專利名稱：昆侖雪菊提取物及其新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及昆侖雪菊總黃酮的新用途，屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
高原世居人群及移居人群在獨特的自然環(huán)境中面臨低壓性缺氧的問題，在缺氧適應(yīng)過程中，從人的器官、組織到細(xì)胞水平，都發(fā)生了特殊的病理生理變化，部分人群因適應(yīng)不全而發(fā)生慢性高山病，常出現(xiàn)肺循環(huán)異常、腎功能不全、血壓異常及紅細(xì)胞容量和血紅蛋白容量異常相關(guān)的臨床癥狀，嚴(yán)重影響著高原人的身心健康。目前高原缺氧的治療方法有補(bǔ)氧及藥物治療，采用的方法如采用便攜式供氧裝置給氧或采用紅景天等藥物進(jìn)行治療。
《昆侖雪菊水溶性黃酮的制備及初步鑒定》(鄭大成，2010年10月《亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥》研究了水溶性的總黃酮)，其提取方法為取雪菊花藥材粉末10g，用I :10比例的水提取3次(每次60°C，50min)，減壓濃縮至小體積，用石油醚脫脂，再用正丁醇萃取，減壓回收正丁醇，得提取物I (樣品B)。將正丁醇萃取后的水層經(jīng)減壓濃縮至干，得水提物I。本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，昆侖雪菊的乙醇提取的總黃酮具有明顯的抗缺氧的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的之一在于提供昆侖雪菊在制備治療高原缺氧癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的還在于提供昆侖雪菊總黃酮在制備高原缺氧癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明目的在于提供一種治療高原缺氧癥的昆侖雪菊提取物。本發(fā)明目的還在于提供該昆侖雪菊提取物的制備方法。本發(fā)明目的還在于提供該昆侖雪菊提取物在制備治療高原缺氧癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的昆侖雪菊KunlunChrysanthemum,學(xué)名為兩色金雞菊(Coreopsis tinctoria),又名“雪菊”，維吾爾語“古麗恰爾”，為菊科多年生草本植物菊金雞菊Golden chrysanthemum同屬近緣植物昆侖雪菊的頭狀花序。一種治療高原缺氧癥的昆侖雪菊提取物，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量以蘆丁計為 20-90%。優(yōu)選地，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量為30-90%;優(yōu)選地，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量為35-90%;優(yōu)選地，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量為40-90%;優(yōu)選地，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量為45-90%;優(yōu)選地，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量為50-90%;優(yōu)選地，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量為55-90%;優(yōu)選地，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量為60-90%;優(yōu)選地，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量為70-90%;
