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抑制肝癌轉移的中藥制劑及其制備方法

發(fā)布時間:2025-05-02

專利名稱:抑制肝癌轉移的中藥制劑及其制備方法
技術領域
本發(fā)明涉及一種抑制肝癌轉移的中藥制劑,特別是抑制肝癌轉移的中藥制劑及其制備方法。
背景技術
肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是世界第6大腫瘤,近年來HCC發(fā)病率在歐洲和美國呈上升趨勢,我國為高發(fā)區(qū)。中醫(yī)藥防治HCC是我國治療HCC的特色和優(yōu)勢,近年來復方中藥制劑對HCC細胞的直接抑制,對細胞凋亡的影響,以及在提高機體免疫力等方面的分子機制研究進展迅速;復方中藥制劑預防和治療HCC的臨床療效觀察研究也取得了一定的進展,現(xiàn)將近5年中藥復方制劑防治HCC的研究進展做一綜述,為提高中醫(yī)藥治療早中期肝癌提供參考。原發(fā)性肝癌是世界上第六位最常見的癌癥和第三位最常見的癌癥死因。發(fā)展中國 家的原發(fā)性肝癌發(fā)病率和死亡率更高,我國發(fā)生的原發(fā)性肝癌就占了世界上肝癌總病例的一半以上。目前認為,乙型肝炎病毒、食物污染黃曲霉毒素BI、污染的飲用水和大量飲酒等與原發(fā)性肝癌的發(fā)生密切相關。在工業(yè)文明發(fā)達的今天,人們時刻面對各種環(huán)境壓力、環(huán)境污染,水、空氣以及化肥、農藥、汽車尾氣,食品添加劑、飲食不潔和經(jīng)常食用腌制熏烤的食品、吸煙、飲酒、噪音干擾及大氣放射物質等因素影響。這些各種外源性毒素通過不同途徑進入人的機體、危害健康,而機體新陳代謝功能的紊亂,極其容易把代謝中產生的各種廢物堆積停滯在代謝管道中,堵塞正常排泄通道,構成內源性毒素,誘發(fā)人體產生各種病狀。最終會造成機體的各種功能紊亂,如內分泌失調,脂肪代謝失調、免疫系統(tǒng)功能下降等,導致腫瘤的發(fā)生。由于肝癌是嚴重威脅人類健康的一類疾病,幾乎極少能夠治愈。因此,肝癌學一直是醫(yī)學研究的重點,尋找有效的抗腫瘤藥物與方法,徹底攻克肝癌是世界醫(yī)學界的重要研究課題。研究表明許多中藥具有抗肝癌作用,尤其是復方,具有多種作用成分和通過多種作用途徑產生抗腫瘤作用。近年來一些醫(yī)學機構和醫(yī)務工作者發(fā)表了較多利用中草藥治療肝病或肝癌的公開文獻報道,例如
I、中國專利,名稱一種抗癌消瘤排毒湯申請(專利)號CN200410038090. X申請日2004. 05. 19,公開(公告)號CN1698684公開(公告)日2005.11.23申請(專利權)人鐘偉地址廣東省廣州市林和西路89號廣州市友誼醫(yī)院門診部發(fā)明(設計)人鐘偉摘要一種抗癌消瘤排毒湯,采用具有清熱解毒、活血化瘀、抗癌消瘤功效的中藥,其中以蟾蜍、土鱉、水蛭、斑蝥、壁虎等動物藥為主藥,輔以黃芪、人參、靈芝、三七、白術、三棱、莪術、桃仁、紅花、蛇舌草等中草藥煎制而成。本發(fā)明既可直接殺滅腫瘤細胞,破壞病灶結合,又可抗病毒、消炎、破壞腫瘤血管防止細胞轉移,抗細胞突變、改善細胞信息傳遞途徑,逆轉腫瘤細胞的耐藥性,同時提高機體免疫功能,從而有效治療各種良惡性腫瘤,尤其治療肝癌、肺癌、乳腺癌效果最佳。主權項I. 一種抗癌消瘤排毒湯,采用具有清熱解毒、活血化瘀、抗癌消瘤功效的中藥煎成,其特征在于它以動物藥為主藥,輔以其它中草藥煎成,各藥物的具體用量為蟾蜍5g、土鱉10g、水蛭2g、斑蝥O. 04g、壁虎6g、黃芪30g、人參10g、靈芝15g、三七10g、白術20g、三棱8g、莪術8g、桃仁10g、紅花6g、蛇舌草30g。
2、中國專利,名稱一種抗癌中藥散劑及其制備方法申請(專利)號CN02116298.0申請日2002. 04. 01,公開(公告)號CN1448164,公開(公告)日2003.10.15申請(專利權)人楊文秀,地址黑龍江省齊齊哈爾市鐵鋒區(qū)鐵路北局宅北紡織路18 — 2樓3 —12號發(fā)明(設計)人楊文秀摘要一種抗癌中藥散劑及其制備方法,其中藥散劑是由飯前服用的組方I和飯后服用的組方II組成,其組方I的組分有乳香、沒藥、當歸、陳皮、大黃、芒硝、赤芍、皂角、土蟲、甲珠等21味純中藥。其組方II的組分有人參、白術、茯苓、甘草、當歸、獨活、羌活、黃芪、附子等13味純中藥。其制備方法是將組方I所需純中藥按配方分別進行精選(不含芒硝)用清水漂洗后,在100°C的條件下進行烘干,通過紫外線滅菌30分鐘,冷卻后按配方比例混合粉碎成120目細粉,再將芒硝組份研制成120目細粉,與上述組方I藥物粉碎好的細粉混合攪拌均勻后,裝入膠囊(0.5g/粒),再裝入瓶中密封。組方II無芒硝,其制備方法與組方I類似。本藥物具有提高機體免疫力、促進代謝,抑制或溶解癌細胞功能,對肝癌等多種癌癥有較好療效,服用方便,無毒副作用。主權項I. 一·種抗癌中藥散劑,其特征是它是由飯前服用的組方I和飯后服用的組方II組成,其組分配比(重量份)如下組方I (飯前服用)乳香2. 5-3%,沒藥2. 5-3%,當歸I. 8_2%陳皮
