專利名稱：一種皂角刺提取物水凝膠帖及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種皂角刺提取物水凝膠帖及其制備方法。
背景技術(shù)：
由于抗生素的廣泛應用，甚至是濫用，導致了細菌耐藥性的產(chǎn)生加快，抗感染治療面臨的形勢也越來越嚴峻。常見的如金黃色葡萄球菌，它是醫(yī)院感染中常見的致病菌之一， 可以感染傷口，包括醫(yī)療操作產(chǎn)生的傷口，并進一步地進入到人體中，引發(fā)嚴重的傳染病。 常規(guī)的治療感染的藥物以化學藥為主，長期使用易造成細菌耐藥，影響療效，甚至會對人體產(chǎn)生傷害。因此，尋找和開發(fā)安全有效的、低毒副作用的抗感染藥物具有十分重要的理論、 經(jīng)濟和社會意義。我國的中藥資源極為豐富，研究和使用的歷史悠久，具有抗感染作用的藥材也較多，且價格低廉，效果明顯，易于普及。同時，運用現(xiàn)代科學技術(shù)方法和制藥手段，發(fā)展傳統(tǒng)中醫(yī)藥，開發(fā)現(xiàn)代中藥新藥并實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，也是我國中藥現(xiàn)代化的重要任務。目前已知的抗感染藥物的給藥途徑不外口服、注射、局部涂敷，但均存在著一些問題，如口服劑型需經(jīng)胃腸道吸收才能發(fā)揮作用，由于存在首過效應，會因此降低療效；注射劑常引起機體疼痛，產(chǎn)生不良反應可能性較大。而透皮吸收制劑可使藥物免受胃腸道的影響，避免肝臟的首過效應，且皮膚所含蛋白水解酶較少，間層兼具儲庫作用，因而緩釋作用明顯，生物利用度提高。現(xiàn)有中藥存在著療效不確切、質(zhì)量不穩(wěn)定、重金屬和農(nóng)藥殘留超標、 安全性不可靠、工藝劑型落后、生物利用度低、時效差等諸多問題。90年代開始，國家就把納米中藥定為現(xiàn)代中藥的發(fā)展方向，雖然取得一定的進步，但由于現(xiàn)在納米中藥的制備技術(shù)基本局限于中藥飲片的超細粉碎，不僅不能完全提取中藥中的有效成份，甚至是有害成份也不能分離，有害金屬也不能完全去除，使納米中藥在實際運用中受到很大的限制，納米中藥發(fā)展緩慢。皂角刺為豆科植物皂莢sinensis La 的干燥棘刺，具有消腫、脫毒、排膿、殺蟲的作用。現(xiàn)代研究表明，皂角刺具有抗凝血、抗肝纖維化、免疫調(diào)節(jié)、腫瘤抑制等多種藥理作用，主要化學成分為黃酮類、酚類、氨基酸等。對皂角刺提取方法不同，所得提取液內(nèi)主要成分也有差異?！霸斫谴虤饣Q液體外抑菌作用及成分的初步研究”(任冬冬，羅思婧，楊紅，廣東藥學院學報，2010. (6):579 582)公開了皂角刺藥材氣化爆鳴液具有抑菌作用。氣化爆鳴法是依據(jù)“藥用植物的有效部位都是有機物及有機物都可以氣化”以及“爆炸極限”理論，將中藥飲片氣化，然后進行爆鳴，使氣化物分子之間的碰撞次數(shù)和強度增加，瞬間完成液化過程，與常規(guī)提取方法相比，具有提取效率高等優(yōu)勢。因提取過程不需要溶劑，故又稱 “無溶劑提取法”。文獻“皂角刺氣化爆鳴液體外抑菌作用及成分的初步研究”(廣東藥學院學報，2010，沈(6) :579 582)公開了皂角刺氣化爆鳴液的制備方法和步驟，結(jié)果表明氣化爆鳴法提取的皂角刺藥材的有效成分抑菌效果較好，其成分與皂角刺水煎液和醇提液的成分不同，且有效成分質(zhì)量濃度較高，提取液顆粒直徑在5(Tl00nm范圍內(nèi)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)中的上述不足，提供一種皂角刺提取物水凝膠帖。本發(fā)明的另一目的是提供上述皂角刺提取物水凝膠帖的制備方法。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)上述目的