進(jìn)一步優(yōu)選地，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量為75-90%。本發(fā)明所述昆侖雪菊提取物，可以是昆侖雪菊主要由乙醇提取得到的乙醇提取物；優(yōu)選地，所述昆侖雪菊由20-95%乙醇提取；優(yōu)選地，所述昆侖雪菊由25-95%乙醇提??；優(yōu)選地，所述昆侖雪菊由30-95%乙醇提??；優(yōu)選地，所述昆侖雪菊由35-95%乙醇提??；優(yōu)選地，所述昆侖雪菊由40-95%乙醇提取；優(yōu)選地，所述昆侖雪菊由50-95%乙醇提??；優(yōu)選地，所述昆侖雪菊由60-95%乙醇提??；優(yōu)選地，所述昆侖雪菊由70-90%乙醇提??；優(yōu)選地，乙醇提取溫度為40_100°C ；優(yōu)選地，乙醇提取1-4次，每次1-3小時。本發(fā)明所述昆侖雪菊提取物，還可以是昆侖雪菊采用水提醇沉法制備得到的提取物，其醇沉濃度為20-90%;優(yōu)選地，醇沉濃度為35-85% ；優(yōu)選地，醇沉濃度為40-85% ；優(yōu)選地，醇沉濃度為55-85% ；優(yōu)選地，醇沉濃度為65-85% ；優(yōu)選地，醇沉濃度為75-85% ；優(yōu)選地，水提取步驟中，溶劑用量為8-12倍量；提取次數(shù)為2-4次，每次O. 5-1. 5小時。本發(fā)明所述昆侖雪菊提取物還可以是上述昆侖雪菊乙醇提取物或水提醇沉物進(jìn)一步經(jīng)大孔吸附樹脂純化得到的產(chǎn)物；其中乙醇洗脫濃度為50-95% ；優(yōu)選的，大孔吸附樹脂為中等極性或弱極性；更優(yōu)選的，大孔吸附樹脂為弱極性；弱極性大孔吸附樹脂可以選擇DlOl大孔吸附樹脂。所述昆侖雪菊提取物，優(yōu)選由以下方法制備而成步驟I :昆侖雪菊用20-95%乙醇提取，濾過得濾液；步驟2 :濾液濃縮，加水稀釋，靜置，濾過，得濾液；步驟3 :濾液通過大孔吸附樹脂吸附，先后用水和/或低濃度乙醇洗脫到無色，最后用50-95%乙醇洗脫，收集50-95%乙醇洗脫液。優(yōu)選地，步驟I中的乙醇用量為藥材用量的4-12倍重量；優(yōu)選地，步驟I中的乙醇為70-90 %乙醇；優(yōu)選地，步驟I中40_100°C乙醇提取1-3次，每次1_3小時；優(yōu)選地，上述步驟2中的加水稀釋為加水稀釋至原體積的1-3倍，放置12-36小時，濾過；優(yōu)選地，上述步驟3中的大孔吸附樹脂柱為中等極性或弱極性；優(yōu)選地，上述步驟3 :濾液通過1-3倍重量大孔吸附樹脂吸附；
優(yōu)選地，上述步驟3中的低濃度乙醇為用5-30%乙醇；優(yōu)選地，上述步驟3中的低濃度乙醇為用5-20%乙醇；優(yōu)選地，上述步驟3，收集50-95%乙醇洗脫液后干燥，得昆侖雪菊提取物。本發(fā)明昆侖雪菊提取物可以按常規(guī)的制劑工藝制成藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型，例如膠囊劑、片劑、顆粒劑、散劑、口服液、丸劑、粉針劑等制劑。為使上述劑型能夠?qū)崿F(xiàn)，需在制備這些劑型時加入藥學(xué)可接受的輔料，例如填充齊 、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括淀粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括淀粉、預(yù)膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉等；潤滑劑包括硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括糖精鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味 劑包括甜味劑及各種香精；防腐劑包括尼泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質(zhì)包括PEG6000，PEG4000，蟲蠟等。本發(fā)明提供上述昆侖雪菊提取物在制備抗缺氧癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供上述昆侖雪菊總黃酮在制備抗缺氧癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供上述昆侖雪菊提取物在制備高原缺氧癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供上述昆侖雪菊總黃酮在制備高原缺氧癥藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明一種治療高原缺氧癥的昆侖雪菊提取物的制備方法，其制備方法為昆侖雪菊由乙醇提??