專利名稱：一種順鉑超分子膠束前藥的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及納米醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)是一種順鉬超分子膠束前藥的制備方法。
背景技術(shù)：
順鉬(順式二氯二氨合鉬,⑶DP)是1965年由美國(guó)科學(xué)家Rosenborg等人發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)具有抗癌活性的金屬配合物。它是一種廣譜的抗腫瘤化合物，可抑制癌細(xì)胞的DNA 復(fù)制過(guò)程，并損傷其細(xì)胞膜上結(jié)構(gòu)，對(duì)卵巢癌、宮頸癌、睪丸癌、乳腺癌、食道癌、非小細(xì)胞肺癌和胃癌等，具有療效確切，抗癌活性高等特點(diǎn)。然而，順鉬低的水溶性，重度消化道反應(yīng)、 骨髓抑制、聽(tīng)神經(jīng)毒性，尤其易對(duì)腎臟造成不可逆損傷等限制了其臨床療效的進(jìn)一步提高。經(jīng)過(guò)對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的檢索可以得出，將順鉬通過(guò)化學(xué)鍵載于生物相容性良好的聚谷氨酸衍生物上，不但降低了順鉬的毒性，而且提高了抗癌活性(Biomaterials，27(2006), 5958-5965)。Kataoka等將順鉬與聚乙二醇-聚谷氨酸(PEG_b_Glu)兩嵌段共聚物組裝成納米膠束，順鉬的載藥量得到提高，可達(dá)30%左右，順鉬納米膠束藥物對(duì)裸鼠實(shí)體瘤模型的治療效果良好，顯示出較好的臨床應(yīng)用前景(Cancer Research, 63 (2003) 8977-8983)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種順鉬超分子膠束前藥的制備方法，該方法利用P -環(huán)糊精與金剛烷之間的高絡(luò)合常數(shù)，分別將二者引入兩種高分子鏈段，組裝形成非共價(jià)鍵接超分子膠束，制得的膠束粒徑為50 150nm、粒徑分布窄、在血液中能長(zhǎng)效循環(huán)。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的
一種順鉬超分子膠束前藥的制備方法，包括以下具體步驟
a、制備金剛烷封端聚乙二醇單甲醚(mPEG-Ad)
先將端氨基聚乙二醇單甲醚(mPEG-NH2)溶解于干燥1，2_ 二氯乙烷中，Ig mPEG-NH2對(duì)應(yīng)5 IOml 1，2-二氯乙烷，加入I-金剛烷甲酰氯、4-二甲氨基吡啶及吡唆，mPEG-NH2與 I-金剛烷甲酰氯、4-二甲氨基吡唆、吡啶的摩爾比為I : 5 : 5 : 5，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱至 50 100 V，保溫8小時(shí)，濃縮，在無(wú)水乙醚中沉淀，過(guò)濾，真空干燥得白色粉末金剛烷封端聚乙二醇單甲醚(mPEG-Ad)；
b、制備6_位氛基化的P-環(huán)糊精(P -⑶-NH2)
將3 -環(huán)糊精與N-溴代丁二酰亞胺和三苯基膦溶解于干燥二甲基甲酰胺中，Ig ^ -環(huán)糊精對(duì)應(yīng)5 IOml 二甲基甲酰胺，^ -環(huán)糊精與N-溴代丁二酰亞胺、三苯基膦的摩爾比為 I : 14 : 14，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱至60 100 °C，保溫10小時(shí)，制得6位全溴代的￠-環(huán)糊精(^ -⑶-Br);用干燥二甲基甲酰胺溶解P -⑶-Br，Ig ^ -⑶-Br對(duì)應(yīng)10 20ml 二甲基甲酰胺，加入疊氮化鈉，￠-⑶-Br與疊氮化鈉的摩爾比為I : 10，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱至50 100 V，保溫24小時(shí)，得6位全疊氮化的P -環(huán)糊精(P -⑶-N3);將P -⑶-N3溶于干燥二甲基甲酰胺，IgP -⑶_乂對(duì)應(yīng)10 20ml 二甲基甲酰胺，加入10 20個(gè)當(dāng)量的三苯基膦還原制得6位全氨基化的P -環(huán)糊精(P -⑶-NH2)；
C、制備P -環(huán)糊精-谷氨酸聚合物(P -⑶-PGL5)
將@ -⑶-NH2與L-谷氨酸-芐酯環(huán)內(nèi)酸酐溶解于干燥的二甲基甲酰胺中，IgP -OT-NH2 對(duì)應(yīng)50 IOOml 二甲基甲酰胺，￠-⑶-見(jiàn)12與1-谷氨酸-芐酯環(huán)內(nèi)酸酐的摩爾比為I : 35， 通氮?dú)獗Ｗo(hù)，30 50°C保溫48小時(shí)，制得P -環(huán)糊精-谷氨酸芐酯聚合物(P -⑶-PBLG5); 用干燥二甲基甲酰胺溶解，Ig ^ -⑶-PBLG5對(duì)應(yīng)20 50ml 二甲基甲酰胺，加2mol/L氫氧化鈉溶液，在室溫下攪拌48小時(shí)脫去芐酯制得P -環(huán)糊精-谷氨酸聚合物(P -⑶-PGL5)； 其中P -CD-PBLG5與NaOH摩爾比為I 100 ；
d、組裝順鉬超分子膠束前藥(mPEG-Ad/ ^ -CD-PGl5-CDDP)
將￠-⑶-PGL5溶解于干燥二甲基甲酰胺中，IgP-⑶-PGL5對(duì)應(yīng)20 50ml 二甲基甲酰胺，加入順鉬，避光攪拌24小時(shí)，P -⑶-PGL5與順鉬的摩爾比為I : 15，然后直接加入 mPEG-Ad, ^ -CD-PGL5與mPEG-Ad的摩爾比I : 1，攪拌24小時(shí)，透析、凍干形成順鉬超分子膠束前藥(mPEG-Ad/ ^ -CD-PGl5-CDDP)。其中，合成P -環(huán)糊精-谷氨酸聚合物與順鉬形成絡(luò)合物的工藝路線如下
權(quán)利要求
1.一種順鉬超分子膠束前藥的制備方法，其特征在于該方法包括以下具體步驟a、制備金剛烷封端聚乙二醇單甲醚mPEG-Ad先將端氨基聚乙二醇單甲醚溶解于干燥I，2- 二氯乙烷中，Ig端氨基聚乙二醇單甲醚對(duì)應(yīng)5 IOml 1，2_ 二氯乙烷，加入I-金剛烷甲酰氯、4-二甲氨基吡啶及吡唆，端氨基聚乙二醇單甲醚與I-金剛烷甲酰氯、4-二甲氨基吡唆、吡啶的摩爾比為I : 5 : 5 : 5，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱至50 100 °C，保溫8小時(shí)，濃縮，在無(wú)水乙醚中沉淀，過(guò)濾，真空干燥得白色粉末金剛烷封端聚乙二醇單甲醚mPEG-Ad ；b、制備6_位氛基化的β_環(huán)糊精β-CT-NH2將β -環(huán)糊精與N-溴代丁二酰亞胺和三苯基膦溶解于干燥二甲基甲酰胺中，Ig β -環(huán)糊精對(duì)應(yīng)5 IOml 二甲基甲酰胺，β -環(huán)糊精與N-溴代丁二酰亞胺、三苯基膦的摩爾比為 I : 14 : 14，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱至60 100 °C，保溫10小時(shí)，制得6位全溴代的β-環(huán)糊精；用干燥二甲基甲酰胺溶解6位全溴代的β-環(huán)糊精，Ig 6位全溴代的β-環(huán)糊精對(duì)應(yīng) 10 20ml 二甲基甲酰胺，加入疊氮化鈉，6位全溴代的β -環(huán)糊精與疊氮化鈉的摩爾比為I 