2.5-3 %,大黃 6. 4-6. 8 %,芒硝 4. 5-5 %赤芍 4. 5-5%,皂角 4. 5-5%,土蟲 5. 4-5. 8%甲珠8-10%,白芷O. 8-1%,花粉2. 5-3%藏紅花4. 5-5%,雙花8-10%,木香8-10%防風 1.8-2%,白芨 8-10%,柴胡 I. 3-1. 5%萎仁 4. 5-5%,萎皮 4. 5-5%,三七 4. 5-5% ;組方II (飯后服用)人參8-9%,白術11-12%,茯苓8-9%甘草3-4%,當歸3_4%,獨活 4-4.5%,羌活 3-4%,黃芪 17-18%,白芍 11-12%,附子 2. 5-3%,桂枝 11-12%,巴戟 5-6%,苡仁 8-9%。3、中國專利,名稱一種治療肝硬化病證的中藥組合物及其制備方法,申請(專利)號CN200910309349. 2 申請日2009. 1L05 公開(公告)號CN101869686A,公開(公告)日2010.10.27申請(專利權)人泰一和浦(北京)中醫(yī)藥研究院有限公司,地址北京市豐臺區(qū)豐管路16號9號樓2027B發(fā)明(設計)人王峰摘要一種治療肝硬化病證的中藥組合物及其制備方法,中藥組合物主要由以下原料藥組成血竭、穿山甲、川芎、赤芍、白芍、茯苓、白術、桃仁、紅花、靈芝、血竭、元胡、當歸、三棱、莪術、陳皮、枳實、大黃、人參、生黃芪、熟地黃、葛根、龜板膠、鹿角霜、鱉甲膠、生地黃、玄參、山茱萸、烏藥、枳殼、香附、陳皮、木香、沉香、厚樸、吳茱萸、薤白、九香蟲。本發(fā)明中藥組合物可按照常規(guī)的中藥制劑方法制備成任何一種常用口服制劑。本發(fā)明可顯著改善疲倦乏力、食欲減退及消化不良為主,可有惡心、厭油、腹部脹氣、上腹不適、隱痛及腹瀉、一般情況與營養(yǎng)狀況較差,消瘦乏力,精神不振,重癥者衰弱而臥床不起,并伴隨皮膚干枯粗糙,面色灰暗黝黑,貧血、舌炎、口角炎、夜盲、多發(fā)性神經(jīng)炎及浮腫以及水及電解質紊亂、門脈高壓等癥狀,臨床療效確切,療效顯著,見效迅速。4、中國專利,申請?zhí)?01110039130. 2申請日2011. 02. 17名稱抑制肝癌的中藥制劑及其制備方法申請(專利權)人鄧鑫,地址廣西壯族自治區(qū)南寧市華東路10號瑞康醫(yī)院發(fā)明(設計)人鄧鑫;梁??;吳發(fā)勝;張亞萍摘要本發(fā)明涉及一種抑制肝癌的中藥制劑及其制備方法,其原料包括人參、黃芪、白術、龜板、白花蛇舌草、鱉甲、白芍、附子、杜仲和炙甘草等,制備方法是取人參、炙甘分別碾成粉末,再將各組分用水或乙醇提取,濃縮,合并,加入填充劑,制成固體制劑或液體制劑產品,本中藥制劑攻補兼施,標本兼顧,消痛散結,共奏滋陰養(yǎng)血、益氣復脈和調節(jié)人體免疫系統(tǒng)功能,對抵抗腫瘤、保持排毒管道暢通,抑制癌細胞的生長均有作用。由于本發(fā)明中藥組合物基本采用了國家藥典規(guī)定的藥食同源藥物進行組合,所以具有費用低廉、基本無毒副作用等優(yōu)點
發(fā)明內容
為達到此目的,本發(fā)明人對傳統(tǒng)中醫(yī)理論進行研究,在祖?zhèn)髅胤胶驮瓕@?01110039130. 2的基礎上,加以補充和整理,挖掘并開發(fā)出一種調節(jié)內臟功能失調,費用低廉、基本無毒副作用的抑制肝癌轉移的的中藥制劑及其制備方法。本發(fā)明抑制肝癌轉移的的中藥制劑有效成分是由以下重量份數(shù)的中藥原料制成的
黃芪10 — 30 ;
黨參10 — 20 ;
白術5 — 15 ;
白花蛇舌草20 — 40 ;
丹參5 — 15 ;
枸杞10 — 20 ;
白芍5 — 15 ;
麥冬5 — 15 ;
龜板10 — 25 ;
鱉甲10 — 25;
陳皮5 — 15 ;
炎甘草5 — 15。
據(jù)中藥文獻記載,以上所述的中藥各成份的分析如下
黃苗,拉丁名Leguminosae補氣固表,利尿托毒,益氣補中。黃苗是豆科植物,它是一味常用的中藥。它的主要藥理作用是“益氣固表”,可以“利水”,也可以“托毒生肌”。黨參,別名上黨人參、防風黨參、黃參、防黨參、上黨參、獅頭參、中靈草、黃黨,黨參屬植物,桔梗科,英文名Root of Pilose Asiabell, Pilose Asiabell Root ModerateAsiabell Root Szechwon Tangshen Root,拉丁學名Root of Pilose Asiabell,性味歸經(jīng)性平,味甘、微酸。歸脾、肺經(jīng)。具有補中益氣,健脾益肺的功效。主治脾胃虛弱,食少便溏,倦怠乏力,肺虛喘咳,氣短懶言,自汗,血虛萎黃,口渴。用于脾肺虛弱,氣短心悸,食少便溏,虛喘咳嗽,內熱消渴等?!侗静輳男隆酚涊d“補中益氣、和脾胃、除煩渴。中氣微弱,用以調補,甚為平妥。”
