專利名稱：作為治療牙周炎的輔助物的穿心蓮凝膠的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物提取物提供能在牙周炎的治療中作為輔助物使用的產(chǎn)品的用途。該產(chǎn)品帶有生物適合的且可生物降解的載體，并以緩釋劑型提供。該產(chǎn)品以草藥提取物凝膠的形式存在，當(dāng)它與牙周袋中的牙齦液(牙齦淋巴)接觸時(shí)會(huì)變成液晶結(jié)構(gòu)。該產(chǎn)品可以裝在帶有鈍而且彎曲針頭的特定注射器中，從而可以很方便將該產(chǎn)品置入牙周裝中。
背景技術(shù)：
據(jù)報(bào)道，目前泰國(guó)40歲的人中有90％患有牙齦炎，其中80％的人在60歲時(shí)會(huì)發(fā)展成牙周炎?；颊叩难例l、牙槽骨、牙骨質(zhì)和牙周韌帶發(fā)炎，特征為結(jié)合上皮向尖端移動(dòng)以及附著在牙齦纖維、牙周韌帶和牙骨質(zhì)之間的結(jié)締組織消失?；颊叩难啦酃潜晃詹⑿纬纱Ｈ绻麤]有得到治療，該病會(huì)進(jìn)一步破壞支持骨，由此可以觀察到牙松動(dòng)，而且有時(shí)還會(huì)發(fā)現(xiàn)牙周膿腫。
對(duì)患者而言，基本的治療方法，就是加強(qiáng)口腔衛(wèi)生以控制住牙菌斑，對(duì)牙科醫(yī)生而言，就是進(jìn)行刮牙術(shù)和根面平整術(shù)。這一治療方法并不總是充分有效的。這就導(dǎo)致了抗生素的輔助使用，添加抗生素通常采用局部分送系統(tǒng)，而不是全身使用抗生素。全身使用抗生素會(huì)導(dǎo)致副作用，例如全身使用甲硝唑會(huì)刺激胃腸道，并且在重復(fù)使用時(shí)會(huì)影響神經(jīng)系統(tǒng)、皮膚和腎。而且在服用這種藥期間不允許飲酒。在全身使用四環(huán)素的情形中，由于該藥必須長(zhǎng)期、高劑量服用才能在牙周袋中保持有效的濃度，其結(jié)果可能是正常的微生物環(huán)境被破壞，從而導(dǎo)致由真菌引發(fā)的雙重感染和造成細(xì)菌抗藥菌株的發(fā)展。
早期的局部分送系統(tǒng)采用非生物降解的載體物質(zhì)，在抗生素藥劑釋放后不得不將該載體去除。這一系統(tǒng)具有很多缺點(diǎn)首先，將藥物插入牙周袋中十分困難；而且在抗生素藥劑釋放完后患者不得不返回診所，讓牙科醫(yī)生去除載體。而需要去除載體對(duì)牙齦的愈合可能有害并且也會(huì)刺激牙齦。
近來，已經(jīng)開發(fā)出采用可生物降解物質(zhì)的可控局部分送系統(tǒng)來解決此問題。這些包含了抗生素的系統(tǒng)雖然很好，但卻十分昂貴。這類產(chǎn)品已有商品提供(例如含有甲硝唑的Elysol，或含二甲胺四環(huán)素的軟膏)。這兩類產(chǎn)品可以裝入特殊的注射器和針頭中，為置入牙周袋中作好準(zhǔn)備。
發(fā)明詳述根據(jù)本發(fā)明，將抗微生物提取物摻入到凝膠基質(zhì)中以形成凝膠、薄片(chip)或軟膏(在下文中統(tǒng)稱為凝膠組合物)。
第一個(gè)方面，本發(fā)明提供了用于輔助治療牙周炎的凝膠組合物，它含有(i)具有對(duì)抗牙周病原體的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，該提取物優(yōu)選地來自于以下植物中的一種或多種穿心蓮(Andrographis Paniculata)，山竹果(Garcinia mangostana)和姜黃(Curcuma longa)；(ii)含有甘油單油酸酯和甘油三酯混合物的凝膠基質(zhì)，其中組合物與牙齦液接觸時(shí)會(huì)形成液晶結(jié)構(gòu)。
