phe Thr Ser Y1 Gln Leu ；Phe Thr Y1 Lys Gln Leu ；Phe Y1 Ser Lys Gln Leu ;或Y1 Leu Ser Lys Gln Leu; 其中Y1如權利要求書中所定義； Xaa15為Glu或不存在；Xaa16 為 Glu 或 Ala ;和Xaa17 為 Glu 或 Ala0
4.權利要求1、2或3的化合物，其中Xaa1為His、脫氨基His或
5.權利要求4的化合物，其中R4為鍵。
6.權利要求4的化合物，其中R4為任選被烴基、羥基或羧基取代的C1X2X3或C4亞鏈烴基。
7.權利要求4的化合物，其中R4為亞甲基。
8.權利要求4的化合物，其中R4為被一個或多個取代基R5取代的亞乙基，其中R5獨立地為烴基、羥基或羧基。
9.權利要求1、2或3的化合物，其中Xaa1選自:
10.權利要求1、2或3的化合物，其中Xaa1為His或脫氨基His。
11.權利要求1、2或3的化合物，其中Xaa2SGly、Ala、D-Ala*Aib。
12.權利要求1、2或3的化合物，其中Xaa2為Gly、d_Ala或Ala。
13.權利要求1、2或3的化合物，其中Xaa3為Gly、Ala、D_Ala、Aib、Glu、Pro或選自以下的部分:
14.權利要求1、2或3的化合物，其中Xaa3為Gly、Ala、Glu或Pro。
15.權利要求1、2或3的化合物，其中Xaa3為Gly或Pro。
16.權利要求1、2或3的化合物，其中Xaa14為Met或Leu。
17.權利要求1、2或3的化合物，其中Xaa25為Trp或Phe。
18.權利要求1、2 或 3 的化合物，其中 Z 為-OH ；-NH2 ；Gly Gly-OH ；Gly Gly-NH2 ；GlyGly Pro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser-OH;或 Gly Gly Pro Ser Ser Gly Ala ProPro Pro 3θγ_Μ12。
19.權利要求1、2或3的化合物，其中Z為-OH或-ΝΗ2。
20.權利要求1、2或3的化合物，其中Y1為:
21.藥物組合物，其包含權利要求1-20中任一項的化合物和藥學上可接受的載體。
22.下式(IV)的化合物:Xaa1-Xaa2-Xiiaa-GTri:SOLSlCQ-Xaai4-EEEAVRLFtE-Xaa25-LKK-Z (1￥) 其中XaapXaayXaayXaa1PXaa25和Z如權利要求書中所定義,且其中至少一對氨基酸殘基由如下表不的亞鏈稀基橋連接:ξ_ I―!—{CH2)m-(CH2)p —ζ— s其中m和p各自獨立地為1、2、3、4、5或6。
23.式(V)的化合物:
24.式(VI)的化合物: Xaai Χ.2 Xaaj Clly Thr Phe Thr Ser Asp Leu Scr Lys Gln Xaaj4 Glu Glu Glu Ala Val ArgLcu Phe He Y3-Z(VI);其中Xaa1' Xaa2, Xaa3> Xaa14和Z如權利要求書所定義；Y3 為..0 O-ME^ ,(CH2)bXaa25 Leu Lys -N-f Z ^—..................— (C H 2β /f' U:~ —1~~~~~ΓΙΓ 2/^_____~OXaa25 為 Phe 或 Trp ；a為1、2或3 ;b為0、1或2 ;和
25.權利要求22、23或24的化合物，其中Xaa1為His、脫氨基His或
26.權利要求25的化合物，其中R4為鍵。
27.權利要求25的化合物，其中R4為被烴基、羥基或羧基任選取代的C1X2X3或C4亞鏈烴基。
28.權利要求25的化合物，其中R4為亞甲基。
29.權利要求25的化合物，其中R4為被一個或多個取代基R5取代的亞乙基，其中R5獨立地為烴基、羥基或羧基。
30.權利要求22、23或24的化合物，其中Xaa1選自:
31.權利要求22、23或24的化合物，其中Xaa1為His或脫氨基His。
32.權利要求22、23或24的化合物，其中Xaa2為Gly、Ala、D-Ala或Aib。
33.權利要求22,23或24的化合物，其中Xaa2為Gly、d-Ala或Ala。
34.權利要求22、23或24的化合物，其中Xaa3為Gly、Ala、D_Ala、Aib、Glu、Pro或選自以下的部分:
35.權利要求22、23或24的化合物，其中Xaa3為Gly、Ala、Glu或Pro。
36.權利要求22、23或24的化合物，其中Xaa3為Gly或Pro。