；優(yōu)選地，所述昆侖雪菊由20-95%乙醇提??；優(yōu)選地,所述昆侖雪菊由60-95%乙醇提取；優(yōu)選地，所述昆侖雪菊由70-90%乙醇提??；優(yōu)選地，乙醇提取溫度為40_100°C ；優(yōu)選地，乙醇提取1-4次，每次1-3小時。昆侖雪菊還可以采用水提醇沉法制備，其醇沉濃度為60-90% ； 優(yōu)選地，醇沉濃度為75-85% ；優(yōu)選地，水提取步驟中，溶劑用量為8-12倍量；提取次數(shù)為2-4次，每次O. 5-1. 5小時。進(jìn)一步優(yōu)選地，昆侖雪菊經(jīng)乙醇提取或水提醇沉后還可以進(jìn)一步經(jīng)大孔吸附樹脂純化，其乙醇洗脫濃度為50-95% ；優(yōu)選的，大孔吸附樹脂為中等極性或弱極性；更優(yōu)選的，大孔吸附樹脂為弱極性；弱極性大孔吸附樹脂可以選擇DlOl大孔吸附樹脂。所述昆侖雪菊提取物，優(yōu)選由以下方法制備而成步驟I :昆侖雪菊乙醇提取，濾過得濾液；步驟2 :濾液濃縮，加水稀釋，靜置，濾過，得濾液；步驟3 :濾液通過大孔吸附樹脂吸附，先后用水和/或低濃度乙醇洗脫到無色，最后用50-95%乙醇洗脫，收集50-95%乙醇洗脫液。
優(yōu)選地，步驟I中的乙醇用量為藥材用量的4-12倍重量； 優(yōu)選地，步驟I中的乙醇為20-80 %乙醇；優(yōu)選地，步驟I中40_100°C乙醇提取1-3次，每次1_3小時；優(yōu)選地，上述步驟2中的加水稀釋為加水稀釋至原體積的1-3倍，放置12-36小時，濾過；優(yōu)選地，上述步驟3中的大孔吸附樹脂柱為中等極性或弱極性；優(yōu)選地，上述步驟3 :濾液通過1-3倍重量大孔吸附樹脂吸附；優(yōu)選地，上述步驟3中的低濃度乙醇為用5-30%乙醇；優(yōu)選地，上述步驟3中的低濃度乙醇為用5-20%乙醇； 優(yōu)選地，上述步驟3，收集50-95%乙醇洗脫液后干燥，得昆侖雪菊提取物。本發(fā)明所述水提醇沉法系指在中藥水提濃縮液中，加入乙醇使達(dá)到規(guī)定的含醇量(即醇沉濃度)，某些成分在醇溶液中溶解度降低析出沉淀，濾過，取乙醇溶液，回收溶劑，使水提液得以精制的方法。本發(fā)明由昆侖雪菊制成，昆侖雪菊性味苦、辛、微寒，菊味濃郁，湯色絳紅而清透，性苦、辛、味寒、歸肺、肝經(jīng)，《本草匯言》稱其可“破血疏肝，解疔散毒”，本發(fā)明昆侖雪菊總黃酮提取物制備而成的中藥制劑抗缺氧療效顯著，能能明顯延長小鼠在密閉缺氧條件下的存活時間，明顯延長小鼠亞硝酸鈉中毒致缺氧的存活時間，安全邊際高，具有廣闊的應(yīng)用前景；且本發(fā)明制劑所采用的制備方法能夠充分地提取出藥材中的有效成份，具有操作簡單，有效成份富集率高，生產(chǎn)成本低、能適應(yīng)工業(yè)化生產(chǎn)要求等優(yōu)點。實驗例I :常壓密閉缺氧實驗I實驗?zāi)康耐ㄟ^常壓密閉缺氧實驗?zāi)Ｐ?，觀察本發(fā)明的抗缺氧作用。2實驗材料A :本發(fā)明制劑(實施例I制備)，為棕褐色粉末狀物，每克干膏相當(dāng)于生藥16. 66g ；B :本發(fā)明制劑(實施例2制備)，為棕褐色粉末狀物，每克干膏相當(dāng)于生藥16. 32g ；C :本發(fā)明制劑(實施例3制備)，為棕褐色粉末狀物，每克干膏相當(dāng)于生藥16. 98g ；D :本發(fā)明制劑(實施例4制備)為棕褐色膏狀狀物，每克干膏相當(dāng)于生藥9g ；E :本發(fā)明制劑(實施例5制備)為棕褐色粉末狀物，每克干膏相當(dāng)于生藥3g ；F :對照藥紅景天提取物為棕褐色粉末狀物，實驗前用蒸餾水配制成O. 14g/ml的懸池液，相當(dāng)于6g原生藥材· kg4 · (Γ1 ；G :對照藥0. 5%普萘洛爾針劑，用蒸餾水稀釋成I. 2mg/ml ；H:生理鹽水3實驗動物將80只小鼠隨機(jī)分為8組，分別為本發(fā)明制劑5組、紅景天組、普萘洛爾組及生理鹽水組。4實驗步驟除普萘洛爾組以腹腔注射(給藥劑量0. 02g / kg)，其余組以灌胃給藥(藥物濃度O. 12g生藥量/ml，給藥體積O. 