第二個(gè)方面，本發(fā)明提供了用作治療牙周炎的輔助物的組合物的制備方法，它包括(i)制備具有對(duì)抗牙周病原體的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，該提取物優(yōu)選地來自于以下植物中的一種或多種穿心蓮(AndrographisPaniculata)，山竹果(Garcinia mangostana)和姜黃(Curcuma longa)；(ii)制備含有甘油單油酸酯和甘油三酯的混合物作為凝膠基質(zhì)；(iii)將抗微生物提取物摻入到凝膠基質(zhì)中并混合，制成與牙齦液接觸時(shí)會(huì)形成液晶結(jié)構(gòu)的組合物。
抗微生物提取物可以是任何含有能有效對(duì)抗牙周病原體的抗微生物或抗菌活性化合物(例如，對(duì)抗已知能導(dǎo)致牙周炎的牙齦卟啉單胞菌的化合物)的植物提取物。該提取物優(yōu)選地取自穿心蓮(Andrographis paniculata)——爵床科植物中的成員，或取自山竹果(Garcinia mangostana)或姜黃(Curcumalonga)，所述植物也含有有效對(duì)抗牙周病原體的抗微生物或抗菌活性化合物。
優(yōu)選地，該提取物取自穿心蓮。這樣，該提取物含有以下化合物中的一種或多種穿心蓮內(nèi)酯(2-二萜內(nèi)酯)；脫氧穿心蓮內(nèi)酯；14-脫氧-11，12-雙脫氫-穿心蓮內(nèi)酯；14-脫氧-11-氧代-穿心蓮內(nèi)酯；14-脫氧-11-脫氫-穿心蓮內(nèi)酯；穿心蓮內(nèi)酯-19β-D糖苷；新穿心蓮內(nèi)酯；高穿心蓮內(nèi)酯；穿心蓮?fù)?；穿心蓮醇；穿心蓮硬脂酸酯；豆甾醇；青霉?nèi)酯。
下列方法可適用于制備抗微生物提取物
將洗干凈的穿心蓮(Andrographis paniculata(Burmf.)Nees.)的葉子和莖切成小塊，在40-80℃的熱空氣烘箱中干燥2-8小時(shí)，然后碾成粉末并用1-4mm孔徑的篩子篩分，將篩過的粉末放入密封性好的瓶子中保存。
將粉末用有機(jī)溶劑(例如乙醇，丙酮，氯仿或其它溶劑)提取，提取過程中的物質(zhì)比例為400-700克粉末∶3000-7000克溶劑，采用索格利特抽提器在30-95℃中抽提3-80小時(shí)。
將活性炭加入到溶劑提取物中(1-5克活性炭∶2-10g穿心蓮提取物)，混合并放置1-5小時(shí)以便使葉綠素脫色。
將混合物用濾紙(Whatman no.1)過濾，濾液采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在減壓下，在30-95℃進(jìn)行濃縮。然后將濃縮液放在沸水浴上蒸發(fā)，直到該濃縮液達(dá)到恒定重量，這樣就形成了抗微生物提取物。
應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明也可以采用其它本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的合適的提取方法來制備抗微生物提取物。植物的葉子或其它部分(例如根或根莖)都可適用作為提取活性成分的原料。對(duì)于穿心蓮提取物來說，優(yōu)選采用葉子。
凝膠基質(zhì)用甘油單油酸酯和甘油三酯混合物來制備。甘油單油酸酯有商品提供，也可以在合適的催化劑存在下通過油酸和甘油發(fā)生反應(yīng)而得到，其中包括了油酸單甘油酯和少量的其它脂肪酸。這樣，甘油單油酸酯就成為油酸的甘油酯和其它脂肪酸的混合物，但它主要由油酸的單甘油酯組成，具有軟化劑的特性。優(yōu)選地，甘油單油酸酯中含有至少95wt％的油酸單甘油酯。
甘油三酯包括油和脂肪，是食物中常見脂肪的主要成分。甘油三酯含有脂肪酸，它們以飽和脂肪酸和/或不飽和脂肪酸的形式連接在甘油分子上。
在本發(fā)明所采用的甘油三酯中，優(yōu)選的是采用一種油，特別是植物油(例如芝麻油，向日葵油、大豆油或紅花油，或者它們的任意混合物)。