黃芪和黨參均屬補氣良藥,但黨參偏重于大補元氣,回陽救逆,常用于虛脫、休克等急癥,效果較好。而黃芪則以補虛為主,常用于體衰日久、言語低弱、脈細無力者。黃芪具而補而不膩的特點,若與黨參,人參等補藥配伍則效果更好。黃芪可單味使用,也可與其它藥物配伍應用。白術,拉丁名RhizomaAtractylodis Macrocephalae,功能主治健脾益氣,燥濕利水,止汗,安胎。用于脾虛食少,腹脹泄瀉,痰飲眩悸,水腫,自汗,胎動不安。據(jù)報道,小鼠灌胃白術水煎液可防治四氯化碳所致的肝損傷,減輕肝糖原減少以及肝細胞變性壞死,促進肝細胞增長,使升高的ALT下降。白花蛇舌草(學名Hedyotis diffusa)是菌草科耳草屬的植物。其中成藥味苦、淡,性寒。主要功效是清熱解毒、消痛散結、利尿除濕。尤善治療各種類型炎癥,在體外(相當生藥6g/ml)對急性淋巴細胞型、粒細胞型、單核細胞型以及慢性粒細胞型的腫瘤細胞有較強抑制作用。丹參,別名血生根、赤參、血參、紅根英文名Dan — ShenRoot拉丁文RadixSalviae Miltiorrhizae ;為雙子葉植物唇形科,干燥根及根莖,功能主治祛瘀止痛,活血通經(jīng),清心除煩。用于月經(jīng)不調、經(jīng)閉痛經(jīng)、癥瘕積聚、胸腹刺痛、熱痹疼痛、瘡瘍腫痛、肝脾腫大、心絞痛。
枸杞,別名枸杞菜、紅珠仔刺、牛右力、狗牙子,是茄科枸杞屬的多分枝灌木植物,英文名Barbary Wolfberry Fruit ,拉丁文Lycium chinense,具有補腎益精,養(yǎng)肝明目,補血安神,生津止渴,潤肺止咳。治肝腎陰虧,腰膝酸軟,頭暈,目眩,目昏多淚,虛勞咳嗽,消渴,遺精。白茍,白茍藥(學名Paeoniasterniana Fletcher in Journ.)也稱白花茍藥,是毛茛科芍藥屬植物,藥理作用1、對心血管系統(tǒng)的作用白芍具有擴張冠狀動脈,降低血壓作用(d-兒茶精和沒食子酸乙酯有抗血栓和抗血小板聚集作用),2、護肝作用白芍對四氯化碳、黃曲霉毒素BI、D-半乳糖胺所致肝損傷有明顯保護作用,3、解痙作用白芍對腸管和在位胃運動有抑制作用,能顯著對抗催產素引起的子宮收縮,4、鎮(zhèn)痛作用白芍能抑制小鼠扭體、撕叫、熱板反應,對嗎啡抑制扭體反應有協(xié)同作用,并能對抗戊四唑所致驚厥,5、抗菌作用。白芍對肝臟有保護作用,白芍提取物對D-半乳糖胺所致肝損傷和SGPT升高有明顯的對抗作用,能使SGPT降低,并使肝細胞的病變和壞死恢復正常.白芍的乙醇提取物能使黃曲霉素B I引起的大鼠急性肝損傷所表現(xiàn)出來的乳酸脫氫酶及同功酶的總活性升高得以降低.白芍總甙可抑制四氯化碳所致小鼠血漿GPT和乳酸脫氫酶升高,并對肝臟組織噬酸性變性、壞死有一定的對抗作用.有人認為,四氯化碳所致的肝損傷是因細胞膜結構發(fā)生過氧化作用而破壞,使血中谷丙轉氨酶和乳酸脫氫酶升高,白芍總甙可能對肝細胞損傷具有保護作用,因此可使轉氨酶降低。麥冬,又名麥門冬、沿階草、書帶草;百合科沿階草屬多年生常綠草本植物;拉丁學名O. japonicus (L. f. ) Ker-Gawl.,性味歸經(jīng)甘,微苦,微寒。歸心、肺、胃經(jīng)。功效
I.養(yǎng)陰清熱治療陰虛內熱或熱病病傷津、心煩口渴。2.潤肺止咳治療燥熱傷肺所致的咳嗽、痰稠、氣逆。功能主治養(yǎng)陰生津,潤肺清心。用于肺燥干咳。虛癆咳嗽,津傷口渴,心煩失眠,內熱消渴,腸燥便秘;咽白喉。治肺燥干咳,吐血,咯血,肺痿,肺癰,虛勞煩熱,消渴,熱病津傷,咽干口燥,便秘。龜板為龜科動物chinemys reevesii的腹甲及背甲。功用為滋腎潛陽,益腎健骨,養(yǎng)血補心。主治1.陰虛陽亢,陰虛內熱,虛風內動。2.腎虛骨痿,囟門不合。3.陰血虧虛,驚悸,失眠,健忘。功效對免疫功能的作用,實驗證明龜鹿補腎口服液及丸劑給小鼠口服,可提高其網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)的吞噬功能,顯著增加吞噬指數(shù)和吞噬系數(shù);亦有使正常及免疫抑制狀態(tài)下小鼠的脾臟、胸腺增重的作用,對環(huán)磷酰胺引起的末梢白細胞減少有一定的保護作用.文獻報道,龜板有抗腫瘤作用能提高機體抗腫瘤的免疫能力,其提取物對肉瘤S180、艾氏腹水瘤和腹水型肝癌有抑制作用.