本發(fā)明是在查閱文獻的基礎(chǔ)上選用在我國民間及臨床有著悠久應用歷史的中藥材皂角刺，制備具有抗感染活性的皂角刺提取物，并將其制備成水凝膠貼劑，以提高機體對藥物的依從性，提高抗感染療效，減少不良反應的發(fā)生，為臨床用藥提供更多的選擇。一種皂角刺提取物水凝膠帖，是由皂角刺提取液涂布在空白水凝膠基質(zhì)上形成； 所述皂角刺提取液主要成分為酚酸類化合物，含量在6 7 mg/ml左右；所述空白水凝膠基質(zhì)由油相和水相攪拌混合而成，油相與水相的重量比為5(Γ60 :100，所述油相成分為甘油、 聚丙烯酸、甘羥鋁和氮酮；所述水相成分為水、羧甲基纖維素鈉、酒石酸、EDTA-2Na和鈦白粉。上述水凝膠帖，所述油相成分中，按重量份數(shù)計，甘油聚丙烯酸甘羥鋁氮酮比值為70(T800 =120^200 :2飛20飛0。所述水相成分中，按重量份數(shù)計，蒸餾水羧甲基纖維素鈉酒石酸:EDTA-2Na 鈦白粉比值為900 1500 :15 25 :2 6 :2 5 :30 40。一種皂角刺提取物水凝膠帖的制備方法，步驟如下
(1)皂角刺提取物的制備采用氣化爆鳴法制備皂角刺提取液，將皂角刺藥材原料切段，在氣化器內(nèi)加熱至800°c，產(chǎn)生黃色氣體進入爆鳴室，此時加入CO爆鳴，經(jīng)過自動液化后收集液體，過濾或靜置后澄清，即得皂角刺氣化爆鳴液，氣化爆鳴液用乙酸乙酯萃取，優(yōu)選萃取3次，每次乙酸乙酯的體積與氣化爆鳴液體積相同，合并萃取液，水浴蒸干，用甲醇溶解稀釋，即得皂角刺氣化爆鳴提取物；(經(jīng)過多種有機溶劑的比較試驗，發(fā)現(xiàn)皂角刺氣化爆鳴液中的抑菌活性成分更能充分溶于乙酸乙酯，使后面制備的水凝膠貼中有效抑菌活性成分的含量更高，作用效果更好，因此選擇乙酸乙酯作為萃取劑。)
(2)空白水凝膠基質(zhì)的制備甘油中加入聚丙烯酸、甘羥鋁和氮酮，攪拌均勻即得油相， 另外稱取處方量的羧甲基纖維素鈉、酒石酸和EDTA-2Na和鈦白粉，溶解于于水中，得到水相，將水相緩慢加入油相，攪拌均勻，超聲脫氣得空白水凝膠基質(zhì)；
(3)水凝膠帖成型工藝將皂角刺氣化爆鳴提取液和空白水凝膠基質(zhì)按重量份數(shù)計比值為6 10:100通過攪拌的方式使膏體均勻混合并成凝膠，涂布(即將凝膠涂覆在固相載體上)，固化6 8h，成型包裝即可。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果
(1)氣化爆鳴法可充分提取皂角刺中的有效成份，同時去除重金屬，節(jié)省中藥原材料， 提取物顆粒小(5(Tl00nm)、吸附力強、脂溶性高，能有效穿透生物屏障(皮膚屏障)進入病灶區(qū)。(2)制備的親水凝膠貼劑基質(zhì)處方簡單，含水率高、親和力強、可靠穩(wěn)定，對皮膚無刺激性，抗感染藥效活性良好，并可方便地添加各種中草藥提取物，可廣泛用于手術(shù)創(chuàng)口、 一般傷口、皮膚感染及美容美膚等方面。


圖1.皂角刺氣化爆鳴提取液制備圖； 圖2.原兒茶酸標準曲線；
圖3.水凝膠貼成品圖4.含藥水凝膠帖劑制備工藝流程圖5.實施例2中家兔單次給藥的皮膚刺激性實驗結(jié)果圖6.小鼠感染金黃色葡萄球菌藥效學實驗中給藥5天后病理切片圖，其中A表示含藥貼組，B表示紅霉素軟膏組，C表示純藥液組，D表示空白組。
具體實施例方式以下結(jié)合實施例進一步解釋本發(fā)明，但實施例不構(gòu)成對本發(fā)明的任何限制。實施例中除有特殊說明外，均為本領(lǐng)域常規(guī)實驗方法步驟和試劑。實施例1皂角刺提取物水凝膠帖的制備
1.制備皂角刺提取液
皂角刺氣化爆鳴液的制備參考文獻“皂角刺氣化爆鳴液體外抑菌作用及成分的初步研究”(廣東藥學院學報，2010，沈(6) :579 582)制備。將皂角刺藥材原材料切段，于氣化器 (設(shè)備名稱氣化爆鳴提取設(shè)備，廠家吉林省通化市中醫(yī)藥研究所，該設(shè)備專利名稱一種提取中草藥有效部位的專用裝置，專利號01212112. 6)內(nèi)加熱至800°C，產(chǎn)生黃色氣體進入爆鳴室，再通入CO爆鳴，經(jīng)過自動液化，收集液體(過濾或靜置后澄清)，得到皂角刺的“氣化爆鳴液”，該裝置的提取率約30% (30ml/100g藥材)。準確量取IOml氣化爆鳴液，用乙酸乙酯萃取3次(IOml/次)，合并萃取液，水浴蒸干，用甲醇IOml溶解，取Iml溶液，甲醇稀釋5倍，即得皂角刺提取物，經(jīng)測定，其主要活性組分酚酸類化合物含量為6 7mg/ml。2.皂角刺氣化爆鳴液中總酚酸含量的測定實驗方法