甘油單油酸酯與甘油三酯的重量比范圍從2∶1到10∶1。甘油單油酸酯和甘油三酯的凝膠基質(zhì)混合物在組合物中的摻入量為組合物重量的60％-95％。
當(dāng)甘油單油酸酯與水或牙齦滲出液(牙齦淋巴)相接觸時(shí)，它的粘度增加并形成立方中間相結(jié)構(gòu)。與甘油三酯結(jié)合后，立方相結(jié)構(gòu)會(huì)變成六角形的液晶結(jié)構(gòu)。液晶結(jié)構(gòu)可以把活性成分或草藥提取物保持在晶體之間，然后再逐步地將活性成分釋放出來，從而提供了一種緩釋劑型。
抗微生物提取物(優(yōu)選穿心蓮提取物)的摻入量是組合物重量的0.5％-30％，優(yōu)選1-20％，更優(yōu)選1％-15％(％是基于干提取物)。然而，所采用的提取物的濃度必須要適合于使凝膠基質(zhì)能變成液晶結(jié)構(gòu)。
優(yōu)選地在組合物中加入抗氧化劑或防腐劑，其摻入量?jī)?yōu)選為組合物重量的0.5％-5％。優(yōu)選的抗氧化劑為D-α-生育酚乙酸酯。
組合物中也可以包含少量常用于凝膠制品中的輔助物質(zhì)(例如穩(wěn)定劑，均化劑，花紋造型劑，舒緩劑)。例如，甘油有助于為凝膠提供均勻的質(zhì)地，同時(shí)也能對(duì)傷口起舒緩作用。膠原有助于傷口的愈合。優(yōu)選的是將甘油或膠原或者兩者一起摻入到組合物中，優(yōu)選的摻入總量為組合物重量的0.1％-5％。
獲得的凝膠優(yōu)選地裝入到帶有彎曲鈍針頭的注射器中，以適于將凝膠置入牙周袋中。也可以采用其它便利的包裝。
實(shí)施例實(shí)施例11、穿心蓮植物的提取1.1將洗凈的穿心蓮(Andrographis paniculata(Burmf.)Nees.)的葉子和莖切成小塊，在60℃的熱空氣烘箱中干燥5小時(shí)，然后碾成粉末并用3mm孔徑的篩子篩分，將篩過的粉末放在密封性好的瓶子中保存。
1.2粉末用乙醇作溶劑提取，比例為550g粉末∶5000g溶劑，采用索格利特抽提器在65℃中抽提40小時(shí)。
1.3將活性炭加入到溶劑提取物中(3g活性炭∶6g穿心蓮提取物)，混合并放置3小時(shí)以便使葉綠素脫色。
1.4混合物用濾紙(Whatman no.l)過濾，濾液采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在減壓下，在65℃進(jìn)行濃縮。然后將濃縮液放在沸水浴上蒸發(fā)，直到該濃縮液達(dá)到恒定重量。
2.用作治療牙周炎的輔助物的組合物的制備2.1凝膠基質(zhì)的制備將含有油酸甘油酯和其它脂肪酸的甘油單油酸酯和甘油三酯(芝麻油)按照甘油單油酸酯∶甘油三酯的重量比為6∶1進(jìn)行混合。
2.2在凝膠中摻入穿心蓮提取物向凝膠基質(zhì)混合物中加入D-α-生育酚乙酸酯作為抗氧化劑、甘油以及穿心蓮提取物，并且充分混合得到凝膠組合物。在凝膠組合物中各物質(zhì)的含量為甘油單油酸酯/甘油三酯凝膠基質(zhì)混合物占組合物重量的76.5％，穿心蓮提取物占20％，D-α-生育酚乙酸酯占2.5％，甘油占1％。
3、臨床對(duì)比研究在與Elysol(甲硝唑疑膠)的臨床對(duì)比研究中，結(jié)果表明使用穿心蓮凝膠的情形中黑色素菌落(導(dǎo)致牙周炎的厭氧微生物)的百分?jǐn)?shù)明顯減少，而在使用甲硝唑凝膠的情形中則沒有發(fā)現(xiàn)其減少。
在與二甲胺四環(huán)素軟膏的臨床對(duì)比研究中，結(jié)果表明與用二甲胺四環(huán)素軟膏治療組以及對(duì)照組相比，穿心蓮凝膠顯著減少了能動(dòng)的桿狀微生物的百分?jǐn)?shù)。
研究中還發(fā)現(xiàn)該凝膠在與牙齦液接觸之后具有液晶結(jié)構(gòu)。