鳘甲Carapax Amydae,為鳘科動物鳘Trionyx sinensis Wiegmann的背甲。性味歸經(jīng)咸,微寒。歸肝、腎經(jīng)。功能主治滋陰潛陽,軟堅散結,退熱除蒸。用于陰虛發(fā)熱,勞熱骨蒸,虛風內動,經(jīng)閉,癥瘕,久瘧瘧母。有報告指出,鱉原粉末及鱉甲粉末對移植實質性癌有抑制作用,能使癌腫瘤直徑顯著減小,腫瘤重量顯著減輕;但對腹水癌則無顯著作用.亦有報告指出,用以鱉甲為主的復方中藥鱉甲散丸藥的水溶液上清液,給癌細胞定量接種后,觀察其對癌細胞生長的作用情況,結果表明鱉甲散上清液對小鼠淋巴細胞白血病(L1210)、HL-60、和胃癌803細胞生長均有抑制作用。陳皮,為蕓香科植物,異名橘皮《神農本草經(jīng)》,黃橘皮《雞峰普濟方》,紅皮《湯液本草》,橘子皮《滇南本草》,廣橘皮《得宜本草》。拼音:Chenpi英文Dried TangerinePeel拉丁文Pericarpium Citri Reticulatae性味、歸經(jīng)辛、苦,溫。歸牌、肺經(jīng)。陳皮的功效I.用于胸腹脹滿等癥。橘皮辛散通溫,氣味芳香,長于理氣,能入脾肺,故既·能行散肺氣壅遏,又能行氣寬中,用于肺氣擁滯、胸膈痞滿及脾胃氣滯、脘腹脹滿等癥。常與木香、枳殼等配伍應用。2.用于濕阻中焦、脘腹痞脹、便溏泄瀉,以及痰多咳嗽等癥。橘皮苦溫燥濕而能健脾行氣,故常用于濕阻中焦、脘腹脹悶、便溏苔膩等癥,可配伍蒼朮、厚樸同用。又善于燥濕化痰,為治濕痰壅肺、痰多咳嗽的常用要藥,每與半夏、茯苓同用。3.用于脾虛飲食減少、消化不良,以及惡心嘔吐等癥。本品燥濕而能健脾開胃,適用于脾胃虛弱、飲食減少、消化不良、大便泄瀉等癥,常與人參、白朮、茯苓等配合應用。因其既能健脾,又能理氣,故往往用作補氣藥之佐使,可使補而不滯,有防止壅遏作脹作用。此外,橘皮又能和中,可治胃失和降、惡心嘔吐,若胃寒嘔吐,可與生姜同用;胃熱嘔吐,又可配伍竹茹、黃連等藥同用。陳皮的作用具理氣降逆、調中開胃、燥濕化痰之功。主治脾胃氣滯濕阻、胸膈滿悶、脘腹脹痛、不思飲食、嘔吐穢逆、二便不利、肺氣阻滯、咳嗽痰多,亦治乳癰初起。經(jīng)多年研究,現(xiàn)已知陳皮具有許多藥理作用。炙甘草(RADIX GLYCYRRHIZAE PREPARATA)系豆科植物,炙甘草是用蜜烘制的甘草。功能與主治補脾和胃,益氣復脈。用于脾胃虛弱,倦怠乏力,心動悸,脈結代,可解附子毒。主要功效補陰、補血、陰陽并調。以上諸藥合用,攻補兼施,消痛散結,標本兼顧,共奏滋陰養(yǎng)血、益氣復脈、活血止痛和調節(jié)消化系統(tǒng)和人體免疫系統(tǒng)功能,對抵抗腫瘤、保持排毒管道暢通,抑制癌細胞的生長均有作用。中草藥治療惡性腫瘤,足整體治療相辨證施治,也就是整體與局部相結合、既看到機體對病邪的抵御能力,又看到局部病變對機體的影響,在辨病與辨證的基礎上,通過一些針對性強的特殊藥物的配伍組方,恰到好處地進入機體,調節(jié)氣血、陰陽、津液的平衡。藥物分子經(jīng)過物理反應和化學反應進入全身,有的吸附在細胞的表面、腐蝕圍殺癌細胞,這可稱作“包圍戰(zhàn)”;有的藥物組方,通過不同的作用,分割癌細胞,再各個擊破,這可稱作“殲擊戰(zhàn)”;有的通過藥物本身的作用,附以協(xié)同作用的藥物,可破壞癌細胞的血液循環(huán),解除和改變戀體局部的血運,控制癌細胞的增殖,這可稱作“策反戰(zhàn)”;有的結合機體狀況,通過藥物來調動、增強、提高機體免疫細胞的功能去吞噬癌細胞,這可稱作“免疫戰(zhàn)”;有的通過藥物的性味,加用局部用藥,用溫度去破壞崩細胞的結構和生成,這可稱作“干擾戰(zhàn)”;有的藥物能調節(jié)氣血,能使氣血運行正常,隔離癌細胞,使之排出體外,這可稱作”驅逐戰(zhàn)”;有的能影響癌細胞內酶使其成為“端脂”,使癌細胞染色體、基因壞死,這可稱作“破襲戰(zhàn)”;有的能幫助免疫細胞染色體、基因復原,這可稱作“拉攏戰(zhàn)”;有的能使氣血能量平均分配.饑餓癌細胞,使之恢復為正常細胞,這可稱作“平衡戰(zhàn)”。所以,本發(fā)明的中藥制劑遵循了祖國醫(yī)學整體現(xiàn)念和辨證施治原則,從分子水平研究探討惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的規(guī)律.并采用活血化瘀、軟堅散結、清熱解毒、扶正培本等具有中醫(yī)藥特色的“作戰(zhàn)”手段,做到“用藥如用兵”,才能“知己知彼,百戰(zhàn)百勝”,在征戰(zhàn)癌癥的攻堅戰(zhàn)中,得心應手,建立奇功,使中醫(yī)藥顯示出不可低估的巨大作用。本發(fā)明的中藥制劑與本申請人的中國專利201110039130. 2申請日2011. 02. 17名稱抑制肝癌的中藥制劑及其制備方法的技術內容相比,藥物增加了幾種黨參、枸杞、麥冬、丹參和陳皮。使得整個中藥具有補中益氣,健脾益肺,養(yǎng)陰生津,潤肺清心,祛瘀止痛, 活血通經(jīng),益肝利脾、辛散通溫,氣味芳香,長于理氣,能入脾肺等作用,控制住了肝癌繼續(xù)生長,就可以抑制癌細胞向其它器官轉移蔓延。本發(fā)明抑制肝癌轉移的的中藥制劑可以加入符合醫(yī)藥標準的填充劑或溶液,制成醫(yī)學上的固體制劑或液體制劑,例如片劑、膠囊、顆粒、丸劑、口服液或糖漿劑等,以下分別介紹幾種劑型的制備方法