2.1. 1原兒茶酸對照品溶液的制備
精密稱取原兒茶酸對照品2. 3mg于20ml容量瓶中，甲醇溶解并定容至20ml，搖勻，備用，濃度為115yg-mr1.2. 1.2樣品溶液的制備
準確量取IOml氣化爆鳴液，用乙酸乙酯萃取3次(IOml/次)，合并萃取液，水浴蒸干得 190mg萃取物，用IOml甲醇溶解，使用時稀釋250倍。2. 1. 3 Folin-Ciocalteu 試劑的制備
福林酚試劑的制備準確稱取鎢酸鈉40g，磷鉬酸8g和85%磷酸20mL，溶于300ml蒸餾水，煮沸加熱回流池，冷卻，稀釋至400ml，置于棕色瓶中保存。Na2CO3溶液的制備準確稱取15g Na2CO3,溶于200 mL蒸餾水中，即為75g · L-1 Na2CO3 溶液。2. 1. 4測定方法
精密吸取適量樣品溶液1 ml于10 ml帶塞離心管中，加入2. 5 ml福林試劑，放置5min， 再精密加入Na2CO3溶液anl，50°C水浴保持5min，取出并于室溫放置2h，于760 nm左右測定吸光度值。2. 1.5標準曲線的繪制
從原兒茶酸標準儲備液中分別吸取0. 5,0. 75,1,1. 25，1. 5，1. 75mL于5 ml容量瓶中，蒸餾水稀釋定容，搖勻，濃度分別為11. 50 μ g · πιΓ1,17. 25 μ g · πιΓ1, 23 μ g · πιΓ1, 28. 75 μ g · ml—1，34. 5 μ g · ml—1，40. 25 μ g · πιΓ1，分別從中精密吸取 lml，按 1. 4 測定方法反應，測定吸光度值。以終濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制標準曲線，見圖2，得回歸方程 Y=O. 0403+0. 0089X, R=O. 9997。結(jié)果表明總酚在 11. 50 μ g · mdO. 25 μ g · πιΓ1 范圍內(nèi)線性良好。2. 2 Folin-Ciocalteu 比色方法的評價 2. 2. 1穩(wěn)定性試驗
按2. 1. 2供試品溶液制備方法制備樣品液，并按2. 1. 4測定方法反應后，每隔15 min 測定一次，觀察池內(nèi)吸光度值變化，以評價該分析方法的穩(wěn)定性。放置15min、30min、45min、lh、l. 5h、2h 后測定吸光度值分別為 0. 6993,0. 7042、 0. 7086,0. 7103,0. 7115,0. 7127，相對標準偏差(RSD)為0. 71 %，表明該方法在顯色反應完成后內(nèi)吸光度值較穩(wěn)定。2. 2. 2重復性試驗
取同一批樣品，平行5份，精密稱定，按2. 1. 2供試品溶液制備方法制備，并按2. 1. 4測定法反應。分別測定其總酚酸含量，并計算結(jié)果的相對標準偏差，以評價該方法的重現(xiàn)性。5份樣品所測得的總酚的質(zhì)量分數(shù)分別為32. 13%,32. 17%,32. 17%,32. 23%, 32. 15%，相對標準偏差(RSD)為0. 12%，表明該方法重現(xiàn)性較好。2. 2. 3精密度試驗
取濃度為28. 75 μ g · ml—1的原兒茶酸標準溶液按2. 1. 4項測定法重復測定6次，并計算結(jié)果的相對標準偏差，以評價該方法的精密度。取濃度為57. 5μ g · ml—1的原兒茶酸標準溶液先后連續(xù)測定6次，測定吸光度值， 結(jié)果分別為 0. 54389,0. 54341,0. 54412,0. 54406,0. 54396,0. 54405，吸光度值的相對標準偏差(RSD)SO. 04%，小于2%，表明該含量測定方法的精密度符合要求。2. 2. 4加樣回收試驗