實(shí)施例2采用與實(shí)施例1相同的方法和劑量，用醇提取法制備山竹果提取物，并將它摻入到凝膠基質(zhì)混合物中。該凝膠基質(zhì)混合物中甘油單油酸酯與甘油三酯(芝麻油)的重量比為6∶1，混合物中還包含D-α-生育酚乙酸酯作為抗氧化劑以及甘油。山竹果凝膠組合物中各物質(zhì)含量為甘油單油酸酯/甘油三酯凝膠基質(zhì)混合物占組合物重量的76.5％，山竹果提取物占20％，D-α-生育酚乙酸酯占2.5％，甘油占1％。
該凝膠在與水接觸時(shí)形成液晶結(jié)構(gòu)。初步實(shí)驗(yàn)表明山竹果凝膠與對(duì)照組相比能有效減少導(dǎo)致牙周炎的微生物的百分?jǐn)?shù)。
實(shí)施例3采用與實(shí)施例1相同的方法和劑量，用醇提取法制備姜黃提取物，并將它摻入到凝膠基質(zhì)混合物中。該凝膠基質(zhì)混合物中甘油單油酸酯與甘油三酯(芝麻油)的重量比為6∶1，混合物中還包含D-α-生育酚乙酸酯作為抗氧化劑以及甘油。姜黃凝膠組合物中各物質(zhì)含量為甘油單油酸酯/甘油三酯凝膠基質(zhì)混合物占組合物重量的76.5％，姜黃提取物占20％，D-α-生育酚乙酸酯占2.5％，甘油占1％。
該凝膠在與水接觸時(shí)形成液晶結(jié)構(gòu)。初步實(shí)驗(yàn)表明姜黃凝膠與對(duì)照相組比能有效減少導(dǎo)致牙周炎的微生物的百分?jǐn)?shù)。
權(quán)利要求
1.一種用于輔助治療牙周炎的凝膠組合物，它包括(i)具有對(duì)抗牙周炎病原體的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，該提取物優(yōu)選地取自植物穿心蓮(Andrographis Paniculata)、山竹果(Garciniamangostana)和姜黃(Curcuma longa)中的一種或多種；(iii)含有甘油單油酸酯和甘油三酯混合物的凝膠基質(zhì)，其中組合物與牙齦液接觸時(shí)形成液晶結(jié)構(gòu)；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中甘油單油酸酯與甘油三酯的重量比范圍從2∶1到10∶1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的組合物，其中所含的抗微生物提取物占組合物重量的1％-15％。
4.根據(jù)前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的組合物，其中所含的甘油單油酸酯和甘油三酯混合物占組合物重量的80％-99％。
5.根據(jù)前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的組合物，該組合物是可生物降解的緩釋凝膠、薄片或軟膏。
6.根據(jù)前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的組合物，其中甘油三酯是選自芝麻油、向日葵油、大豆油和紅花油的一種或多種植物油。
7.根據(jù)前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的組合物，其中抗微生物提取物是從植物穿心蓮中提取的。
8.根據(jù)前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的組合物，進(jìn)一步包含抗氧化劑或防腐劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的組合物，其中所含的作為抗氧化劑的D-α-生育酚乙酸酯占組合物重量的0.5％-5％。
10.根據(jù)前述任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的組合物，進(jìn)一步包含甘油或膠原或者兩者都有。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的組合物，其中所含的甘油占組合物重量的0.1％-5％。