所述的固體制劑制備方法如下
取黨參碾成粉末,備用;將龜板、鱉甲置于銅鍋中,加水淹沒過面,用文火加熱,保持微沸5 — 12小時,傾出煎液,先后共煎3-5次,直至充分煎出膠汁為度,然后過濾澄清,合并各次所煎膠液,過濾除去沉淀雜質,濃縮收膠,將過濾后的膠汁置銅鍋中用文火加熱濃縮,不斷攪拌,以防焦化,待濃縮至“掛旗”后收膠,將膠傾入凝膠盤內,使之自然冷凝,為加快膠汁凝固,也可加入5%-10%阿膠,取出凝固好的膠塊,用切膠刀切成小片,備用。黃芪、白術、白花蛇舌草、丹參、枸杞、白芍、麥冬、陳皮和炙甘草用體積濃度為50 — 90%的乙醇提取兩次,合并提取液,備用;過濾后濃縮,然后回收乙醇,加入龜板、鱉甲膠汁、并濃縮,得干浸膏,再與上述的黨參粉末合并,混合均勻,加入填充劑,制成膠囊或顆粒劑、片劑,得到產品;或者加入蔗糖或蜂蜜,混合均勻,做成丸劑。以上所述的口服液的制備方法是取黨參、炙甘草,分別加水煮2-4小時,備用;將龜板、鱉甲置于銅鍋中,加水淹沒過面,用文火加熱,保持微沸5 — 12小時,傾出煎液,先后共煎3-5次,直至充分煎出膠汁為度,然后過濾澄清,合并各次所煎膠液,過濾除去沉淀雜質,再濃縮收膠,將過濾后的膠汁置銅鍋中用文火加熱濃縮,不斷攪拌,以防焦化,待濃縮至“掛旗”后收膠,將膠傾入凝膠盤內,使之自然冷凝,為加快膠汁凝固,也可加入5 %-10 %阿膠,取出凝固好的膠塊,用切膠刀切成小片,備用。黃芪、白術、白花蛇舌草、丹參、枸杞、白芍、麥冬和陳皮用體積濃度為50 - 90%的乙醇提取兩次,合并提取液,備用;過濾后回收乙醇,濃縮,然后,加入龜板、鱉甲膠汁、并濃縮,得干浸膏,再與上述的黨參、炙甘草溶液合并,加入適量食用防腐劑,和加入干浸膏總藥物重量3 — 5倍的純凈水,制成口服液,得到產品。本發(fā)明的有益效果是
本發(fā)明治療早中期肝癌的中藥制劑攻補兼施,標本兼顧,消痛散結,共奏滋陰養(yǎng)血、益氣復脈和調節(jié)人體免疫系統(tǒng)功能,抑制癌細胞的生長均有作用。
具體實施例方式以下
具體實施例方式 實施例一
取黨參10千克碾成粉末,備用;將10千克龜板、10千克鱉甲置于銅鍋中,加水淹沒過面,用文火加熱,保持微沸5 - 12小時,傾出煎液,先后共煎3-5次,直至充分煎出膠汁為度,然后過濾澄清,合并各次所煎膠液,過濾除去沉淀雜質,濃縮收膠,將過濾后的膠汁置銅鍋中用文火加熱濃縮,不斷攪拌,以防焦化,待濃縮至“掛旗”后收膠,將膠傾入凝膠盤內,使之自然冷凝,為加快膠汁凝固,也可加入5% -10%阿膠,取出凝固好的膠塊,用切膠刀切成小片,備用。黃苗10千克、白術5千克、白花蛇舌草20千克、丹參5千克、枸杞10千克、白芍5千克、麥冬5千克、陳皮5千克和炙甘草5千克用體積濃度為50 - 90%的乙醇提取兩次,合并提取液,備用;過濾后濃縮,然后回收乙醇,加入龜板、鱉甲膠汁、并濃縮,得干浸膏,再與上述的黨參粉末合并,混合均勻,加入填充劑,制成膠囊。 實施例二
取黨參12千克碾成粉末,備用;將13千克龜板、13千克鱉甲置于銅鍋中,加水淹沒過面,用文火加熱,保持微沸5 - 12小時,傾出煎液,先后共煎3-5次,直至充分煎出膠汁為度,然后過濾澄清,合并各次所煎膠液,過濾除去沉淀雜質,濃縮收膠,將過濾后的膠汁置銅鍋中用文火加熱濃縮,不斷攪拌,以防焦化,待濃縮至“掛旗”后收膠,將膠傾入凝膠盤內,使之自然冷凝,為加快膠汁凝固,也可加入5% -10%阿膠,取出凝固好的膠塊,用切膠刀切成小片,備用。黃芪14千克、白術7千克、白花蛇舌草25千克、丹參7千克、枸杞13千克、白芍7千克、麥冬7千克、陳皮7千克和炙甘草7千克用體積濃度為50 - 90%的乙醇提取兩次,合并提取液,備用;過濾后濃縮,然后回收乙醇,加入龜板、鱉甲膠汁、并濃縮,得干浸膏,再與上述的黨參粉末合并,混合均勻,加入填充劑,制成片劑。實施例三
取黨參15千克碾成粉末,備用;將15千克龜板、15千克鱉甲置于銅鍋中,加水淹沒過面,用文火加熱,保持微沸5 - 12小時,傾出煎液,先后共煎3-5次,直至充分煎出膠汁為度,然后過濾澄清,合并各次所煎膠液,過濾除去沉淀雜質,濃縮收膠,將過濾后的膠汁置銅鍋中用文火加熱濃縮,不斷攪拌,以防焦化,待濃縮至“掛旗”后收膠,將膠傾入凝膠盤內,使之自然冷凝,為加快膠汁凝固,也可加入5% -10%阿膠,取出凝固好的膠塊,用切膠刀切成小片,備用。黃芪18千克、白術10千克、白花蛇舌草28千克、丹參10千克、枸杞15千克、白芍10千克、麥冬10千克、陳皮10千克和炙甘草10千克用體積濃度為50 - 90%的乙醇提取兩次,合并提取液,備用;過濾后濃縮,然后回收乙醇,加入龜板、鱉甲膠汁、并濃縮,得干浸膏,再與上述的黨參粉末合并,混合均勻,加入填充劑,制成顆粒劑。實施例四