在樣品液中加入不同量的原兒茶酸標準溶液，分別測定其總酚酸含量，并計算其回收率，以評價該分析方法的準確性和可靠性。結(jié)果見表1，5次加樣回收試驗的最低回收率為98.4%，最高回收率為102.0%，平均回收率為100.9%，其相對標準偏差(RSD)為1.68%。表明該方法準確可靠，可用于皂角刺氣化爆鳴液中總酚酸含量的檢測。表1加樣回收試驗結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種皂角刺提取物水凝膠帖，其特征在于是由皂角刺提取液與空白水凝膠基質(zhì)混合形成；所述皂角刺提取液酚酸類化合物含量為6 7 mg/ml ；所述空白水凝膠基質(zhì)由油相和水相攪拌混合而成，油相與水相的重量比為50飛0 :100，所述油相成分為甘油、聚丙烯酸、 甘羥鋁和氮酮；所述水相成分為水、羧甲基纖維素鈉、酒石酸、EDTA-2Na和鈦白粉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述皂角刺提取物水凝膠帖，其特征在于所述油相成分中，按重量份數(shù)計，甘油聚丙烯酸甘羥鋁氮酮比值為700 800 :120 140 :2 5 :35 45。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述皂角刺提取物水凝膠帖，其特征在于所述水相成分中，按重量份數(shù)計，蒸餾水羧甲基纖維素鈉酒石酸EDTA-2Na 鈦白粉比值為90(Tl200 :18 25 3 5 :2 4 35 40。
4.權(quán)利要求1所述皂角刺提取物水凝膠帖的制備方法，其特征在于步驟如下(1)制備皂角刺提取液采用氣化爆鳴法，將皂角刺藥材原料切段，在氣化器內(nèi)加熱至 SOO0C，產(chǎn)生黃色氣體進入爆鳴室，此時加入CO爆鳴，經(jīng)過自動液化后收集液體，過濾或靜置澄清，即得皂角刺氣化爆鳴液；再經(jīng)乙酸乙酯萃取，水浴蒸干，甲醇溶解稀釋，得到皂角刺提取液；(2)空白水凝膠基質(zhì)的制備甘油中加入聚丙烯酸、甘羥鋁和氮酮，攪拌均勻即得油相， 另外羧甲基纖維素鈉、酒石酸和EDTA-2Na和鈦白粉，溶解于于水中，得到水相，將水相緩慢加入油相，攪拌均勻，超聲脫氣得空白水凝膠基質(zhì)；(3)水凝膠帖成型工藝將皂角刺提取液和空白水凝膠基質(zhì)按重量份數(shù)比為6 10:100 進行攪拌，使膏體均勻混合并成凝膠，涂布，固化6、h，成型包裝即可。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述皂角刺提取物水凝膠帖的制備方法，其特征在于步驟(1)乙酸乙酯萃取3次，每次加入量與皂角刺氣化爆鳴液體積相同。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種皂角刺提取物水凝膠帖及其制備方法，屬于藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域。該皂角刺提取物水凝膠帖是皂角刺提取液與空白水凝膠基質(zhì)混合形成；所述皂角刺提取液酚酸類化合物含量為6~7mg/ml；所述空白水凝膠基質(zhì)由油相和水相攪拌混合而成，油相與水相的重量比為50~60100，所述油相成分為甘油、聚丙烯酸、甘羥鋁和氮酮；所述水相成分為水、羧甲基纖維素鈉、酒石酸、EDTA-2Na和鈦白粉。本發(fā)明的皂角刺提取物水凝膠帖基質(zhì)處方簡單，含水率高、親和力強、可靠穩(wěn)定，對皮膚無刺激性，抗感染藥效活性良好，并可方便地添加各種中草藥提取物，可廣泛用于手術(shù)創(chuàng)口、一般傷口、皮膚感染及美容美膚等方面。
文檔編號A61P35/00GK102309539SQ20111028265
公開日2012年1月11日 申請日期2011年9月22日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月22日
發(fā)明者何震宇, 李紅枝, 楊紅, 董艷芬, 趙美順, 黃慶 申請人:廣東藥學院