10，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加熱至50 100 °C，保溫24小時(shí)，得6位全疊氮化的β-環(huán)糊精；將6 位全疊氮化的環(huán)糊精溶于干燥二甲基甲酰胺，Ig 6位全疊氮化的β-環(huán)糊精對(duì)應(yīng)10 20ml 二甲基甲酰胺，加入10 20個(gè)當(dāng)量的三苯基膦還原制得6位全氨基化的β -環(huán)糊精 β -CD-NH2 ；C、制備β -環(huán)糊精-谷氨酸聚合物β -⑶-PGL5將6位全氨基化的β -環(huán)糊精與L-谷氨酸-芐酯環(huán)內(nèi)酸酐溶解于干燥的二甲基甲酰胺中，Ig 6位全氨基化的β-環(huán)糊精對(duì)應(yīng)50 IOOml 二甲基甲酰胺，6位全氨基化的β-環(huán)糊精與L-谷氨酸-芐酯環(huán)內(nèi)酸酐的摩爾比為I : 35，通氮?dú)獗Ｗo(hù)，30 50°C保溫48小時(shí)， 制得β -環(huán)糊精-谷氨酸芐酯聚合物；用干燥二甲基甲酰胺溶解，Ig β -環(huán)糊精-谷氨酸芐酯聚合物對(duì)應(yīng)20 50ml 二甲基甲酰胺,加2mol/L氫氧化鈉溶液,在室溫下攪拌48小時(shí)脫去芐酯制得β -環(huán)糊精-谷氨酸聚合物β -⑶-PGL5 ;其中β -環(huán)糊精-谷氨酸芐酯聚合物與NaOH摩爾比為I 100 ；d、組裝順鉬超分子膠束前藥mPEG-Ad/ β -CD-PGL5-CDDP將β-環(huán)糊精-谷氨酸聚合物溶解于干燥二甲基甲酰胺中，Ig β-環(huán)糊精-谷氨酸聚合物對(duì)應(yīng)20 50ml 二甲基甲酰胺，加入順鉬，避光攪拌24小時(shí)，β -環(huán)糊精-谷氨酸聚合物與順鉬的摩爾比為I : 15，然后直接加入金剛烷封端聚乙二醇單甲醚，β-環(huán)糊精-谷氨酸聚合物與金剛烷封端聚乙二醇單甲醚的摩爾比I : 1，攪拌24小時(shí)，透析、凍干形成順鉬超分子膠束前藥 mPEG-Ad/ β -CD-PGL5-CDDP。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所述透析、凍干是指選擇截留分子量為1000 3500的透析袋將過(guò)濾后的反應(yīng)液置于去離子水中透析60 80 h后冷凍干燥。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于所得順鉬超分子膠束前藥的膠束粒徑為50-150nm，載藥量在5% 25%之間。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種順鉑超分子膠束前藥的制備方法，該方法是分別合成了金剛烷封端聚乙二醇單甲醚和β-環(huán)糊精-谷氨酸聚合物，然后在二甲基甲酰胺溶液中β-環(huán)糊精-谷氨酸聚合物與順鉑絡(luò)合后，直接加入金剛烷封端聚乙二醇單甲醚，經(jīng)透析得到順鉑超分子膠束。本發(fā)明利用環(huán)糊精與金剛烷之間的包結(jié)絡(luò)合力自誘導(dǎo)聚合物組裝形成膠束，分別合成親水性和疏水性的高分子鏈段，降低了合成的難度；其親水性和疏水性的高分子鏈段是通過(guò)非共價(jià)鍵連接，在水中能夠自發(fā)形成超分子膠束。
文檔編號(hào)A61K47/48GK102580113SQ20121005274
公開(kāi)日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2012年3月2日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月2日
發(fā)明者余家會(huì), 雍大衛(wèi) 申請(qǐng)人:華東師范大學(xué)