取黨參18千克碾成粉末,備用;將20千克龜板、20千克鱉甲置于銅鍋中,加水淹沒過面,用文火加熱,保持微沸5 - 12小時,傾出煎液,先后共煎3-5次,直至充分煎出膠汁為度,然后過濾澄清,合并各次所煎膠液,過濾除去沉淀雜質,濃縮收膠,將過濾后的膠汁置銅鍋中用文火加熱濃縮,不斷攪拌,以防焦化,待濃縮至“掛旗”后收膠,將膠傾入凝膠盤內,使之自然冷凝,為加快膠汁凝固,也可加入5% -10%阿膠,取出凝固好的膠塊,用切膠刀切成小片,備用。黃芪25千克、白術12千克、白花蛇舌草30千克、丹參12千克、枸杞18千克、白芍12千克、麥冬12千克、陳皮12千克和炙甘草12千克用體積濃度為50 — 90%的乙醇提取兩次,合并提取液,備用;過濾后濃縮,然后回收乙醇,加入龜板、鱉甲膠汁、并濃縮,得干浸膏,再與上述的黨參粉末合并,混合均勻,加入填充劑,制成丸劑。實施例五
取黨參20千克碾成粉末,備用;將25千克龜板、25千克鱉甲置于銅鍋中,加水淹沒過面,用文火加熱,保持微沸5 - 12小時,傾出煎液,先后共煎3-5次,直至充分煎出膠汁為度,然后過濾澄清,合并各次所煎膠液,過濾除去沉淀雜質,濃縮收膠,將過濾后的膠汁置銅鍋中用文火加熱濃縮,不斷攪拌,以防焦化,待濃縮至“掛旗”后收膠,將膠傾入凝膠盤內,使之自然冷凝,為加快膠汁凝固,也可加入5% -10%阿膠,取出凝固好的膠塊,用切膠刀切成小片,備用。黃芪30千克、白術15千克、白花蛇舌草40千克、丹參15千克、枸杞20千克、白芍15千克、麥冬15千克、陳皮15千克和炙甘草15千克用體積濃度為50 — 90%的乙醇提取兩次,合并提取液,備用;過濾后濃縮,然后回收乙醇,加入龜板、鱉甲膠汁、并濃縮,得 干浸膏,混合均勻,加入適量食用防腐劑,和加入干浸膏總藥物重量5倍的純凈水,制成口服液,得到產品。本發(fā)明中藥制劑抑制肝癌試驗
以下是本發(fā)明中藥制劑的應用實例
一、本發(fā)明實施例做出的本發(fā)明藥物進行的體外抗腫瘤實驗
摘要目的用體外細胞培養(yǎng)法研究本發(fā)明藥物提取物對人肝癌細胞株Hele7404生長的抑制情況。結果本發(fā)明藥物提取物對人肝癌細胞株Hele7404的生長有抑制作用。藥物濃度低于(O. 5Pg/ml),對腫瘤細胞的作用不明顯。隨著藥物濃度升高至5. OPg/ml,腫瘤細胞株的生長受到明顯抑制。結論本發(fā)明藥物提取物在體外具有抑制腫瘤作用。
材料與方法 I材料
1.I本發(fā)明藥物提取物濃縮部分,藥液臨用前用DMSO溶解后無菌過濾備用。I. 2腫瘤細胞株人肝癌細胞株Hele7404由廣西醫(yī)科大學藥理教研室提供。I. 3試劑MTT (四甲基噻唑藍)為德國Sigma公司產品,批號:020609 ;FBS (胚胎牛血清)為美國Hyclone公司產品,批號0405 ;RPMI1640和DMEM培養(yǎng)基為美國GIBCO公司產品,批號1120708和0311 ;Trypsin (胰蛋白酶)由天津市灝洋生物制品有限責任公司提供,批號200503 ;DMS0 (二甲基亞砜)由天津匯英化學試劑有限公司提供,批號20030526。I. 4實驗儀器CO2培養(yǎng)箱(ThermO Forma),美國產。倒置顯微鏡(Olympus),日本產。酶標儀(Biocell),澳地利產。2實驗方法
2.I MTT法參考文獻報道,在96孔培養(yǎng)板(NUNC)中每孔加入200 μ I (含有5000個/ml腫瘤細胞)含10% FBS的RPMI1640培養(yǎng)基的細胞懸液(除NG108-15細胞用含10% FBS的DMEM培養(yǎng)基外),置37°C 10%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后,實驗組分別加入最終濃度O. 5 Ug/ml、I. Oug/ ml、5. Oug/ ml的蒲葵提取物的培養(yǎng)液,對照組則加入等濃度等體積溶劑的培養(yǎng)液,每組4孔,重復4次。置37°C,10%C02培養(yǎng)箱培養(yǎng)5天后,棄去上清液,加入200 μ I/孔新鮮配制的含O. 2mg/ml MTT的無血清培養(yǎng)液,37°C繼續(xù)培養(yǎng)4h.棄上清液,加入200 μ IDMSO,振蕩混勻后,在酶標儀上以波長為550nm,參比波長為450 nm測定OD值.計算結果·
按下式計算藥物對腫瘤細胞生長的抑制率.