2ml/10g)。連續(xù)給藥8d，每日I次。末次給藥Ih后，將小鼠放入裝有IOg堿石灰的250mL廣口瓶內(nèi)，旋緊瓶塞，并涂以凡士林密封，立即記錄各組小鼠存活時間。5實驗結(jié)果根據(jù)實驗觀察，小鼠從缺氧到死亡過程中有紫紺和抽搐癥狀，以小鼠掙扎抽搐后突然癱軟并呼吸停止為死亡判定標(biāo)準(zhǔn)。用統(tǒng)計軟件SPSS17. O處理數(shù)據(jù)，結(jié)果均采用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示(X土s)，組間差異比較采用單因素方差分析(One way ANOVA)，方差齊者組間比較用LSD檢驗，方差不齊者用Tamhan^ s T2檢驗，以P〈0. 05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。表I雪菊總黃酮對常壓密閉缺氧的影響(η=10，?！? )
權(quán)利要求
1.昆侖雪菊提取物，其特征在于，該提取物的是通過用質(zhì)量濃度為20-95%乙醇提取昆侖雪菊制備得到。
2.如權(quán)利要求I所述的提取物，其特征在于乙醇的質(zhì)量濃度為60-95%。
3.如權(quán)利要求I所述的提取物，其特征在于昆侖雪菊由乙醇提取后還包括大孔吸附樹脂純化的步驟；所述大孔吸附樹脂為中等極性或弱極性。
4.如權(quán)利要求3所述的提取物，其特征在于該提取物的制備方法包括如下步驟 步驟I :昆侖雪菊用20-95%乙醇提取，濾過得濾液； 步驟2 :濾液濃縮，加水稀釋，靜置，濾過，得濾液； 步驟3 :濾液通過大孔吸附樹脂吸附，先后用水和/或低濃度乙醇洗脫到無色，最后用50-95%乙醇洗脫，收集50-95%乙醇洗脫液。
5.昆侖雪菊提取物在制備抗缺氧藥物中的應(yīng)用，所述昆侖雪菊提取物中總黃酮含量以蘆丁計為20-90% ;優(yōu)選總黃酮含量以蘆丁計為30-90% ;優(yōu)選總黃酮含量以蘆丁計為35-90% ;優(yōu)選總黃酮含量以蘆丁計為40-90% ;優(yōu)選總黃酮含量以蘆丁計為45-90% ;優(yōu)選總黃酮含量以蘆丁計為50-90% ;優(yōu)選總黃酮含量以蘆丁計為55-90% ;優(yōu)選總黃酮含量以蘆丁計為60-90% ;優(yōu)選總黃酮含量以蘆丁計為70-90% ;優(yōu)選總黃酮含量以蘆丁計為75-90%。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述缺氧為高原缺氧。
7.如權(quán)利要求5或6所述的應(yīng)用，其特征在于昆侖雪菊提取物選自由如下方法A、B任意一種制備得到的提取物 方法A包括昆侖雪菊主要由乙醇提取制備得到的乙醇提取物； 方法B為昆侖雪菊采用水提醇沉法制備得到的提取物。
8.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于昆侖雪菊乙醇提取物或水提醇沉物進(jìn)一步經(jīng)大孔吸附樹脂純化得到的精制產(chǎn)物。
9.昆侖雪菊總黃酮在制備預(yù)防或治療高原缺氧藥物中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求1-4任一所述的提取物在制備預(yù)防或治療高原缺氧藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開昆侖雪菊提取物及其新用途，該提取物的是通過用質(zhì)量濃度為20-95％乙醇提取昆侖雪菊制備得到。本發(fā)明還提供了昆侖雪菊提取物在制備抗缺氧藥物中的應(yīng)用，以及在制備預(yù)防或治療高原缺氧藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明抗缺氧療效顯著，能明顯延長小鼠在密閉缺氧條件下的存活時間，明顯延長小鼠亞硝酸鈉中毒致缺氧的存活時間，安全性高，具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號A61K36/28GK102836195SQ20121036564
公開日2012年12月26日 申請日期2012年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月20日
發(fā)明者伍文彬, 劉濤 申請人:伍文彬