37.權利要求22、23或24的化合物，其中Xaa14為Met或Leu。
38.權利要求22、23或24的化合物，其中Xaa25為Trp或Phe。
39.權利要求22、23 或 24 的化合物，其中 Z 為-OH5-NH2 ;Gly Gly-0H;Gly Gly-NH2 ；Gly GlyPro Ser Ser Gly Ala Pro Pro Pro Ser-OH;或 Gly Gly Pro Ser Ser Gly AlaPro ProPro 3θγ_Μ12。
40.權利要求22、23或24的化合物，其中Z為-OH或_順2。
41.藥物組合物，其包含權利要求22-40中任一項的化合物和藥學上可接受的載體。
42.化合物編號12。
43.化合物編號13。
44.化合物編號14。
45.化合物編號15。
46.化合物編號16。
47.化合物編號17。
48.化合物編號18。
49.化合物編號22。
50.化合物編號23。
51.化合物編號24。
52.化合物編號25。
53.化合物編號26。
54.化合物編號27。
55.化合物編號34。
56.化合物編號35。
57.化合物編號36。
58.藥物組合物，其包含權利要求42-57中任一項的化合物和藥學上可接受的載體。
59.用于治療有需要的患者的糖尿病的方法，所述方法包括給予治療有效量的權利要求1-20、22-40和42-57中任一項的化合物或權利要求21、41或58的藥物組合物以治療患者的糖尿病。
60.權利要求59的方法，其中所述糖尿病是I型糖尿病。
61.權利要求59的方法，其中所述糖尿病是2型糖尿病。
62.權利要求59的方法，其中所述糖尿病是妊娠糖尿病。
63.用于治療有需要的患者的肥胖癥或體重超重的方法，所述方法包括給予治療有效量的權利要求1-20、22-40和42-57中任一項的化合物或權利要求21、41或58的藥物組合物以治療患者的肥胖癥或體重超重。
64.用于治療肥胖癥的權利要求63的方法。
65.用于 治療體重超重的權利要求63的方法。
66.用于減輕有需要的患者的體重的方法，所述方法包括給予治療有效量的權利要求1-20,22-40和42-57中任一項的化合物或權利要求21、41或58的藥物組合物以減輕患者的體重。
67.用于治療有需要的患者的胰島素抵抗或餐后高血糖癥的方法，所述方法包括給予治療有效量的權利要求1-20、22-40和42-57中任一項的化合物或權利要求21、41或58的藥物組合物以治療患者的胰島素抵抗或餐后高血糖癥。
68.用于降低有需要的患者的HBAlc或血漿葡萄糖的方法，所述方法包括給予治療有效量的權利要求1-20、22-40和42-57中任一項的化合物或權利要求21、41或58的藥物組合物以降低患者的HBAlc或血漿葡萄糖。
69.治療有需要的患者的心血管疾病的方法，所述方法包括給予治療有效量的權利要求1-20、22-40和42-57中任一項的化合物或權利要求21、41或58的藥物組合物以治療患者的心血管疾病。
70.權利要求69的方法，其中所述心血管疾病是心臟病、充血性心力衰竭、高血壓、夕卜周血管疾病、心絞痛、動脈粥樣硬化、心肌梗死、高甘油三酯血癥或高膽固醇血癥。
71.用于含取代的苯甲酰胺的化合物的固相合成的方法，所述方法包括: a)使具有游離胺的樹脂結合試劑與具有側鏈替代部分的取代苯基、游離羧酸和硝基部分反應，從而形成樹脂結合的取代苯甲酰胺基；和 b)使所述硝基部分還原形成游離胺，從而形成具有游離胺的樹脂結合的取代苯甲酰胺基。
72.權利要求71的方法，所述方法還包括: c)重復步驟a)_b)以將一個或多個額外的取代苯基部分添加至所述樹脂結合的取代苯甲酰胺基上，從而形成具有游離胺的延伸的樹脂結合的取代苯甲酰胺基。
73.權利要求71的方法，所述方法還包括: d)使所述具有游離胺的樹脂結合的取代苯甲酰胺基與額外的氨基酸反應，從而形成含取代的苯甲酰胺的化合物。
74.權利要求72的方法，所述方法還包括: d)使所述具有游離胺的延伸的樹脂結合的取代苯甲酰胺基與額外的氨基酸反應，從而形成含取代的苯甲酰胺的化合物。
75.權利要求71的方法，其中所述樹脂結合試劑是與所述樹脂結合的游離胺部分。
76.權利要求71的方法，其中所述樹脂結合試劑包含肽。