腫瘤細胞生長抑制率% = (I-實驗組平均OD值/對照平均OD值)X 100%
2.2集落形成法取對數(shù)生長期的貼壁細胞(Hela、SGC790UB16)用10%FBS的RPMI1640培養(yǎng)液和NG108 - 15用10%FBS的DMEM培養(yǎng)液配成500個/ml細胞懸液,接種于35mm培養(yǎng)皿(NUNC)中,4個為一組,每個2ml;實驗組加入終濃度為O. 5 ug /ml、I. Oug/ ml >5. Oug/ ml的蒲葵提取物的細胞懸液200ul。對照組加入等濃度等體積溶劑的細胞懸液200ul.置5%0)2的37°〇培養(yǎng)箱中靜置7d;棄去培養(yǎng)液,用瑞氏_姬姆薩染色后計數(shù)含50個細胞以上的細胞集落。對懸浮細胞(L1210和P388DJ用10%FBS的RPMI1640 培養(yǎng)液配成1000個/ml細胞懸液,置37°C預溫;取35mm培養(yǎng)皿(NUNC),4個為一組,實驗組分別加入濃度為O. 5 ug /ml、1.0ug/ ml >5. Oug/ ml的蒲葵提取物,對照組則加入等體積的溶劑;取已融化的5%瓊脂液I份,加入到9份37°C含15%FBS的新鮮RPMI1640培養(yǎng)液中,搖勻加入平皿中,每個1ml,置室溫使其凝固;取預溫的細胞懸液按每9. 4ml加5%瓊脂0.6ml的比例混勻,加到已鋪底層瓊脂的平皿中,每個lml,置37°C、5%C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7d;在顯微鏡下計數(shù)含50個細胞以上的細胞集落。按下列公式計算藥物對細胞集落形成抑制百分率
腫瘤細胞集落形成抑制百分率% = (I-實驗組細胞集落數(shù)/對照組細胞集落數(shù))X100%
2.3生長曲線法將Hele7404細胞接種于含10% FBS的RPMI1640培養(yǎng)基,NG108-15貝U用含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基,分別配成IOX IO3個/ml的細胞懸液,然后加入96孔培養(yǎng)板中,每孔200μ1,實驗組加入最終濃度為O. 5 ug /ml、1.0ug/ ml >5. Oug/ ml的提取物,對照組加入等濃度等體積溶劑.每種細胞每濃度設三孔,重復4次,置10%C0237°C溫箱中培養(yǎng),然后按0d、ld、2d、3d、4d、5d、6d、7d各取樣40μ 1,加入0. 4%臺盼藍液10μ 1,計數(shù)活細胞數(shù)。每孔計數(shù)4次,取均值,再累計3孔均值,根據(jù)細胞濃度值的對數(shù)值與時間作用繪成圖,即為細胞生長曲線.