12.制備用作為治療牙周炎的輔助物的組合物的方法，它包括(i)制備具有對(duì)抗牙周炎病原體的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，該提取物優(yōu)選地來自于以下植物中的一種或多種穿心蓮(AndrographisPaniculata)，山竹果(Garcinia mangostana)和姜黃(Curcuma longa)；(ii)制備甘油單油酸酯和甘油三酯混合物作為凝膠基質(zhì)；(iii)將抗微生物提取物摻入到凝膠基質(zhì)中并混合，制成與牙齦液接觸時(shí)會(huì)形成液晶結(jié)構(gòu)的組合物。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中甘油單油酸酯與甘油三的重量比范圍從2∶1到10∶1。
14.根據(jù)權(quán)利要求12或13所述的方法，其中抗微生物提取物的摻入量為組合物重量的1％-15％。
15.根據(jù)權(quán)利要求12至14中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中甘油單油酸酯和甘油三酯混合物的摻入量為組合物重量的80％-99％。
16.根據(jù)權(quán)利要求12至15中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中將組合物制備成可生物降解的緩釋凝膠、薄片或軟膏。
17.根據(jù)權(quán)利要求12至16中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中甘油三酯是選自芝麻油、向日葵油、大豆油和紅花油的一種或多種植物油。
18.根據(jù)權(quán)利要求12至17中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，其中抗微生物提取物是從植物穿心蓮制備的。
19.根據(jù)權(quán)利要求12至18中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，進(jìn)一步包括以組合物重量的0.5％-5％的量摻入D-α-生育酚乙酸酯，作為抗氧化劑。
20.根據(jù)權(quán)利要求12至19中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的方法，進(jìn)一步包括以組合物重量的0.1％-5％的總量摻入甘油或膠原或甘油和膠原兩者。
21.根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的組合物用于制備治療牙周炎的輔助物的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種用于輔助治療牙周炎的組合物，該組合物為可生物降解的凝膠、薄片或軟膏，它包括(i)具有對(duì)抗牙周炎病原體的抗微生物或抗菌活性的抗微生物提取物，該提取物優(yōu)選地取自植物穿心蓮(AndrographisPaniculata)、山竹果(Garcinia mangostana)和姜黃(Curcuma longa)中的一種或多種；以及(ii)含有甘油單油酸酯和甘油三酯混合物的凝膠基質(zhì)。該組合物可生物降解，在與牙齦液接觸時(shí)形成液晶結(jié)構(gòu)，該液晶結(jié)構(gòu)可以使活性成分逐步地釋放，從而提供了緩釋劑型。
文檔編號(hào)A61K36/9066GK1416885SQ02154760
公開日2003年5月14日 申請(qǐng)日期2002年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月9日
發(fā)明者P·羅亞納潘圖, W·格利特薩納番, M·斯里拉特, C·阿莫查特 申請(qǐng)人:馬伊多爾大學(xué)