77.權利要求71-76中任一項的方法，其中每次出現(xiàn)的所述側鏈替代部分獨立地為氫、鹵素、羥基、硫醇基、羧基、取代或未取代的甲酰氨基、氨甲?；⑷〈蛭慈〈陌被?、取代或未取代的亞氨基、取代或未取代的脲、硝基、亞硝基、取代或未取代的烴基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的環(huán)烴基、取代或未取代的雜烴基、取代或未取代的雜環(huán)烴基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的烴氧基、取代或未取代的烯氧基、取代或未取代的環(huán)烴基氧基、取代或未取代的雜烴基氧基、取代或未取代的雜環(huán)烴基氧基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的雜芳氧基、取代或未取代的烴硫基、取代或未取代的烯硫基、取代或未取代的環(huán)烴基硫基、取代或未取代的雜烴基硫基、取代或未取代的雜環(huán)烴基硫基、取代或未取代的芳硫基、取代或未取代的雜芳硫基、取代或未取代的烴基亞磺?；?、取代或未取代的烯基亞磺酰基、取代或未取代的環(huán)烴基亞磺?；?、取代或未取代的雜烴基亞磺?；⑷〈蛭慈〈碾s環(huán)烴基亞磺?；?、取代或未取代的芳基亞磺?；?、取代或未取代的雜芳基亞磺?；?、取代或未取代的烴基磺?；?、取代或未取代的烯基磺?；⑷〈蛭慈〈沫h(huán)烴基磺?；⑷〈蛭慈〈碾s烴基磺?；?、取代或未取代的雜環(huán)烴基磺?；⑷〈蛭慈〈姆蓟酋；蛘呷〈蛭慈〈碾s芳基磺?；?。
78.用于含取代的苯甲酰胺的化合物的固相合成的方法，所述方法包括: a)使具有游離胺的樹脂結合試劑與具有多個側鏈替代部分、游離羧酸和硝基部分的取代聚苯甲酰胺試劑反應，從而形成樹脂結合的取代聚苯甲酰胺基；和 b)使所述硝基部分還原以形成游離胺，從而形成具有游離胺的樹脂結合的取代聚苯甲酰胺基。
79.權利要求78的方法，所述方法還包括: c)重復步驟a)-b)以將一個或多個額外的取代聚苯甲酰胺部分添加至所述樹脂結合的取代聚苯甲酰胺基上，從而形成具有游離胺的延伸的樹脂結合的取代聚苯甲酰胺基。
80.權利要求79的方法，所述方法還包括: d)使所述具有游離胺的樹脂結合的取代聚苯甲酰胺基與額外的氨基酸反應，從而形成含取代的苯甲酰胺的化合物。
81.權利要求79的方法，所述方法還包括: d)使所述具有游離胺的延伸的樹脂結合的取代聚苯甲酰胺基與額外的氨基酸反應，從而形成含取代的苯甲酰胺的化合物。
82.權利要求78-81中任一項的方法，其中所述多個側鏈替代部分各獨立地為氫、鹵素、羥基、硫醇基、羧基、取代或未取代的甲酰氨基、氨甲?；?、取代或未取代的氨基、取代或未取代的亞氨基、取代或未取代的脲、硝基、亞硝基、取代或未取代的烴基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的環(huán)烴基、取代或未取代的雜烴基、取代或未取代的雜環(huán)烴基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜芳基、取代或未取代的烴氧基、取代或未取代的烯氧基、取代或未取代的環(huán)烴基氧基、取代或未取代的雜烴基氧基、取代或未取代的雜環(huán)烴基氧基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的雜芳氧基、取代或未取代的烴硫基、取代或未取代的烯硫基、取代或未取代的環(huán)烴基硫基、取代或未取代的雜烴基硫基、取代或未取代的雜環(huán)烴基硫基、取代或未取代的芳硫基、取代或未取代的雜芳硫基、取代或未取代的烴基亞磺?；?、取代或未取代的烯基亞磺?；?、取代或未取代的環(huán)烴基亞磺酰基、取代或未取代的雜烴基亞磺?；⑷〈蛭慈〈碾s環(huán)烴基亞磺酰基、取代或未取代的芳基亞磺?；?、取代或未取代的雜芳基亞磺酰基、取代或未取代的烴基磺?；?、取代或未取代的烯基磺?；?、取代或未取代的環(huán)烴基磺酰基、取代或未取代的雜烴基磺酰基、取代或未取代的雜環(huán)烴基磺酰基、取代或未取代的芳基磺?；蛘呷〈?未取代的雜芳基磺酰基。
全文摘要
本發(fā)明內容提供具有相當于天然肽化合物的α-螺旋區(qū)的穩(wěn)定區(qū)域的GLP-1受體激動劑化合物。本發(fā)明內容還提供含苯甲酰胺的毒蜥外泌肽-4類似物和烯烴受約束的毒蜥外泌肽-4類似物，兩種類似物具有相當于毒蜥外泌肽-4的α-螺旋區(qū)的穩(wěn)定區(qū)域。
文檔編號A61K38/26GK103200956SQ201180046565
公開日2013年7月10日 申請日期2011年7月27日 優(yōu)先權日2010年7月28日
發(fā)明者J.阿爾法羅-羅佩斯, A.莎馬, C.J.蘇亞雷斯, E.科茨, S.S.高希 申請人:安米林藥品有限責任公司