2.4統(tǒng)計學處理以SPSS 10. O統(tǒng)計軟件分析,兩組間的均數(shù)比較采用t檢驗。3.實驗結果
結果顯示,提取物對人肝癌細胞株Hele7404有抑制作用。
集落形成法觀察不同濃度蒲葵提取物對腫瘤細胞抑制作用。結果見表2。表I不同濃度提取物對腫瘤細胞抑制的影響(%)
提取物濃度(Mg/ ml)
組別---
0.51.05.0
Hele 4040,85±2J334J2±7.04A 64.3
注:與對照組比較Ap〈0. 05,AAP<0. 01,AAAP<0. 005,AAAAP<0. 001
由圖可知,蒲葵提取物作用于腫瘤細胞株P388D1后,通過藥物組與對照組比較發(fā)現(xiàn),濃度為I. OPg/ ml時己能看出藥物對腫瘤細胞有著較明顯的抑制殺傷作用。當藥物濃度為5. 0μδ/ ml時,細胞培養(yǎng)到第3天己表現(xiàn)出對細胞有較強的抑制殺傷作用,到第4天以后細胞大量死亡。4、討論
本實驗通過采用實驗方法,研究提取物在體外抗腫瘤作用,其抑制率隨著藥物濃度增加而相應增高。細胞生長曲線法結果所顯示結果與MTT法和集落形成法的結果相吻合。提示提取物在體外具有抗腫瘤細胞作用。MTT法、集落形成法、生長曲線法和Hoechst 33258熒光染色法是觀察體外抗腫瘤活性的常用方法,尤其MTT法快速簡便,常作為抗腫瘤藥的體外初篩試驗,本發(fā)明采用幾種實驗方法的聯(lián)合應用增加了實驗結果的可靠性。對惡性腫瘤目前尚無十分理想的治療藥物。近年來,從天然植物中尋找新的抗腫·瘤藥物己成為新藥研究的主要發(fā)展
二、探討本發(fā)明中藥制劑對肝癌的抑制作用。本發(fā)明人實驗發(fā)現(xiàn),用黃芪、黨參、白術、白花蛇舌草、丹參、枸杞、白芍、麥冬、龜板、鱉甲、陳皮和炙甘草制成的制劑可對小鼠活體腹水H22肝癌細胞有較強的抑制作用。I材料與方法
I. I昆明種小鼠,6周齡,21只,雄性BALB / C小鼠,隨機分為3組,每組7只,體重18 22 g,購于廣西醫(yī)科大學實驗動物中心。I. 2細胞培養(yǎng)
腹水型H22肝癌細胞株,由廣西中醫(yī)學院提供,培養(yǎng)于含10%胎牛血清的RPMI1640 (GIBC0公司)培養(yǎng)液中,置于CO2濃度為5%、相對濕度為95%、溫度為37°C的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細胞傳代后培養(yǎng)48、96 h的貼壁細胞為對數(shù)生長期細胞,取傳代后48 h細胞。I. 3藥物,(A組)上述實施例5的藥物。(B組)用黃芪黨參水提取液,黃芪黨參各100克加水1000克煮2小時;(C組)I %乙醇,
I. 4試驗方法,記錄接種前每只小鼠體重。接種對數(shù)生長期H22細胞于小鼠右側腹股溝皮下,接種量約6. 0X106 /只。自接種第6日起,(C組)對照組5%葡萄糖生理鹽水溶液O. 2 O. 5 mL瘤內注射D6,8,10,12。實施例5的藥物(A組)I g / mL O. 2 O. 5 mL瘤內注射D6,8,10,12 ;,(B組)用黃芪黨參水提取液I g / mL O. 2 O. 5 mL瘤內注射D6,8,10,12 ;自接種第4日起每目測量小鼠右側腹股溝皮下移植瘤大小。瘤體體積V/4XaXb2 (a為長徑,b為短徑)。接種第12日,小鼠稱重后脫頸髓處死荷瘤小鼠,剝離瘤體后稱取瘤重。抑瘤率=(對照組瘤重一給藥組瘤重)/對照組瘤重X 100% :協(xié)同系數(shù)=對照組瘤重X聯(lián)合用藥組瘤重/ (單藥組①瘤重X單藥組②瘤重);當抑瘤率>40%,P〈0. 05判定有抗腫瘤作用;當協(xié)同系數(shù)〈I時為有協(xié)同性。I. 5統(tǒng)計學方法
所有數(shù)據(jù)均用(Xb)表示,采用Microsoft excel軟件對數(shù)據(jù)做統(tǒng)計學處理,采用方差分析。2結果(見表I)
表I本發(fā)明中藥制劑對H22移植瘤的影響(C組,空白)
權利要求
1.一種抑制肝癌轉移的的中藥制劑,其特征在于其主要有效成分是由以下重量份數(shù)的中藥原料制成的 黃芪10 — 30 ; 黨參10 — 20 ; 白術5 — 15 ; 白花蛇舌草20 — 40 ; 丹參5 — 15 ; 枸杞10 — 20 ; 白芍5 — 15 ; 麥冬5—15; 龜板10 — 25 ; 鱉甲10 — 25 ; 陳皮5 — 15 ; 炎甘草5 — 15。
2.如權利要求I所述的抑制肝癌轉移的中藥制劑的制備方法,其特征在于取黨參碾成粉末,備用;將龜板、鱉甲置于銅鍋中,加水淹沒過面,用文火加熱,保持微沸5 — 12小時,傾出煎液,先后共煎3-5次,直至充分煎出膠汁為度,然后過濾澄清,合并各次所煎膠液,過濾除去沉淀雜質,濃縮收膠,將過濾后的膠汁置銅鍋中用文火加熱濃縮,不斷攪拌,以防焦化,待濃縮至“掛旗”后收膠,將膠傾入凝膠盤內,使之自然冷凝,為加快膠汁凝固,也可加入5%-10%阿膠,取出凝固好的膠塊,用切膠刀切成小片,備用;黃苗、白術、白花蛇舌草、丹參、枸杞、白芍、麥冬、陳皮和炙甘草用體積濃度為50 - 90%的乙醇提取兩次,合并提取液,備用;過濾后濃縮,然后回收乙醇,加入龜板、鱉甲膠汁、并濃縮,得干浸膏,再與上述的黨參粉末合并,混合均勻,加入填充劑,制成膠囊或顆粒劑、片劑,得到產品;或者加入蔗糖或蜂蜜,混合均勻,做成丸劑。
3.權利要求I所述的抑制肝癌轉移的中藥制劑在制備治療肝癌的藥物方面的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種抑制肝癌轉移的中藥制劑及其制備方法,其主要原料包括黃芪、黨參、白術、白花蛇舌草、丹參、枸杞、白芍、麥冬、龜板、鱉甲、陳皮和炙甘草 等,制備方法是取黨參碾成粉末,再將各組分用水或乙醇提取,濃縮,合并,加入填充劑,制成固體制劑或液體制劑產品,本中藥制劑攻補兼施,標本兼顧,消痛散結,共奏滋陰養(yǎng)血、益氣復脈和調節(jié)人體免疫系統(tǒng)功能,抑制癌細胞的生長均有作用。
文檔編號A61K35/56GK102940773SQ20121051113
公開日2013年2月27日 申請日期2012年12月4日 優(yōu)先權日2012年12月4日
發(fā)明者鄧鑫, 梁健 申請人:鄧鑫

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